敌百虫对体外人外周血淋巴细胞微核率的影响
作者:周好乐 郑明霞 杨茜 张三润 李杰
【摘要】 目的 研究敌百虫对体外人外周血淋巴细胞染色体的影响。方法 用不同浓度的敌百虫溶液处理培养中的淋巴细胞,观察其微核率的变化,并用χ 2检验方法做显著性检验。结果 实验组微核率均显著高于对照组(P<0.05或P<0.01)。结论 敌百虫对体外人外周血淋巴细胞染色体有不同程度的损伤作用。
【关键词】 敌百虫;淋巴细胞;微核
【Abstract】 Objective Effects of trichlorfon on peripheral lymphocyte chromosome out of human body was studied. Methods Lymphocytes in culture fluid were treated by supplementing different doses of trichlorfon , then the changes of micronucleus rates were observed . The significance tests with χ2 -test were conducted.Results Micronucleus rates of test group were obviously higher than those of the control(P<0.05或P<0.01).Conclusion Trichlorfon may exert different degree of damage to peripheral lymphocyte chromosome out of human body.
【Key words】 trichlorfon; lymphocyte; micronucleus
农药是保证农作物增产的重要生产资料,它给社会创造了巨大的效益,同时农药的使用也付出了巨大的代价,那就是农药的毒性给人类和环境带来的不可逆转的不利影响。随着农药的普遍使用,在环境和农副产品中的残留非常普遍。农药进入体内的途径主要是随食入农药污染的农副产品而逐渐蓄积,因此对其毒性研究已成为一大主要公共卫生问题。目前,虽然有关农药毒性的研究较多,但关于农药遗传毒性的研究资料还比较缺乏。本文结合地方特点,选择常用的有机磷农药敌百虫为研究对象,拟用人外周血淋巴细胞微核试验检测其遗传毒性,旨在为有机磷农药对农副产品污染的综合防治提供依据。
1 材料和方法
1.1 主要试剂及仪器 90%敌百虫原药,山东大成农药股份有限公司生产;1640混合培养基,北京易世盛达科技有限公司提供;B1-220ASCLED生物显微镜,麦克奥迪实业集团有限公司提供。
1.2 血样 正常人外周血取自健康大学生,共取8份,男女各半,平均年龄21岁,均无致染色体畸变的药物史和放射线接触史。
1.3 实验分组 每份血液分为两组,即实验组和对照组,实验组培养3瓶,对照组培养1瓶。培养48h后,实验组每瓶培养液中分别加入0.1ml不同浓度的敌百虫溶液(生理盐水配置),使染毒终浓度分别为50、100、200g/ml;对照组培养液中加入等量的生理盐水。
1.4 微核测定及数据处理 参照Chang[1] 的方法进行微核标本的制备与检测。每例选择胞浆完整的淋巴细胞计数1000个。出现小于主核1/3,染色与主核一致,完全与主核分开的圆形或椭圆形小核的细胞计为1个微核细胞,以千分率(‰)表示。微核率数据采用SPSS11.5软件进行χ2检验。
2 结果
表1显示,敌百虫染毒浓度50、100、200g/ml实验组的微核率依次为3.13、5.00、6.63‰,与对照组(1.50‰)比较均明显增高,差异均具有显著性(P<0.05或 P<0.01),且微核率随染毒剂量的增大而增高。表1 实验组与对照组微核率的比较注:χ2检验与对照组比较,*P<0.05,**P<0.01
3 讨论
微核是染色体畸变在间期核中所表现的一种损伤类型,并且它在细胞中的出现率与染色体畸变呈正相关[2] 。因此,可以根据细胞质内出现的微核来判断某些物质对染色体损伤的效应。国内外学者运用不同的研究方法,包括体内研究与体外研究,以不同的指标检测了有机磷农药的遗传毒性作用。汤艳等[3]用人外周血淋巴细胞彗星试验检测乐果、甲基对硫磷等杀虫剂的遗传毒性,结果显示,乐果、甲基对硫磷等杀虫剂可引起DNA损伤。 洪承皎等[4]报道有机磷农药接触工人外周血淋巴细胞彗星细胞率显著高于对照组。赵玉等[5]就有机磷农药敌百虫对胎鼠RET基因转录和致突变作用进行了研究,认为敌百虫可能导致RFT基因突变。本实验显示,不同剂量的敌百虫溶液均可增高体外人外周血淋巴细胞微核率。表明敌百虫对染色体有不同程度的损伤作用,具有遗传毒性效应。众所周知,遗传物质的改变和致突变、致癌、致畸是紧密相关的,因而提示残留有机磷农药对人体的潜在遗传毒性是不容忽视的。
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1 Chang WP,Tsai MS,Hwang JS,et al. Follow-up in the micronucleus frequencies and its subsets in human population with chronic low-dose gamma-irradiation exposure. Mutat Res, 1999,428(1-2):99-105.
2 杨茜,杜金茹,栗淑媛,等. 锰中毒患者外周血淋巴细胞微核率的观察. 化工劳动保护·卫生与职业病分册,1995,16(3):110-111.
3 汤艳,张青碧,甘仲霖,等. 杀虫剂诱导人外周血淋巴细胞DNA损伤.预防医学,2006,33(8):1342-1343.
4 洪承皎,童建,王静.单细胞电泳检测有机磷农药接触工人外周血淋巴细胞DNA损伤.工业卫生与职业病,2002,28(5):303-304.
5 赵玉,元李涛. 有机磷对胎鼠RET基因转录和致突变作用的研究.兰州医学院学报,2002,28(3):9-13.