蝙蝠葛果提取物对小鼠S180荷瘤的抑制作用及耐缺氧作用

【摘要】  ［目的］观察蝙蝠葛果提取物对移植性小鼠S180荷瘤肿瘤生长及耐缺氧的影响.［方法］建立移植性小鼠S180肉瘤模型，随机分为对照组、环磷酰胺组、蝙蝠葛果提取物大、小剂量（500，250mg／kg）组.将不同剂量的蝙蝠葛果提取物灌胃给予荷瘤小鼠10d后，停药1d，次日处死，肿瘤抑制率，称取胸腺及脾脏质量；检测灌胃给予蝙蝠葛果提取物后小鼠的耐缺氧存活时间.［结果］蝙蝠葛果提取物大剂量组小鼠S180荷瘤质量明显减轻，肿瘤抑制率为40.7％，并且胸腺质量显著高于对照组；蝙蝠葛果提取物大、小剂量组小鼠耐缺氧存活时间均明显延长.［结论］蝙蝠葛果提取物对S180荷瘤小鼠具有抑制肿瘤的生长及耐缺氧作用.

【关键词】  抗肿瘤药 植物型 缺氧 小鼠

    ABSTRACT:OBJECTIVETo study the functions of tumor inhibition and toleration anoxia of the extract of Menispermum Dahuricum fruits (MDF) for the transplanted S?180 bearing cancer in mice.METHODSS?180 sarcoma transplanted models in mice were established and randomly divided into the model group, cyclophosphamide group and large, small dose of extraction (500, 250mg/kg) of MDF groups. The different concentration of MDF extraction was administrated by oral to S?180 bearing cancer in mice for 10 day and stoped administration for 1 day, and then the mice was sacrificed next day to calculate rate of inhibiting tumor growth and ratio of thymus gland and spleen and examine the survival time of toleration anoxia.RESULTSThe weight of S?180 bearing cancer in mice was obviously reduced in group of large dose of MDF extraction,  the rate of inhibiting tumor growth was 40.7%, the index of thymus gland was higher in MDF extraction group than in the model control group, and the survival time of toleration anoxia extended in groups of MDF extraction.CONCLUSIONThe extraction of MDF has the function of inhibiting tumor growth and toleration anoxia in the S?180 bearing cancer in mice.

    Key words:antineoplastic agents, phytogenic;anoxia;mice

    蝙蝠葛( Menispermum dahuricum DC.)是防己科植物，又名北斗根、蝙蝠藤、金丝钓葫芦、黄条香、防己葛、黄根、野鸡豆子、狗屎豆、马串铃等.蝙蝠葛味苦，性寒，无毒，有祛风清热，消肿止痛作用，可用于扁桃体炎、咽喉炎、风湿痹痛、麻木、水肿、脚气、肠炎及胃痛腹胀等［1］.蝙蝠葛有抗心率失常、降血压、抗血栓、抑制血小板聚集及抗炎镇痛等作用.国外多项研究表明，蝙蝠葛根、茎提取物对耐缺氧和抗肿瘤有较好的疗效［2］.本研究建立了移植性小鼠S180肉瘤模型，探讨了蝙蝠葛果提取物对肿瘤生长及耐缺氧的影响.

    1  材料与方法

    1.1  材料  蝙蝠葛果提取物由延边大学药学院植物化学实验室制备并提供；环磷酰胺粉针剂为山西普德药业有限公司产品，加入适量生理盐水配制成1.25g／L，备用.实验动物取昆明种小鼠，雄性，体重为18～22g，由延边大学医学部实验动物科提供.S180腹水荷瘤模型由延边大学基础医学院肿瘤研究中心制作并提供.GB?204分析天平为瑞士梅特勒?托利多仪器（上海）有限公司产品.

