Integrinβ1 和CD44V6 在子宫内膜癌组织中的表达及与癌生物学行为的关系

                作者：毛荣军，李启明，房惠琼

【摘要】  目的 探讨Integrinβ1 和CD44V6 在子宫内膜癌中的表达及与癌生物学行为之间的关系。方法 采用免疫组织化学染色法检测84 例子宫内膜癌、20例非典型子宫内膜增生和14例增殖期子宫内膜Integrinβ1和CD44V6的表达情况。结果 子宫内膜癌组织中Integrinβ1和CD44V6的表达阳性率明显高于非典型子宫内膜增生(P均<0.05)和增殖期子宫内膜(P<0.01或0.05)；Integrinβ1的表达与子宫浆膜侵犯(u=3.07，P<0.01)，病理分级(u=3.77，P<0.01)及肿瘤转移(u=3.66，P<0.01)关系密切；CD44V6在有肿瘤转移组织中的阳性表达率显著高于无肿瘤转移的组织(χ2=5.12，P<0.05)。结论 Integrinβ1 和CD44V6 在子宫内膜癌中的明显表达可能与其浸润转移的生物学行为有关。

【关键词】  子宫内膜肿瘤；肿瘤蛋白质类；Integrinβ1；CD44V6

　　Abstract:  Objective   To study the expression of integrin beta1 and CD44V6 in endometrial carcinoma and their relationship with pathological features of endometrial carcinoma.  Methods  By using an immunohistochemical staining, the expressions of  integrin beta1 and CD44V6 in 84 cases of endometrial carcinoma, 20 cases of endometrial atypical hyperplasia and 14 cases of proliferative phase endometrium were detected.  The relationship between integrin beta1 and CD44V6 expression and endometrial carcinoma pathological features were evaluated.  Results  The positive rate of integrin beta1 and CD44V6 expression in endometrial carcinoma tissue was much higher than that in endometrial atypical hyperplasia (all P<0.05) and proliferative phase of normal endometrium (P<0.01 or <0.05). Over-expression of integrin beta1 in ecdometrial carcinoma tissue was related to invasion of uterine serosa (u=3.07, P<0.01), pathological grades (u=3.77, P<0.01) and tumor metastasis (u=3.66, P<0.01). The CD44V6 expression rate in endometrial carcinoma with metastasis was significantly higher than those without metastasis (×2=5.12, P<0.05).  Conclusion  The up-regulation of integrin beta1 and CD44V6 expression may play an important role in invasion and metastasis of endometrial carcinoma. 
   
　　Key words:  endometrial neoplasm; neoplasm proteins; integrin beta1; CD44V6

　　子宫内膜样腺癌(endometrial carcinoma)是我国最常见的妇科恶性肿瘤之一，已成为当前肿瘤研究的热点。肿瘤的侵袭转移是肿瘤过程中普遍存在的生物学现象，也是一种多因素多基因调控的过程，细胞粘附作用在肿瘤浸润和转移过程中发挥着十分重要的作用，执行这种粘附作用的物质是细胞粘附因子。笔者通过分析粘附分子Integrinβ1 和CD44变异型(CD44V6)在子宫内膜癌组织内的表达及其与子宫内膜癌生物学特性之间的关系，探讨Integrinβ1 和CD44V6 在子宫内膜癌浸润转移中的作用。

　　1  资料与方法

　　1.1  一般资料  所有标本均取自本院及佛山市顺德桂洲于2001年5月～2007年5月期间送检的手术病理标本，其中病理确诊为子宫内膜癌患者84例，平均年龄45.3岁(31～73岁)。子宫内膜癌病理分级：Ⅰ级44例，Ⅱ～Ⅲ级40例；肿瘤直径≤3.0cm者26例，>3cm者58例；肿瘤浆膜完整者36例，有浆膜侵犯者48例；伴有转移者40例；66例合并有非典型子宫内膜增生；另外选20例非典型子宫内膜增生患者及14例增殖期子宫内膜标本作为对照组 。

　　1.2  免疫组织化学染色方法  组织标本石蜡切片分别采用SP法检测Integrinβ1 和CD44V6的表达。小鼠抗人Integrinβ1 单克隆抗体(CD29Ab-3)为美国NeoMarkers公司产品，兔抗CD44V6 购自中杉公司，具体方法按试剂盒说明书操作。

　　1.3  结果判定  Integrinβ1 和CD44V6阳性染色为细胞质内或细胞膜上棕黄色沉淀。Integrinβ1 表达结果按照半定量分级为:无细胞着色为表达阴性(-)；10%～30%细胞呈阳性反应为表达弱阳性(+)；30%～60%细胞呈阳性反应为表达中度阳性(++)；>60%细胞呈阳性反应为表达强阳性(+++)。

