前S1抗原在乙肝五项各种模式中的表达及临床意义

【摘要】  目的 观察乙肝病毒前S1抗原在乙肝五项各种模式中的表达，以探讨其临床意义。方法 用ELISA方法同时检测14045份人血清乙肝病毒前S1抗原和乙肝病毒五项(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb），以乙肝五项模式进行分组，比较不同血清模式乙肝病毒感染者前S1抗原的阳性率。结果 前S1抗原在大三阳HBsAg(+)加HBcAb(+)和小三阳模式中的阳性率显著增高，依次为87.95％、82.63％、66.61％。HBeAg阳性模式各组的前S1抗原阳性率与HBeAg阴性各组比较，除HBsAg(+)加HBcAb(+)组外，均明显升高（P＜0.001～0.01）。在HBeAg阴性各模式组中，HBsAg(+)加HBcAb(+)组的前S1抗原阳性率最高，与其它HBeAg阴性各组比较差异均有显著性（P＜0.01）；小三阳和单独HBsAg(+)模式组S1抗原阳性率与HBeAg阴性的其它各组比较差异也有显著性（P＜0.01）。结论 乙肝病毒前S1抗原可补充完善乙肝五项检测的不足，尤其对HBeAg阴性或变异的HBV感染者能更好地反映病毒的复制状态和传染性。

【关键词】  前S1抗原；肝炎，乙型；肝炎病毒；ELISA法

　　乙肝病毒（HBV）外膜蛋白包括S、前S2和前S1三种成分［1］。前S1外膜蛋白（抗原）是由乙肝病毒前S1基因编码、108/109个氨基酸组成的肽，其氨基酸21～47片段为HBV侵入肝细胞过程中与肝细胞特异性无涎糖蛋白受体结合的位点［2］，变异的病毒只要前S1抗原中21～47氨基酸片段完好就具有传染性。许多学者［3,4］报道前S1抗原与HBV-DNA水平呈高度正相关，而HBV-DNA是HBV复制的直接证据，故认为前S1抗原是一项反映HBV，且易于检测的血清标志物［5］。在本资料中我们分析比较了14045份临床血清标本的乙肝五项和前S1抗原的检测结果，旨在探讨前S1抗原的临床应用价值。

　　1  材料和方法

　　1.1  标本及来源      血清标本14045份，为2006年11月～2007年11月间百色市人民和右江民族医学院附属医院门诊、住院病人及健康体检者的早晨空腹静脉血标本。

　　1.2  仪器和试剂  前S1抗原、乙肝五项酶联免疫试剂盒（上海科华生物工程公司）。全自动酶免疫分析仪（美国BIO-RAD680型）。

　　1.3  方法

　　1.3.1  前S1抗原检测  采用酶免疫分析仪，按试剂盒说明书进行操作，读取吸光度值，前S1抗原检测结果临界值为阴性对照吸光度值×2.5。阴性对照吸光度值高于0.05时按实际的吸光度值，<0.05时，按0.05计算。待检样本吸光度值≥临界值者判定为阳性，<临界值者判定为阴性。

　　1.3.2  乙肝五项标志物检测  用ELISAI法检测，结果判定均严格按各自试剂盒提供的操作说明书进行。

　　1.3.3  统计学处理  计数资料以例数和百分率进行描述，两样本率比较用χ2检验。

　　2  结果
   
　　前S1抗原在乙肝五项不同模式中的表达，见表1。
   
　　HBeAg阳性的组1和组3两种常见模式组的前S1抗原阳性率分别为87.95％和80.88％，两组间阳性率比较差异无显著性。两组的前S1抗原阳性率与除组2外的HBeAg阴性各组比较均明显升高（P＜0.001）。在HBeAg阴性各组中，组2的前S1抗原阳性率最高，且较其他HBeAg阴性各组均明显增高（P＜0.001），组4和组5模式的前S1抗原阳性率与HBeAg阴性其它各组比较差异也有高度显著性（P＜0.001）。HBsAg(-)的各模式组前S1抗原阳性率均<2％。7490份乙肝五项阴性血清的前S1抗原阳性率为0.28％。

