糖肾颗粒对糖尿病小鼠糖脂代谢及肾功能的影响

              作者：柴可夫 杨明华 杨苏蓓 钱俊文 黄晓玲 王溶溶 

【摘要】  ［目的］观察糖肾颗粒对糖尿病小鼠糖脂代谢及对肾功能的作用。［方法］采用尾静脉注射四氧嘧啶法造成糖尿病小鼠模型，以糖肾颗粒并用消渴丸为阳性对照组，观察各组小鼠的血糖、血脂、肾指数、尿素氮及肌酐值。［结果］糖肾颗粒能降低糖尿病小鼠升高的血糖、血脂、肾指数、肌酐、尿素氮，以高剂量组效果最明显。［结论］糖肾颗粒对糖尿病小鼠模型具有较好的降糖、降脂作用，并对糖尿病肾病具有较好的预防治疗作用。

【关键词】  糖肾颗粒；糖尿病；糖脂代谢；肾功能；小鼠

　　Abstract:［Objective］ To observe the curative effect of the Tangshen Particle on diabetes.［Methods］ ICR mice were induced for diabetes by Alloxan intravenous injection,take Tangshen Particle and Xiaoke pill as the comparison group，observe each group’s glucose,lipid,renal index,urea,creatinine.［Results］ The Tangshen Particle was able to decline glucose,lipid,renal index,urea,creatinine on diabetic mice,but the effect on high dose group was most obvious.［Conclusion］ Tangshen Particle has good glucose-lowering and lipid-lowering effect on diabetic mice,and it has preventive and therapeutical effects on diabetic nephropathy .

　　Key words:Tangshen Particle；diabetes；glucose and lipidmetabolism；renal function;rats

    2型糖尿病常伴有脂代谢紊乱，单纯控制血糖不能完全消除发生糖尿病肾病等并发症的危险，因此在控制血糖的同时，必须治疗血脂异常。本实验观察糖肾颗粒对糖尿病小鼠的糖脂代谢及肾功能的影响。

　　1  材料

　　1.1  试验动物 

　　ICR小鼠，清洁级，体重20～24g，购自浙江省实验动物中心。动物生产许可证号：SCXK(浙)2003-0001；实验动物饲养于清洁级动物房内，温度18～26℃，相对湿度50%～60%，光照明暗各12h，通风10次/小时；动物实验设施条件合格证号：浙实验动物设施条件准字S00-010号。饲养于25×40cm2上加不锈钢盖的特制塑料盒中，每笼5～6只，自由摄食与饮水。喂饲全价营养颗粒饲料，所有饲料均由浙江省实验动物中心饲料生产基地供应或加工。动物饮水为城市自来水用净水器过滤后装入消毒过的饮水瓶内自由饮用。

　　1.2  实验药物 

　　糖肾颗粒（黄芪、葛根、女贞子、灵芝、丹参、大黄）由浙江省中药研究所有限公司自制，规格为每袋6g，批号为20050607。实验时用蒸馏水配成合适浓度，剂量以g（生药）/kg（体重）计。阳性药物：消渴丸，30g/瓶，0.25mg格列本脲+其它中药/丸，广州中药一厂生产，批号为000802。临用时用蒸馏水配制成合适的浓度。造模药物：四氧嘧啶：10g/瓶，美国Sigma公司出品，G-14908。

　　1.3  主要试剂及主要使用仪器 

　　试剂：葡萄糖、总胆固醇、甘油三酯、肌酐测定试剂盒，均由宁波市慈城生化试剂厂生产。上述试剂均在标示的有效期限内使用。仪器：分光光度计(723型)：上海光谱仪器有限公司出品；LD5-2型离心机：北京医用离心机厂；1275型放射免疫γ计数器，美国产品；Sysmex  全自动血凝仪CA-1500；DK-600型电热恒温水槽；全自动血球仪；全自动生化分析仪。

　　2  方法

　　2.1  动物造模 

　　取雄性小鼠100只，预留12只作正常对照组。其余小鼠禁食不禁水6h后，尾静脉注射四氧嘧啶60mg/kg。5d后眼眶取血用GOD-POP法测血糖，选择血糖值高于17mmol/L的小鼠造模成功，饲养30d后开始给药，每天灌胃1次，连续60d。

　　2.2  实验分组 

　　①正常对照组（对照组），12只，即等量生理盐水尾静脉注射后的大鼠。剩余筛选后的糖尿病小鼠根据血糖值均匀分入：②糖尿病模型（模型组）12只；③消渴丸阳性对照组（阳性组）12只；④糖肾颗粒高剂量组（中药高剂量组）12只；⑤糖肾颗粒中剂量组（中药中剂量组）12只，⑥糖肾颗粒低剂量组（中药低剂量组）12只。实验分组后各组大鼠正常摄食饮水1个月，之后开始每天灌胃给药，阳性组予消渴丸混悬液（15mg/kg·d-1）灌胃。中药剂量组灌胃糖肾颗粒的混悬液，对照组与模型组灌胃等量蒸馏水，疗程12周。

　　2.3  标本收集与指标检测
 
　　饲养30d后开始给药，每天灌胃1次，连续60d。于给药后第58d毛细管眼眶取血测血糖（Glu）、总胆固醇（TC）、甘油三脂（TG），第60天眼眶取血后处死小鼠，取出双侧肾脏称湿重，肾指数，分离血清测定尿素氮（BUN）和肌酐（Cre）。

