养阴抗毒胶囊及拆方对阴虚大鼠皮质醇,超氧化物歧化酶和丙二醛的影响

                 作者：李宁，史恒军，侯颖，郭景华 

【摘要】  目的： 探讨养阴抗毒胶囊及拆方对氢化可的松所致阴虚大鼠血清中氧化与抗氧化平衡的影响作用. 方法： SD大鼠40只,随机分为对照组、阴虚模型组(YD)、养阴抗毒胶囊组（YC）和拆方抗毒组（大小蓟、槐花）. 大鼠在中药预处理及造模给药9 d后处死,以大鼠血清中皮质醇（CORT），超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量为指标进行实验观察. 结果： 与对照组相比，YD组大鼠血清CORT，MDA含量分别为（9.10±1.70） μg/L,（27.16±8.54）Nu/mL，明显升高，SOD含量（520.75±126.87） μmol/L，明显降低，差异具有统计学意义（P<0.05）；与YD组相比，YC组大鼠血清SOD含量（801.10±41.57） μmol/L，明显升高，（P<0.05），CORT，MDA含量分别为（6.01±2.11） μg/L，（10±1.40） μmol/L，明显降低，差异具有统计学意义（P<0.05）；而拆方抗毒组无明显变化，差异无统计学意义（P>0.05），符合方剂的“整体取性”原理. 结论： YC通过改变大鼠血清中SOD活性和降低MDA含量,对阴虚大鼠的抗氧化能力产生一定的影响.

【关键词】  养阴抗毒胶囊；阴虚；氢化可的松；超氧化物歧化酶；丙二醛；大鼠

　　0引言

　　近年来大量的补肾中药对抗氧化能力影响的实验研究显示，补肾中药有不同程度的抗氧化损伤作用，能够提高动物血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)活性，降低丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量［1-2］. 有研究［3］表明，养阴抗毒胶囊(nourishing yin antitoxic capsule, YC)能有效地保护模型动物肾上腺皮质网状带不受大剂量外源性糖皮质激素（glucocorticoids, GC）的破坏，对GC所致的各种阴虚症状有很好的疗效. 但YC作为滋阴补肾方剂能否提高动物血清SOD活性，降低MDA含量研究报道甚少. 为此，我们通过复制阴虚损伤大鼠模型来观察YC对皮质醇（cortisol，CORT），SOD和MDA的影响，为临床进一步应用YCGC不良反应提供实验依据.

　　1材料和方法

　　1.1材料清洁级SD大鼠40只,雄性,体质量(200±20) g （合格证编号SCXK(军)2002?2005第四军医大学实验动物中心)；YC(由第四军医大学唐都药剂科生产，批号：20050406,药物组成：羚羊角、西洋参、石斛、生地黄、茜草、连翘、仙鹤草、大蓟、小蓟等)；大小蓟、槐花的颗粒剂各25 g（广东一方制药厂）；氢化可的松注射液（西安利君沙药业有限公司，批号060413）；SOD，MDA试剂盒（南京建成生物工程研究所，批号20050126/20050117）；CORT放射免疫分析药盒（北京北方生物技术研究所，批号051020, 批内变异系数<10%）.

　　1.2方法

　　1.2.1实验分组将大鼠随机分为对照组，阴虚模型（yin deficiency model，YD）组，YC组和拆方抗毒组（大小蓟、槐花），每组动物10只.

　　1.2.2模型制作将YC胶囊内粉末进行再次粉碎，过100目筛，加入蒸馏水后超声振荡成5 mg/mL的混悬液，拆方抗毒组颗粒剂在临用前加入蒸馏水配制成浓度为5 mg/mL的混悬液，YC，拆方抗毒组颗粒剂按成人7.5 g/d剂量的25倍［4］，每日早晨给予2 mL相应的药液灌胃,共7 d. 对照组及YD组给予2 mL/d的蒸馏水灌胃,共3 d. 第4日起除对照组外,YD组，YC组和拆方抗毒组均按阴虚大鼠模型复制方法［4-5］,每日17∶00按50 mg/kg剂量给予氢化可的松灌胃,连续4 d,对照组给予2 mL/d的蒸馏水灌胃. 阴虚模型复制成功的指标是血清CORT含量的升高，各组均在造模结束1 d后取血处死.