　　表1  乙肝五项不同模式中前S1抗原阳性率比较（略）

　　a：组1与组3比较，P＜0.001～0.01；b：与HBeAg(-)的各组比较，P＜0.001

　　3  讨论
   
　　本资料结果显示，大三阳、HBsAg(+)加HBcAb(+)及小三阳3种模式的前S1抗原阳性率分别为87.95％、82.63％、66.61％，居各种模式的前三位，均较其它各组明显升高，与国内［6,7］报道基本一致。在580例HBeAg(+)之模式样本中，前S1抗原阳性率为87.00％，表明前S1抗原与HBeAg检出高度相关。过去一直认为HBeAg是反映病人传染性和病毒复制的良好指标。我们观察的1499例HBsAg(+)加HBeAg(-)3种模式中的前S1抗原阳性率为68.58％，提示HBeAg(-)时病毒复制仍在继续，也可能与病毒变异所致的HBeAg未能检出有关。HBV变异常在感染慢性化过程中发生，也可在免疫应答、疫苗接种和接受抗病毒药物等压力下发生。其中具有肯定临床意义的HBV基因突变之一即为前C区终止密码突变（第1896位核苷酸）HBeAg翻译终止，阻止HBeAg产生，从而出现HBeAg(-)加HBeAb(+)加HBV-DNA(+)的血清学检测结果［8］。可见临床上只检测乙肝五项不能充分反映HBV复制情况，补充前S1抗原的测定十分必要，这样可弥补因病毒变异和其他原因造成的HBeAg检测假阴性对病情的错误评估。 Pichoud等［9］已报道部分慢性乙型肝炎病人经病毒药物治疗后HBeAg发生了血清型转移，但用敏感定量PCR方法仍可检测到活跃的病毒复制，应用前S1抗原检测乙型肝炎病毒复制可作为的指标之一，弥补HBeAg检测的不足。认为前S1抗原作为HBV传染指标的临床价值大于HBsAg［10］。
   
　　本调查中，4553例HBsAg(-)加HBeAg(-)标本中有11份前S1抗原阳性，可能是因HBsAg、HBeAg含量较低，或HBsAg、HBeAg反生变异未能检出，或者是前S1抗原的假阳性。上述标本需做HBV-DNA定量检测，以进一步确认有无病毒的存在。本研究还发现7490乙肝五项阴性模式血清中有21份前S1抗原阳性，对这些病人应进行随访观察，有条件可进一步做HBV-DNA定量检测，以排除HBV感染或及早发现HBV感染。
   
　　有资料表明［11］，HBV前S1抗原具有高度的免疫原性，是机体感染HBV后最早出现、最早消失的血清标志物，前S1抗原消失越早，提示病人HBV已被清除，预后越好；反之，当机体缺乏对前S1抗原的免疫反应时，不能清除HBV，成为长期慢性携带者。HBV感染者如果前S1抗原阴性，提示病毒复制不活跃，传染性小，前S1抗原阳性，预示病毒复制活跃，传染性强，其意义优于HBeAg，应引起临床医生的重视。

【参考文献】
  　　［1］ 姚光，路选水，张利民.前S1、前S2蛋白-HBV复制的新指标［J］.中华传染病杂志，1998,6（4）:193.

　　［2］ Dash S, Rao KV, Panda SK. Receptor for Pre-S（21-47）component of hepatitis B virus on the liver cell:role on virus cell interaction ［J］. J Med irol,1992,37(2):116-121.

　　［3］ Kuijpers L, Koens M, Murray-Lyon I, et al. Pre-S proteins in hepatitis B ［J］. J Med Virol,1989,28(1):47-51.

　　［4］ 姚桢.分子乙型肝炎病毒相关病毒学［M］.北京：医药技术出版社，1998：24.

　　［5］ 冯仁丰.实用医学检验学［M］.上海：上海科学技术出版社，2000：852.

　　［6］ 李琴，孙桂珍，魏玉香，等. 前S1蛋白与乙型肝炎病毒DNA与e抗原在诊断乙型肝炎病毒复制时的对比性研究［J］.中华肝脏病杂志，2004，12（3）：1-3.

　　［7］ 张晓.乙型肝炎病毒前S1抗原检测及临床意义［J］.实用医技杂志，2004，11(08B)：1567-1568.

　　［8］ Lee YI, Hur GM, Suh DJ, et al. Novel pre-C/C gene mutants of hepatitis B virus in chronic active hepatitis :naturally occurring escape mutants ［J］. Gen Virol,2001,77（6）:1129-1138.

　　［9］ Pichoud C, Berby F, Sturver L, et al. Persistence of viral replication after anti-HBe seroconversion during antiviral therapy for chronic hepatitis B ［J］. J Hepatol,2000,32（2）:307-316.

　　［10］ Zoulim F, Capel F, Berthillon P, et al. Clinical and virological evaluation of the detection of Pre-S1 and Pre-S2 antigents in serum from patients with chronic hepatitis B ［J］. Gastroenterol Clin Biol,1995,19(12):970-975.

　　［11］ 金冬雁，侯云德.Pre-S蛋白：乙型肝炎病毒分子生物学一个值得注意的研究领域［J］.中华实验和临床病毒学杂志，1995，9(6)：313.