落花生煎液对离体蛙心收缩活动的探讨
【摘要】 为了探讨落花生煎液对离体蛙心收缩机制的影响,采用离体蛙心灌流法,BL-420智能生物信号系统观察落花生煎液对离体蛙心收缩力和心率的影响。结果落花生煎液对离体蛙心有正性肌力作用无正性频率作用,心得安、异搏定均能拮抗落花生煎液对心肌的正性肌力作用。认为落花生煎液对离体蛙心的正性肌力作用与心肌细胞膜上β受体和Ca2+通道有关。
【关键词】 落花生煎液;心肌;正性肌力;β受体;Ca2+通道
落花生枝叶具有“昼开夜合”的特性,与人体“入夜则寐,入昼则寤”的界阴阳消长相一致。其味甘,微苦涩,入肝、心、肺三经,具有平胆潜阳,安神健脑,镇咳止血的功能。可以各种原因引起的失眠症、脑动脉硬化、高血压、小儿夜啼、多动症、气管炎[1]。近年关于落花生煎液治疗人体失眠症的临床研究报道较多[2],对心脏活动影响的机制尚不十分清楚。本实验试图在蟾蜍离体心脏标本上观察落花生煎液对心脏活动的直接效应,并初步探讨其作用机制。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 实验动物
蟾蜍,由宁夏医学院动物实验中心提供,体重60~80ɡ不等,雌雄不拘。
1.1.2 药物
落花生(宁夏产),临床用量为生药0.40g/(kg·d),成人体重按60kg,由宁夏医学院中药教研室鉴定,配制成0.10ɡ/mL落花生煎液。任氏液(宁夏医学院生理实验室配制);心得安(250μg /mL),山西云鹏制药有限公司,批号20060602;异搏定(250μg /mL),上海科技有限公司,批号6E12001。
1.1.3 实验仪器
肌张力换能器JH-2型(北京-航天医学工程研究所)、托盘天平(上海医用激光仪器厂)、BL—410智能生物信号系统(成都泰盟公司)。
1.2 方法
1.2.1 落花生煎液的配制
将购置的新鲜落花生枝叶晾干,剪成3cm长短,称重,清洗,浸泡约15min,先武火煎15min,再文火煎15min,用多层纱布过滤,再重复煎一次,求得其质量浓度。最后将其盛于容量瓶内,放入冰箱中备用。
1.2.2 离体蛙心的制备
采用常规蛙心插管法[3]
1.2.3 实验分组
A组单纯施加落花生煎液,观察落花生煎液对正常心脏活动的影响。每次实验时用新鲜的含落花生煎液的任氏液1mL置换心套管内的任氏液,观察落花生煎液的作用,记录施用落花生煎液前、后的心脏收缩曲线作同体对照,每次使用落花生煎液后待有明显反应并继续记录2~6min,再用新鲜的任氏液1mL替换心套内的液体数次,而后加入新鲜的任氏液1mL待心脏活动恢复平稳后,进行下一次观察,本组实验共10例次。B组用心得安(0.3mL)预处理,然后按A同样方法观察落花生煎液对心得安预处理后心脏活动的影响,本组实验共观察10例次。C组用异搏定(0.3mL)预处理,观察落花生煎液对异搏定预处理后心脏活动的影响,本组实验共观察10例次。
1.3 统计学方法
利用SPSS 11.5统计软件,各组所得数据均以(x±s)表示,采用t检验。
2 结果
2.1 落花生煎液对正常心脏收缩幅度和心率的影响(表1)表1 不同药物预处理对离体蛙心收缩幅度和心率的影响(略)
在10例次正常心脏实验中,用落花生煎液后,心脏活动明显加强(心加强效应),心搏曲线显示在施加落花生煎液后即刻(20s内),心收缩幅度即开始增加并迅速达到最高值(称为早期心加强效应),然后缓慢下降维持在较施用落花生煎液前较高的水平上6~8min左右(称后期心加强效应),但未观察到心率的明显变化。施用落花生煎液后即刻和6min时的心缩幅度与施用落花生煎液前比较差异有统计学意义(P<0.01)。
2.2 不同药物预处理对落花生煎液早期心加强效应的影响
在各种预处理条件下,加入落花生煎液后心缩幅度下降,心得安和异搏定预处理组分别与施用落花生煎液前比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),但未观察到心率的明显变化(表1)。
2.3 不同药物预处理后对落花生煎液后期心加强效应的影响
经药物处理后,施用落花生煎液后6min时的心缩幅度(后期效应)与施用落花生煎液前比较,心得安和异搏定预处理组差别均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),但未观察到心率的明显变化(表1)。
3 讨论
实验结果说明,落花生煎液对蟾蜍离体心脏活动有明显的加强作用,主要表现为正性变力效应(心缩幅度增强),而对心率无明显影响,落花生煎液对心脏的正性变力效应可分为早期和后期两个时相,早期时相的正性变力效应在施用落花生煎液后20s左右即表现出来,后期效应紧接早期效应可持续达6~8min,落花生煎液的这种加强心缩强度而不改变心搏频率的作用,有利于改善心脏功能而不增加心脏负担。由于本实验是在离体心脏上观察,不受神经因素和其它体液因素的影响,故认为落花生煎液的这种心加强效应是对心肌的直接作用。
对落花生煎液心加强效应的机制问题,我们认为,当用心得安(B组)对心脏进行预处理后,减弱了落花生煎液的心加强效应,与未经预处理的心脏比较有统计学意义(P<0.05),提示这与心肌细胞膜上的β受体有关。用异搏定(C组)对心脏进行预处理后,减弱了落花生煎液的心加强效应,与未经预处理的心脏比较有统计学意义(P<0.01),提示这与心肌细胞膜上的Ca2+通道有关。
据付红伟报道[4],落花生枝叶的化学成分主要是原儿茶酸、对羟基苯甲酸、对甲氧基苯甲酸、对羟基桂皮酸、对甲氧基桂皮酸、异香草酸和异阿魏酸,至于落花生煎液中哪些具体成分对心肌收缩机制起作用,有待进一步研究。
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[1]王翘楚,冯蓓蕾,徐建,等.落花生枝叶制剂失眠症疗效观察[J].上海中医药杂志,2001,35(5):8-10.
[2]施明,许红,张晓峰,等.落花生枝叶治疗失眠症临床观察和药理研究[J].江苏中医药,2003,24(7):48-50.
[3]林平,潘慧,苏付荣,等.离体蛙心灌流实验方法的比较研究[J].病理生理杂志,2005,21(7):1455-1456.
[4]付红伟,郑春辉,曹家庆,等.落花生枝叶化学成分的研究(Ⅱ)[J]. 中国药物化学杂志,2001,16(5):309-310.