　　1.4  统计学分析  采用秩和检验和χ2检验。

　　2  结果

　　2.1  Integrinβ1 在不同子宫内膜组织内的表达  Integrinβ1 在正常子宫内膜、非典型子宫内膜增生和子宫内膜癌组织中的表达差异具有高度显著性(χ2=16.33，P<0.01)。正常子宫内膜和非典型子宫内膜增生组织中Integrinβ1 阳性表达率明显低于子宫内膜癌组织，见表1。在子宫内膜癌组织内，Integrinβ1 的表达明显增强，细胞膜表面和细胞浆内均可见Integrinβ1 的表达。

　　表1  Integrinβ1在子宫内膜病变中的表达（略）

　　2.2  Integrinβ1 表达与子宫内膜癌病理生物学特性的关系  依照病理分级、有无浆膜侵犯和转移的不同，Integrinβ1 在各组的表达强度差异有高度显著性(P均<0.01)，见表2。但Integrinβ1与肿瘤大小、是否合并非典型子宫内膜增生无关。

　　表2  Integrinβ1 表达与子宫内膜癌病理生物学特性的关系（略）

　　2.3  CD44V6 在不同子宫内膜组织内的表达  CD44V6 在子宫内膜癌组织内的表达阳性率为59.52%(50/84)，明显高于非典型子宫内膜增生的20.00%(4/20)和增殖期子宫内膜的0%(0/14)，χ2=4.71，6.29，P均<0.05。

　　2.4  CD44V6表达与子宫内膜癌病理生物学特性的关系  在有肿瘤转移的40例中，CD44V6 阳性者32例(80.00%)，明显高于无肿瘤转移病例中的18例(40.91%)，χ2=5.12，P<0.05。CD44V6 与肿瘤大小、病理分级、有无浆膜侵犯及是否合并非典型子宫内膜增生均无关系。

　　3  讨论
       
　　肿瘤细胞和细胞外基质的粘附是通过细胞膜表面的特异受体介导的，其中最为重要的粘附分子为整合素家族。整合素是由α和β亚单位组成的跨膜糖蛋白，按β亚单位不同分为整合素家族β1～β8，其中以β1 和β2 最为重要［1］。整合素与基底膜配体结合后可介导肿瘤细胞与基底膜粘附，利于其释放基质金属酶等成分降解基质，溶解基底膜，促使肿瘤细胞向间质浸润，造成肿瘤转移［2］。本研究结果表明，Integrinβ1 在子宫内膜癌中的表达明显高于非典型子宫内膜增生和增殖期子宫内膜，而且在有浆膜侵犯、病理分级Ⅱ～Ⅲ级及有转移的子宫内膜癌中的表达明显高于无浆膜侵犯、病理分级Ⅰ级及无转移的子宫内膜癌，提示Integrinβ1 可能参与了子宫内膜癌的浸润和转移，可作为判断子宫内膜癌恶性程度和侵袭转移的一项指标。与肿瘤侵袭转移关系密切另一类粘附因子即CD44家族，它是一类具有高度异质性的细胞表面跨膜糖蛋白粘附分子，分布极为广泛，能与透明质酸酶或胶原结合，参与细胞与细胞、细胞与基质之间的特异性粘附过程。人类CD44基因位于11号染色体短臂上，其基因包含20个外显子，由于剪切方式的不同，其转录产物分为两种类型，即标准型CD44S和变异型CD44V，其中CD44V6 的异常表达可以影响肿瘤细胞骨架的构像和分布以及肿瘤细胞的运动能力，促使细胞间粘附作用下降［3］。已有研究发现［4］，CD44V6 的异常表达与许多人类恶性肿瘤的发生、和侵袭转移及预后密切相关；我们的研究表明，随着临床病理分期(病理分级、浸润深度及转移)的增加，CD44V6 的表达明显增高，说明子宫内膜癌CD44V6 的表达与病情进展有关；同时在淋巴结阴性组的表达率显著低于阳性组，与Hosford等［5］报道结果一致。
   
　　综上所述，CD44V6在子宫内膜癌中的表达与肿瘤的发生发展、侵袭转移关系密切；联合检测Integrinβ1 和CD44V6可更好地预测子宫内膜癌的发生发展和对子宫内膜癌淋巴结浸润、转移的生物学行为进行判断， 为临床和估计预后的指标。

【参考】
  　　［1］ Hood JD, Cheresh DA. Role of integrins in cell invasion and migration ［J］. Nat Rev Cancer,2002，2(2):91-100.

　　［2］ Prifti S, Zourab Y, Koumouridis A, et al. Role of integrins in invasion of endometrial cancer cell lines ［J］. Gynecol Oncol,2002,84(1):122-120.

　　［3］ Marhaba R, Zoller M. CD44 in cancer progression: adhesion ,migration and growth regulation ［J］. J Mol Histol,2004,35(3):211-231.

　　［4］ Liu YJ, Yan PS, Li J, et al. Expression and significance of CD44s, CD44V6, and nm23 mRNA in human cancer ［J］. World J Gastroenterol,2005,11(42):6601-6606.

　　［5］ Hosford S, Elliott J, Ma ZW, et al. CD44 expression in papillary serous endometrial carcinoma ［J］. Int J Gynecol Cancer,2003,13(4):480-484.