　　2.4  统计分析 

　　采用SPSS11.5医学统计软件，对实验数据进行t检验，实验数据以均数±标准差（x±s）表示。

　　3  结果

　　3.1  糖肾颗粒对糖尿病小鼠血糖血脂的影响（见表1），模型组小鼠血糖、甘油三酯显著高于正常对照组（P<0.001），消渴丸组和中药各剂量组均能降低造模小鼠升高的血糖和甘油三酯，其中糖肾颗粒高剂量组降低血糖较明显（P<0.001），中药高剂量组降血糖效果优于消渴丸组（P<0.05），中药高剂量组优于中药低剂量组（P<0.05）。表1  糖肾颗粒对糖尿病小鼠血糖、血脂的影响（略）

    上述结果表明，随着小鼠糖尿病病程的延长，其脂代谢也逐渐紊乱，表现为血清甘油三酯明显增高。长期给予糖肾颗粒，不仅能明显降低糖尿病小鼠的高血糖，还能明显降低其逐渐升高的甘油三酯。这对预防糖尿病的并发症的发生是有利的。

　　3.2  糖肾颗粒对糖尿病小鼠肾指数、尿素氮、肌酐的影响(见表2），模型组小鼠肾指数均高于对照组和中药高剂量组（P<0.001），中药各剂量组均能改善肾指数，以高剂量组改善最明显（P<0.001），中药高、中剂量组均能降低尿素氮和肌酐，以高剂量组效果最为明显（P<0.01）消渴丸组各指标与模型组均无统计学意义（P>0.10）。表2  糖肾颗粒对糖尿病小鼠肾指数、尿素氮（BUN）、肌酐(Cre)的影响(略)

    实验中观察到，糖尿病小鼠经过3个月病变，解剖时其肾脏肿大明显。表2结果也表明，模型组小鼠肾指数与对照组比较差异非常显著；同时血清尿素氮和肌酐也明显升高，说明糖尿病小鼠的肾功能已受到明显损害，而糖肾颗粒高、中剂量组具有明显对抗这种对肾脏逐步损害的作用，作用强度具有剂量相关性，而消渴丸组无此作用。

　　4  讨论

    糖尿病的主要病机为气阴两虚兼挟瘀血，而高脂血症亦多归于血瘀或痰浊范畴。糖尿病合并血脂异常者，多病程较长，其瘀更甚。气阴两虚，瘀血痰浊痹阻脉络成为加重糖尿病病情，导致糖尿病慢性并发症的病理基础。气阴两虚兼血瘀是糖尿病的主要病机，益气养阴活血法从整体上体现了中医药糖尿病的标木兼治，对糖尿病及其并发症有较好的疗效［1］。

    糖肾颗粒由黄芪、葛根、灵芝、女贞子、大黄、丹参六味中药组成。方中以黄芪、葛根益气生津为君，黄芪善益气扶正，葛根性甘，辛凉，能解热生津，二药合用具益气生津之功。中药药理实验研究表明：黄芪能促进蛋白质代谢，增加肝糖原，对血糖代谢有调节作用。灵芝能益肝心脾肺肾之气，女贞子滋肾水，补肝阴，清虚热，大黄酒制活血化瘀之力较强，与丹参合用推动血行，清除体内痰浊瘀血停滞。诸药配伍，药性趋于平和，共奏益气养阴，活血通络，化瘀祛痰之功。2型糖尿病存在明显的糖脂代谢紊乱，糖代谢异常对糖尿病肾病的发生与具有重要的影响，高糖环境是糖尿病各种并发症的重要危险因素，其直接影响糖尿病肾病的发生、发展与预后。研究发现，在高血糖状态下，肾脏易于受损是由于肾脏对糖尿病糖代谢紊乱过度代偿作用的结果。多种研究表明，过多葡萄糖集中于肾脏是引起糖尿病肾病的根木原因，高血糖可通过多种途径损害肾脏［2］。多元醇通路和己糖胺通路活化、氧化应激反应增强、蛋白非酶糖基化的加速以及生长因子和细胞因子的过度分泌是高糖诱导糖尿病肾病发生的重要机制。此外，高糖增加了肾血流量，从而参与了糖尿病肾病早期肾脏的高灌注、高滤过、肾小球囊内高压，进而刺激了肾小球系膜细胞肥大和系膜基质增加。以往的研究认为，脂质代谢紊乱与糖尿病性大血管病变有关，但近年来，血脂异常与糖尿病微血管病变的关系也受到重视［3］。脂代谢紊乱可加速、加重糖尿病的肾脏损害，因而积极有效地改善糖脂代谢的异常，是防治糖尿病肾病发生与发展的一个重要环节。

    总之，要想控制糖尿病的进一步发展，必须及时控制糖、脂代谢紊乱，而糖尿病糖、脂代谢紊乱是一个整体，二者相互联系，相互影响，本实验从糖尿病的整体观念出发，采用益气养阴，活血通络的方法，把降糖、调脂放在同等重要的地位，结果显示：糖肾颗粒对糖尿病小鼠模型具有较好的降糖、降脂作用，并对糖尿病肾病有较好的预防和治疗作用。

【】
  　　［1］柴可夫,钱俊文.论益气养阴活血法治疗糖尿病［J］.浙江中医学院学报,2005,29(5):46-47.

　　［2］Vlassara H，Bucala R，Strikcr L Biology of discase Pathogcnic eftccts of advanccd glycosylation Biochemical biologic and clinical implications for diaSctcs and aging［J］.Lab Invcst,1994,72:138-141.

　　［3］Defineoivarius N,Nielsen NY,Andreasen AH.Diabeic retinopathy in newly diagnosedmiddle-aged and elder1y diabeteic patients,prevalence and interrelationship withmicroalbuminuria and triglyccridcns［J］.GraefesArch Clin Exp ophthalinol,2001，239-664.