免疫散射比浊法测定CRP

【关键词】  散射比浊法

　　［摘 要］ 目的  本文对比浊法测定血清CRP（C-反应蛋白）进行方法学评价。 方法  采用免疫散射比浊法检测100例患者和30例健康正常人血清CRP含量，同时与乳胶凝集法结果对比。 结果  批内、批间变异系数分别为1.41%和4.66%，定量检测具有满意的线性响应（r=0.987），免疫比浊法阳性率为35%，乳胶法为18%，比浊法阳性率明显高于乳胶法。 结论  本方法的重复性、准确性、稳定性、特异性均较好，脂血、黄疸无明显影响，具有较高的临床推广价值。
      
　　［关键词］ 散射比浊法;乳胶凝集法;C-反应蛋白
            
     
　　Abstract:Objective Methodological evaluation of nephelometry was performed in the detection of serum CRP.Methods The levels of se-rum CRP in100patients and30normal subjects were determined by two methods:nephelometry and latex agglutination test，and the results were compared.Results The CV value of intra-assays of CRPwas1.41%，and that of inter-assays of CRPwas4.66%.Quantification detection shows a satisfactory line relation（r=0.987）.The positive rate of CRPwas35%by nephelometry，and18%by latex agglutination test.A higher positive rate was obtained by nephelometry in comparison with latex latex agglutination test.Conclusion Nephelometry is quite good in replication，accura-cy，stability，and specificity，and not affected by lipid and jaundice.Nephelometry is valuable in clinical application.
     
　　Keywords:nephelometry;latex agglutination test;CRP
      
　　CRP是一种急性期反应蛋白，能激活补体、促进吞噬并具有其他的免疫调控作用。在各种急性和慢性感染、组织损伤、恶性肿瘤、心肌、手术创伤、放射线损伤等时，CRP在病后数小时迅速升高，病变好转时又迅速降至正常。目前国内CRP的检测普遍采用胶乳凝集法和免疫扩散法，这两种方法虽然操作简便，但其重复性、稳定性等较差，阳性率低。国外主要采用ELISA和比浊法进行CRP的检测。国内近年来也逐渐开始采用比浊法对CRP进行定量分析，我们采用半自动散射比浊仪检测了100例患者和30例健康人血清CRP含量，并同时与乳胶法进行比较分析。
    
　　1 材料与方法
　
　　1.1 仪器和试剂
    
　　半自动免疫比浊仪TURBOX（r）PLUS、CRP测定试剂盒均购自ORION公司。

　　1.2 检测对象
    
　　体检健康血清30例，患者100例。测定CRP含量，并收集患者血清30份混合、分装、冷冻保存待用。

　　1.3 检测方法
    
　　采用散射比浊法，反应杯中加入配制好的反应液0.5ml（30ml缓冲液加入0.5ml试剂），混合均匀，室温（20～25℃），反应25～35min，免疫散射比浊仪测定。CRP正常值为小于10mg/ml。乳胶凝集试验按试剂盒说明书操作。

　　1.4 统计学处理
    
　　用t检验和χ2 检验对结果进行分析。

　　2 结果
    
　　2.1 两种方法检测和结果比较

　　检测100例患者血清CRP，比浊法阳性率为35%，乳胶法阳性率为18%，比浊法阳性率高于乳胶法。通过配对χ2 检验两种方法检测CRP的阳性数有显著性差异（P<0.05），30例体检健康正常人CRP值均小于10mg/ml。

　　2.2 批内、批间精密度检测
    
　　取混合患者血清一份，作批内重复测定20次，结果显示CV值为1.41%，在仪器所标明的范围内（<5%），批间试验每天一次共20次，结果显示CV值为4.66%，在仪器标明的8%范围内。
    
　　2.3 线性关系评价
    
　　取患者混合高值血清一份测定CRP含量，然后作倍比稀释共5个稀释度，结果表明该方法具有满意的线性响应（r=0.987）。
    
　　2.4 干扰试验
    
　　脂血（甘油三脂4.51mmol.L和15.7mmol.L）、黄疸（总胆红素84.3μmol.L和315μmol.L）对测定结果无明显影响。

　　3 讨论
      
　　传统的乳胶凝集法检测CRP缺乏精确度，样品的滴度是靠稀释血清的阳性结果来确定的，不能定量地表示检测结果，而且对于小量低浓度的CRP不够敏感，因而不能满足临床对医学检验的要求［1］ 。为了能够给临床提供反映患者免疫功能状况及疗效的指标，国内近年来逐渐开始对CRP进行定量测定，采用得较多的方法是ELISA法，但该法操作较为复杂，特异性和重复性均不如免疫散射比浊法，免疫散射比浊法具有试剂稳定，操作简便，流程短，重复性和精确性好的优势［2-4］ 。作者利用ORION公司提供的半自动免疫比浊仪TURBOX（r）PLUS，采用散射免疫比浊法检测了100例患者和30例健康人群CRP含量，同时以乳胶法作对照，结果显示两种方法检测的阳性率有显著性差异（P<0.05）。散射比浊法检测批内、批间变异系数分别小于5%和8%，与有关
［2］ 报道一致，其重复性好、特异性强且操作简便，明显优于乳胶法。总之免疫比浊法测定CRP是一种快速准确的定量检测方法，是今后临床检测CRP值得推广的方法，但是比浊法也与乳胶法测定CRP一样存在免疫学中抗原过剩而引起的钩状效应，导致假阴性产生。目前国内尚无比浊法试剂我们采用的试剂及仪器均为进口产品，因而成本较贵，建议国内试剂生产厂家能生产此类试剂使此法能被广泛应用。

　　［文献］
     
　　［1］杨溢，陈其云，杨扬，等.免疫比浊法测定血清C-反应蛋白（CRP）的评价［J］.四川省卫生管理干部学院学报，2003，22（3）:165-166.

    ［2］杨卫东.外科手术中CRP检测应用的探讨［J］.赣南医学院学报，2001，21（1）:52-53.

    ［3］陆青，杨海敏.全血CRP测定仪及其试剂的评估［J］.上海医学检验杂志，1999，14（5）:268-269.

    ［4］陈万珍.CRP检测的临床价值［J］.现代医药卫生，2002，18（6）:515-516.