　　1.2.3血清SOD, MDA, CORT含量的检测各组均在造模结束1 d后（第9日）08∶00~12∶00间，以1 mL/kg剂量速眠新Ⅱ麻醉后心脏取血，测定血清SOD, MDA, CORT的含量. SOD含量测定用黄嘌呤氧化酶比色法，MDA含量测定用硫代巴比妥钠比色法，CORT的含量测定用放射免疫法（RIA），操作严格按说明书进行.

　　统计学处理： 计量资料用x±s表示，采用SPSS10.0统计软件进行数据分析，组间比较采用方差分析和t检验，P<0.05为差异具有统计学意义

　　2结果

　　2.1大鼠血清CORT的含量变化YD组血清CORT含量明显高于对照组（P<0.05），阴虚动物模型复制成功［6］ . YC组CORT含量低于YD组（P<0.05）,提示YC对外源性GC所致阴虚大鼠血清CORT亢进有一定抑制作用，而拆方抗毒组无明显变化，差异无统计学意义（P>0.05，表1）.

　　2.2大鼠血清SOD，MDA的含量变化与对照组相比，YD组SOD活性明显降低，MDA含量明显升高，差异有统计学意义（P<0.05），与YD组相比，YC组大鼠血清SOD活性明显升高, MDA含量明显降低，差异有统计学意义（P<0.05），而拆方抗毒组无明显变化，差异无统计学意义（P>0.05，表1）.

　　表1养阴抗毒胶囊及拆方对糖皮质激素致阴虚大鼠血清CORT， SOD和MDA的含量的影响（略）

　　aP<0.05 vs 对照； cP<0.05 vs 阴虚模型.

　　3讨论

　　氧自由基是免疫细胞发挥作用的“效应物质”［7］ . SOD，MDA是反映抗氧化能力的重要指标［8］.

　　本实验结果表明： 在YD组大鼠的血清中, MDA含量明显升高,而与此同时SOD活性却有所下降.这说明糖皮质激素水平升高影响了机体清除超氧阴离子自由基的能力，使细胞生成大量MDA. 而在YC组结果却明显相反，证明YC能提高阴虚大鼠血清中SOD活性，减少MDA含量. 提示YC发挥作用可能与机体清除氧自由基和羟自由基，抑制生物膜不饱和脂肪酸过氧化反应，缓解氨基多糖的解聚作用，激发内源性抗氧化酶活性和抗体内脂质超氧化,减少在代谢中产生的“自由基”对细胞膜的损害有关，从而缓解了肾上腺功能亢进症状, 达到滋阴清热，改善阴虚状态的功效. 拆方抗毒组对SOD，MDA无明显变化，说明总方组优于拆方组，验证了方剂的“整体取性”原理. 本方中各药都有抗氧化作用，而YC的作用可能是通过多靶点、多层次的调节方式，提高大鼠血清中SOD 活性，降低MDA 含量，使机体的氧化与抗氧化系统恢复平衡,但具体哪一种或几种成分的作用还有待进一步研究.

【】
  　　［1］ 宋建平，张瑞，李瑞琴，等. 肾气丸对肺纤维化大鼠肺组织及血清中超氧化物岐化酶活力的影响［J］. 中医基础医学杂志，2005，11（6）:418-419.

　　［2］ 潘伟，杨兴文，魏长志，等. 心脑神口服液对大鼠抗氧化损伤作用的实验研究［J］. 中国中医急症，2006，15（7）:762-763.

　　［3］ 张立勇,史恒军，赵宁侠. 养阴抗毒胶囊对强的松所致大鼠肾上腺皮质网状带细胞超微结构损伤的影响［J］. 第四军医大学学报,2005，26(12):1146-1148.

　　［4］ 施新猷. 比较医学［上册］［M］. 西安：陕西技术出版社，2002:233.

　　［5］ 刘旭光,宋开源,余曙光,等. 阴虚阳虚大鼠促肾上腺皮质激素及皮质酮昼夜节律的差异研究［J］. 四川中医, 2002，20(1):6-8.

　　［6］ 刘蓬，邱宝珊，王培源，等. 肾阴虚对豚鼠的影响及补肾中药的拮抗作用［J］. 中国中西医结合耳鼻喉科杂志，2001，9(2):59-63.

　　［7］ 刘金元，杨冬娣，杜标炎，等. 六味地黄汤抗胸腺和脾脏萎缩作用的实验研究［J］. 江西中医学院学报，2005，17（1）：62-63.

　　［8］ 陈瑗,周玫. 自由基医学基础与病理生理［M］. 北京：人民卫生出版社，2002：273.