    1.2  方法

    1.2.1  肿瘤抑制率的测定  将S180荷瘤小鼠腹腔肿瘤细胞接种于小鼠腹腔连续传代，无菌抽取7d龄小鼠腹腔肿瘤细胞，加入生理盐水调整细胞中肿瘤细胞至4×106个／mL，以1∶3的比例混匀，向每只小鼠右腋下注射0.2mL肿瘤细胞悬液［3］，制作移植性小鼠S180荷瘤模型.将模型小鼠随机分为4个组，即对照组、环磷酰胺组、蝙蝠葛果提取物大、小剂量（500,250mg/kg）组，每组各为10只;各组小鼠体重间无显著性差异.对照组小鼠灌胃给予生理盐水,环磷酰胺（1.25g/L）组小鼠腹腔注射给予环磷酰胺，蝙蝠葛果提取物大、小剂量组灌胃给予相应剂量的蝙蝠葛果提取物；各组小鼠灌胃剂量均为每日20mL／kg.连续给药10d，第11日停药，次日脱颈处死小鼠，剥下肿瘤，称其质量，计算肿瘤抑制率.

    肿瘤抑制率（％）＝对照组平均肿瘤质量-药物组平均肿瘤质量对照组平均肿瘤质量×100％

    1.2.2  脏器质量比的测定  脱颈处死小鼠后，立即分离胸腺和脾脏，剔除周围结缔组织和脂肪，用滤纸吸干脏器表面水分，称取质量，脏器质量比.胸腺（脾脏）质量比＝胸腺（脾脏）质量（mg）/体重（g）.

    1.2.3  常压耐缺氧死亡时间的测定  选择体重为18～22g的昆明小鼠，随机分为对照组及蝙蝠葛果提取物大、小剂量﹙500,250mg/kg﹚组.每日灌胃给予蝙蝠葛果提取物大、小剂量组小鼠相应剂量的蝙蝠葛果提取物1次，连续给药10d，对照组给予等容量的生理盐水.末次给药1h后，分别置于250mL的广口瓶中，瓶内置20g钠石灰以吸收二氧化碳和水分，瓶盖涂以凡士林密封，记录各组小鼠死亡时间，即存活时间［4］.

    1.2.4  统计学处理  采用SPSS10.0统计软件，各组数据以均数±标准偏差（±SD)表示.

    2  结果

    2.1  蝙蝠葛果提取物对S180荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用  观察蝙蝠葛果提取物大、小剂量组S180荷瘤小鼠的一般状态，可见用药期间小鼠毛色光泽，食欲及活动性好，而对照组小鼠毛色光泽欠佳，食欲及活动性差.蝙蝠葛果提取物大剂量组S180小鼠荷瘤质量与对照组比较明显减轻，抑制率为40.7％，相比较有显著性差异（P＜0.05），见表1.表1  各组小鼠体重及肿瘤抑制率的比较

    2.2  蝙蝠葛果提取物对小鼠胸腺及脾脏质量的影响  蝙蝠葛果提取物大剂量组S180荷瘤小鼠胸腺质量比与对照组比较明显增加，两组有显著性差异（P＜0.05），对脾脏质量比无影响，见表2.表2  蝙蝠葛果提取物对S180小鼠胸腺及脾脏质量比的影响

    2.3  蝙蝠葛果提取物对小鼠常压耐缺氧作用的影响  缺氧瓶内的对照组小鼠可见烦躁不安，呼吸加深，频率加快，出现眼球突出等表现，而蝙蝠葛果提取物大、小剂量组小鼠状态与对照组相比较上述症状则明显减轻.对照组及蝙蝠葛果提取物大、小剂量组小鼠存活时间分别为（24.80±2.32）min，（32.46±1.82）min，（31.15±1.76）min，即蝙蝠葛果提取物大、小剂量组小鼠存活时间与对照组相比较均有明显延长，并具有统计学意义（P＜0.05，P＜0.01）.

【】
  ［1］ 江苏新医学院. 中药大辞典 下册［M］.上海：上海技术出版社，2003.2612.

［2］ 郑虎占，董泽宏，余靖.中药研究与应用［M］.北京：学苑出版社，1997.1416.

［3］ 杨金霞，杨国生，朱伟，等.干、鲜壁虎冻干粉对对S180荷瘤小鼠抑瘤作用及其急性毒性实验研究［J］.中药杂志，2007，32（2）：238.

［4］ 金英子，张红英.复方黄芪水提取物对小鼠耐缺氧能力和抗疲劳作用的影响［J］.延边大学医学学报,2007,30（2）：107.

［5］ 杨恩月，金光，洪淳赞.蓝靛果乙酸乙酯提取物对小鼠S180肉瘤和肝癌H22实体瘤的抑制作用［J］.延边大学医学学报,2005,28（2）：104.?