脑清灵汤治疗抽动秽语综合征的作用及机理研究
作者：朱晓燕 周大兴 倪世美 阮叶萍 王晶 顾静
【摘要】 ［目的］探讨脑清灵汤对抽动秽语综合征（TS）的作用及作用机制。［方法］采用苯丙胺诱发小鼠拟TS模型，观察各组小鼠定型活动和自主活动情况，测定脑内单胺类神经递质如多巴胺（DA）、去甲肾上腺素（NE）、5?羟色胺（5?HT）及5?羟吲哚乙酸（5?HIAA）的含量。［结果］脑清灵汤能对抗苯丙胺诱发的定型活动；能明显减少TS模型小鼠的自主活动；能显著降低TS模型小鼠纹状体中DA、NE、5?HT及5?HIAA的含量。［结论］脑清灵汤对TS动物模型有治疗作用，作用机制可能是其影响脑内单胺类神经递质的分泌代谢。
【关键词】 脑清灵汤；抽动秽语综合征；小鼠
Abstract:［Objective］ To elucidate the effects and mechanism of Naoqingling Decoction （ND） on Gilles de la Tourette syndrome（TS）.［Method］ Central nervous system of mice was stimulated by amphetamine（AMP）to develop the model of experimental tourette syndrome （ETS）.Then we observed the stereotypia and autonomic activities of mice, and determined the levels of monoamine neurotransmitters such as dopamine （DA）, norepinephrine （NE）, 5?hydroxytryptamine （5?HT） and 5?hydroxyindoleacetic acid（5?HIAA） in the brains.［Result］ To compare with model group,three?dose ND groups can resist the determinate activities stimulated by AMP;can obviously decrease the autonomic activities of mice and degrade the levels of DA, NE, 5?HT and 5?HIAA in the corpora striates. ［Conclusion］ ND has therapeutical effect on ETS model and it’s mechanism may be its effects on the secretion or metabolism of neurotransmitter in the brains.
Key words:Naoqingling Decoction；Gilles de la Tourette syndrome； mice
抽动秽语综合征（TS）是一种以运动、言语和抽动为特点的综合征或行为障碍。近年来发病率有明显增高的趋势。脑清灵汤是治疗小儿TS的经验方，经110例TS的临床观察，疗效显著，无副作用 ［1］。本研究采用苯丙胺诱发小鼠拟TS模型，观察脑清灵汤对TS的治疗作用及作用机制。报告如下。
1 材料
动物：昆明种小鼠84只，雌雄各半，体重20±2g，由浙江中医药大学实验动物中心提供。药品：脑清灵汤（龙骨、牡蛎、全蝎、僵蚕、钩藤等）由本院中药制剂室制成每100ml含生药100g，中药饮片经本院中药资源鉴定教研室老师认真鉴别皆为《药典》收载之正品；氟哌啶醇，上海九福药业有限公司，批号：050301。试剂：苯丙胺（AMP）购自中国药品生物制品检定所；DA、NE、5?HT及5?HIAA标准品为Sigma公司产品；其余试剂均为国产分析纯。器材：日本岛津荧光分光光度仪（RF?5000型）；小鼠自主活动记录仪（YLS?1A型）等。
2 方法
2.1 分组、给药及造模［2］ 将84只小鼠随机分为6组，即正常对照组、模型组、脑清灵汤高、中、低剂量组（20g/kg、15g/kg、10g/kg）、阳性药对照组（氟哌啶醇组：0.1mg/kg）。各组动物连续灌胃给药13d，1次/d，其中正常对照组和模型组予同容积生理盐水灌胃。末次给药后30min，除正常对照组小鼠腹腔注射同容积生理盐水外，其余各组小鼠腹腔注射AMP6.0mg/kg。
2.2 指标检测 ①定型活动：注射AMP10min后观察各组小鼠（除正常对照组）定型活动，按［3］评分。每4min评分1次，共评4次，各次累加的评分和为总评分。②自主活动：参照张如意［2］方法，注射AMP30min后应用自主活动记录仪测定每只小鼠5min内的活动次数。③单胺类神经递质：小鼠活动测定后，断头取脑，冰上剥离纹状体，冰水浴中制成匀浆后按文献［4］采用荧光分光光度法检测DA、NE、5?HT、5?HIAA含量。
2.3 统计学方法 结果采用SPSS11.0 One?Way?ANOVA进行统计处理。
3 结果
3.1 各组定型活动、自主活动的比较 见表1。模型组小鼠给予AMP后出现明显的定型活动，自主活动次数也明显高于正常对照组（P<0.01）。脑清灵汤三剂量组与氟哌啶醇组均可对抗AMP诱发的定型活动（P<0.01），均明显减少TS模型小鼠的自主活动（P低 <0.05，其余P<0.01）。
3.2 各组单胺类递质含量的比较 见表2。模型组DA、NE、5?HT及5?HIAA的含量较正常对照组都明显升高（P<0.01）。脑清灵汤高、中、低剂量组及氟哌啶醇组DA、NE含量都显著低于模型组（P低NE<0.05，其余P<0.01）。脑清灵汤高、中剂量组5?HT、5?HIAA含量都显著低于模型组（P<0.01）。
表1 脑清灵汤对苯丙胺诱发小鼠定型活动、自主活动增强的影响（略）
与正常对照组比较：# P<0.01；与模型组比较：*P<0.05, ** P<0.01
表2 脑清灵汤对小鼠纹状体中DA、NE、5?HT、5?HIAA含量的影响（略）
与正常对照组比较：#P<0.01；与模型组比较：*P<0.05, **P<0.01
4 讨论
脑清灵汤具有滋养肝肾、清热化痰、平肝熄风的功效。本研究结果显示脑清灵汤能对抗AMP诱发的小鼠定型活动，能显著抑制AMP引起的小鼠自主活动增强，表明其对TS动物模型有作用；同时脑清灵汤能显著降低TS模型小鼠纹状体中DA、NE、5?HT、5?HIAA的含量，提示脑清灵汤可能影响脑内单胺类神经递质分泌代谢，从而达到治疗TS的作用。
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［1］ 倪世美.脑清灵汤口服液治疗抽动秽语综合征110例［J］.上海中医药杂志，2005，39（8）：29?30.
［2］ 张如意.多巴胺能系统亢进法建立拟抽动秽语综合征小鼠模型［J］.行为医学，2005，14（3）：210?212.
［3］ 杨龙飞.熄风静宁冲剂抗大鼠实验性Tourette综合征［J］.北京中医药大学学报，2005，28（2）：47?49.
［4］ 王孝媛，顾萱娣，张建伟.鼠脑和脊髓中5－羟色胺、5－羟吲哚乙酸、去甲肾上腺素和多巴胺的快速测定法［J］.苏州医学院学报，1985，（1）：10?13.
