肺癌患者的MCP-1表达及其临床意义

           作者：汪晓峰 唐春妍 龚剑萍  

【关键词】  肺癌患者

    最近的研究中发现单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）和肿瘤的血管生成有关，但在肺癌中少有报道。作者2006年11月至2007年4月通过酶联免疫吸附法(ELISA)对31例肺癌、16例肺结核患者以及正常对照20例的血清MCP-1表达进行检测，探讨MCP-1与肺癌的关系以及其临床意义。

　　1  资料与方法

　　1.1  对象 

　　肺癌患者31例，其中男24例，女7例；年龄36～73岁；根据国际TNM分期，早期肺癌(I、II期)13例、晚期肺癌(Ⅲ、Ⅳ期)18例。肺结核患者16例，其中男12例，女4例；年龄35～68岁。正常对照组20例，其中男15例，女5例；年龄35～65岁。均为健康成年人。

　　1.2  标本收集 

　　抽取空腹外周静脉血5ml，以2500r/min离心15min，取上清液，置于－20℃备检。

　　1.3  主要仪器和试剂
 
　　酶标仪(Bio-RAD Model 550，Biol-Tiok公司)，台式高速低温离心机(Avanti J-30I Centrifuge，美国Beckman公司)，振荡仪(WSZ-l00-A)，37℃孵箱，普通离心机，RANTES的ELISA试剂盒(Catalog Number DSA00，美国R&D公司)。

　　1.4  MCP-1 检测方法 

　　采用酶联免疫吸附试验（ELISA），操作按照R&D试剂盒说明书进行。主要步骤：分别向包被鼠抗人MCP-1单抗的微孔内加入50μl的MCP-1标准品或检测血清，按1：3稀释，将96孔板盖上薄膜置于室温中孵育2 h，孵育后洗涤3次。分别加入50μl酶联复合物，显色，全自动酶标仪分别读取MCP-1浓度，标本均行复孔检测，均值为终浓度。

　　1.5  统计学处理

　　数据以(x±s)表示，组间比较采用SPSS 11.0 软件作t检验。以P<0.05为差异有显著性。

　　2  结果

　　2.1  肺癌、肺结核患者和正常人MCP-1水平比较 

　　早期肺癌以及肺结核患者的外周血MCP-1数值相接近，其表达水平较正常人高，但差异无显著性（P＞0.05），晚期肺癌患者MCP-1表达水平明显高，不仅比正常对照组升高，而且比早期肺癌以及肺结核患者均高。见表1。表1  各组血清MCP-1的水平(略)注：与另三组相比，?p<0.05

    化学趋化因子MCP-1为具有重要生理作用的化学趋化因子，其表达水平与许多恶性肿瘤进展、血管生成、局部炎性细胞浸润、转移或侵袭能力及预后密切相关，阳性表达者进展快、血管生成密度高，炎性细胞浸润量多、易发生转移、侵袭能力强及预后差［1，２］。 肿瘤细胞分泌的趋化因子与相应受体或配体结合后能促进癌间质炎性细胞浸润、肿瘤血管生成、癌基质蛋白降解及影响癌细胞本身生物学行为(如增生活性增加、促血管生成因子合成增加等)［３］。

    肺癌的实体肿瘤形成后，进入无血管的浸润前期，肿瘤细胞主要靠周围组织的弥散供给营养，此时肿瘤结节直径一般＜2～3mm。一旦肿瘤直径＞2～3mm，肿瘤组织内开始有新血管生长，肿瘤生长加速，且极易发生浸润和转移。所以，肿瘤血管生成和由此建立的肿瘤微循环是实体瘤持续生长和浸润转移的先决条件。

    本研究表明，早期肺癌和结核病患者的MCP-1的表达水平较正常人轻度升高，可能与局部血管生成、炎性细胞浸润有关。但在晚期肺癌，即在发生转移的患者中，MCP-1的表达明显上升，提示MCP-1与肿瘤血管生成有密切的相关性。MCP-1主要由肿瘤细胞分泌，也可由间质细胞分泌。近期研究结果表明，在浸润的巨噬细胞中可以观察到MCP-1的丰富表达［4］，这与本研究结果相符。MCP-1参与多种病理、生理过程，可以通过二个方面发挥肿瘤血管生成作用:（1）MCP-1可以直接促进血管生成。在许多炎性疾病中，如动脉粥样硬化和类风湿性关节炎，这些疾病的显著特点就是有较多的血管生成，而且MCP-1有着较高的表达［5］；（2）MCP-1通过使肿瘤内浸润的巨噬细胞，即所谓肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）聚集、迁徙而发挥间接的血管生成作用［6］。

    本研究显示晚期肺癌中MCP-1的丰富表达，表明MCP-1在促进肿瘤血管生成中有一定的作用，在临床上可能提示肿瘤病变的分期和预后转归等变化，但肺癌中MCP-1产生的机制仍需采用其它分析手段做进一步研究。

【】
  　　1 Conti I, Dube C, Rollins BJ. Chemokin-based pathogenetic mechanisms in cancer. Novartis Found Symp，2004，256:29～41.

　　2 Wislez M, Philippe C, Antoine M,et al. Upregulation of bronchioloalveolar carcinoma derived CXC chemokines by tumor infiltration inflammatory cells. Inflamm Res，2004，53:4～12.

　　3 Takayuki U，Masakazu T. Significance of macrophage chemoattractant protein-1 in macrophage recruitment，angiogenesis，and survival in human breast cancer.Clinical Cancer Research，2000，6:3282～3289.

　　4 Rosalbo S，Maria LP.Human endothelial cells express CCR2 and respond to MCP-1:direct role of MCP-1 in angio-genesis and tumor progression.Blood，2000，96（1）:34～40.

　　5 Koch AE，Kunkel SL，Harlow LA，et al.Enhanced production of monocyte chemoattractant protein-1 in rheumatoid arthritis.J Clin Invest，1992，90:772～779.

　　6 Ohta M, Kitada V, Tanaka S, et al. Monocyte Chemoattractant protein-1 expression correlates with macrophage infiltration and tumor vascularity in human gastric carcinomas. Int J Oncol，2003，22:773～778.