液基细胞学和高危型HPV DNA16.18检测对宫颈癌前病变筛查的作用
【摘要】 通过宫颈液基细胞学检查（TCT）中鳞状上皮细胞异常改变（ASC?US）联合高危型人乳头瘤状病毒DNA16.18检测对宫颈癌前病变筛查的效果。［方法］对我院妇科门诊5676名妇女进行TCT检查，其中634例ASU?US患者均行HPV16.18型PCR荧光检测。HPV16.18阳性者和阴性者随机宫颈活检，病诊断为金标准。［结果］HPV16.18阳性联合ASC?US检测CIN的阳性预测值为51.6%。HPV16.18阴性联合ASC?US检测CIN的阳性率为5%。相比差异有非常显著性（P<0.05）。［结论］CIN与HPV16.18感染呈正相关关系，TCT与HPV结合对检测宫颈癌前病变有相当积极的意义。
【关键词】 人乳头瘤病毒 宫颈上皮内瘤样变 鳞状上皮细胞异常改变 液基细胞学
Purpose for Liquid Base Cell Science & High Damage Type HPV DNA16.18 Test to Check Pathological Changes before Cervical Cancer
Abstract: ［Objective］ To test the effect of screen examination on pathological change before cervical cancer by ASC?US and DNA16.18 in TCT.［Method］ Make TCT test on 5676 women,among whom,634 ASU?US cases were made HPV16.18?type PCR fluorescence test.Make random cervical live test to patients of positive and negative HPV16.18,take pathological diagnosis for standard.［Result］ The positive forecasted value of positive HPV16.18 combined with ASC?US testing CIN was 51.6%;the positive rate of negative HPV16.18 combined with ASC?US testing CIN was 5%;their differences were obvious（P<0.05）.［Conclusion］ CIN and HPV16.18 infection are in positive relationship;combination of TCT and HPV has active meaning to test pathological change before cervical cancer.
Key words: HPV16.18;cervical epithelium neoplastic change;ASC?US
本研究通过TCT与HPV16.18检查及宫颈活检来探讨其对CIN筛查的作用。
1 资料与方法
1.1 研究对象 从2006年1月—2008年1月到我院妇科门诊就诊的患者行宫颈癌筛查，受检者符合以下情况：无子宫切除史或宫颈手术史，无细胞学检查或宫颈上皮内瘤变史。无盆腔放射史，目前无妊娠，24h无性生活史。受检者共5767例，其中以体检为目的的患者2080例，有白带增多，性交后出血等临床症状来就诊的2596例。所有受检者年龄在17～70岁，平均35±8岁，孕次0～6次，产次0～5次，平均1次。
1.2 研究方法 （1）液基薄层细胞学检查，所有受检者都接受TCT，阴道窥器暴露宫颈，棉签清除宫颈口黏液和白膜，将扫帚状取样器中央刷毛伸入宫颈，顺时针旋转10～15圈，将宫颈刷前端抛入保存液，经cytofast确定细胞密度，再抽取相应液体量经德国Werk Nr离心沉降固片机制成直径为2cm的薄层细胞涂片，95%酒精固定，巴氏染色。细胞学诊断方法采用TBS分类法。诊断出634例ASC?US。（2）HPV16.18型检测：再随访的526例ASC?US患者中，用PCR荧光检测HPV16.18型。用无菌生理盐水棉球洗去宫颈外分泌物，再用无菌棉试纸插入宫颈内，5秒后旋转棉拭子采集宫颈分泌物，将棉拭子置入无菌玻璃管，送检，用ABI prism7000仪器，中山大学达英基因股份公司的试剂盒，并作出分析。>25 cope/ml为阳性，其中阳性126例，阳性率为24%。随机抽取HPV阳性组108例及HPV阴性组50例，在宫颈鳞柱交界处3.6.9.12处多点活检，所有病理标本由专门的病理医师阅片，作出最后诊断。
1.3 应用χ2检验对数据进行分析统计。
2 结果
TCT为ASC?US者634例，占检查人数11.26%。其中在随访的526例ASC?US中HPV阳性者有163例，占31%。其中108例进行活检，CINⅠ—Ⅲ型有34例，占31.48%，以CINⅠ型为多，Ⅱ—Ⅲ占10%左右。HPV阴性组52例活检，CIN 6例占11.54%，经χ2检验，P<0.05差异有显著性。
3 讨论
3.1 TCT是至今世界上最先进，准确的宫颈细胞学检查方法，它能有效地采集宫颈脱落细胞，不增加患者的痛苦，又克服了传统巴氏涂层过高的假阴性率。大大提高了检测宫颈癌前病变的敏感性和准确性。宫颈细胞学作为筛查的主要方法功不可没。但几乎
有50%CIN被遗漏，细胞学诊断ASC?US的病例中37%属正常宫颈，13%为高级别CIN，我院的检查情况相类似。因此对ASC?US的去向应加以分流，而HPV感染对预测ASC?US的去向十分重要。
3.2 生育年龄的正常妇女，其宫颈的HPV感染率5%～50%。90%以上的HPV感染在无任何干预的情况下可能被清除，临床上宫颈HPV感染多为亚临床和潜伏感染［1］。HPV有100多个型别，其中有27个型别可在宫颈癌组织中发现，在宫颈癌组织中，HPV的检出率可达99.7%，被认为与宫颈癌关系密切，是宫颈癌的重要致病因子。在我国以HPV16.18.58为主，16型占51%，HPV由3个部分组成，早期区（E区），晚期区（L区）及上游调控区（非编码区）。早期区编码的E6E7蛋白可分别与P53和PKb蛋白结合并促使后两者降解，从而阻断其对细胞周期的负调控作用，诱导细胞发生癌变［2］，HPV感染从前期损害到宫颈癌的整个过程约10年左右，这个过程可分为四个阶段，HPV感染，低度的癌前病变（CINⅠ），高度的癌前病变（CINⅡ）和宫颈癌。所以及早发现高危型HPV感染，及早CIN患者，阻止病程发展有重要意义。
3.3 Dalstein等［3］研究表明 HPV?DNA含量与宫颈癌变程度呈正相关。目前临床上常用的检测方法有可检出HPV16和18两型的荧光定量PCR法，可检出13种高危型的杂交捕获法，以及能同时18种高危型和5种低危型并可进行基因分型的膜芯片法。由于各种检测方法在价格和性能上的不同，了解宫颈癌中各型HPV的分布情况对合理选择检测方法具有重要的价值。从医学学角度来看，临床上采用价格相对便宜能够检出这两种高危型HPV的荧光定量PCR方法，已能满足大部分的临床需要。
【参考】
［1］ Frable Wj.Austin RM.Collins RT.etal.Medico Legal affairs［J］.LAC task force Summary AeTa cytol,1998,42:76?79.
［2］ Dalstein V.Rierhmuller D,Prerer JL,et al.Persistence and load of high risk HPV are predictors for development of high?grade cervical lesions,a longitudinal French cohort study［J］.Int T Cancer,2003,106:396?403.
［3］ 梁彩虹，杨光.宫颈癌病理组织中HPV基因型别分析［J］.江西医学检验，2007，25（4）：299?301.
