子宫颈癌P_糖蛋白表达及其意义
［关键词］子宫颈肿瘤；基因表达；P_糖蛋白；药物耐受性
［Abstract］Objective：To study the expression and significance of P_glycoprotein(P_gp)in cervical carcinoma. Me_thods：The P_gp expression of tissues in 38 cases of cervical carcinoma, 16 cases of cervical intraepithelial neoplasm(CIN)and 16 cases of normal cervix was detected by S_P immunohistochemical method. Results：The P_gp expression was found in all tissues mentioned above. The strongly positive staining in cervical carcinoma was higher than that of the normal cervix(P<005). Conclusion：There is primary multidrug resistance for cervical carcinoma, the positive expression of P_gp is one of the reasons for chemotherapy failure.
［Key Words］cervical neoplasm；gene expression；P_glycoprotein；drug tolerance
子宫颈癌占女性恶性肿瘤12%左右，也是在女性生殖道恶性肿瘤中发病率最高［1］的肿瘤。目前，子宫颈癌的通常采用手术、放疗或两种方式联合治疗，如果病变对放疗不敏感，则可考虑用辅助化疗［2］。但多数抗癌药物对子宫颈癌的疗效不佳。影响疗效的原因很多，耐药性是其中重要因素之一。因此了解肿瘤细胞的耐药情况是提高化疗效果和是否选择化疗的关键。目前对子宫颈癌的多药耐药(MDR)的报道不多，2000_01～2005_12我们收集原发性子宫颈癌活检和手术切除标本38例，用S_P免疫组化法对子宫颈癌、子宫颈上皮内肿瘤(CIN)和正常子宫颈组织MDR基因产物(P_糖蛋白，P_gp)的表达进行研究，以了解子宫颈癌耐药性的情况，进而指导临床治疗。
1 材料与方法
11 材料
本组(年龄28～72岁，平均48岁)术前均未放、化疗。鳞癌26例，腺癌9例，腺鳞癌3例。术后病理诊断按FIGO(2000年)分期。CIN和正常子宫颈组织各16例。
12 方法
所有标本均经体积分数10%的中性福尔马林溶液固定，石蜡包埋，4μm连续切片，苏木精_伊红染色。P_gp单克隆抗体及S_P试剂盒为美国DAKO公司产品。具体步骤按试剂盒说明进行，切片需先经微波抗原修复。用已知阳性切片作阳性对照，用PBS代替1抗作阴性对照。
13 结果判定
采用半定量分析法，在肿瘤细胞浆或细胞膜上出现棕黄色颗粒为阳性细胞。根据阳性细胞所占比例的多少划分：弱阳性(10%～25%瘤细胞表达)；阳性(25%～75%表达)；强阳性(75%以上表达)；阴性(低于10%表达)。阳性颗粒主要分布于细胞浆及细胞膜。
14 统计学处理
实验数据采用χ2检验。
2 结果
21 P_gp在子宫颈癌、CIN及正常子宫颈组织中的表达
子宫颈癌、CIN和正常子宫颈组织都有P_gp表达。P_gp强阳性表达率分别为737%(28/38)，625%(10/16)和188%(3/16)。子宫颈癌组织P_gp强阳性表达与CIN比无统计学意义(P>005)，但与正常子宫颈组织比有统计学意义(P<005)。
22 子宫颈癌P_gp表达与预后因素的关系
子宫颈癌P_gp表达强阳性与临床分期、肿瘤的分化程度以及病理组织类型均不相关(表1)。表1 子宫颈癌P_gp表达与预后因素的关系（略）
3 讨论
MDR是指恶性肿瘤组织对化学结构完全不同、作用机制各异的抗肿瘤药物具有交叉耐受性，被认为是恶性肿瘤化疗失败的主要原因［3］。P_gp是多药耐药基因的产物，也是MDR基因编码的跨膜糖蛋白。正常组织中的P_gp表达量很低，但在MDR表型的肿瘤细胞中过表达，它具有ATP能量依赖性“药泵”功能，可通过主动转运的方式把化疗药物从肿瘤细胞内转运至细胞外，减少细胞内化疗药物的聚集，正常组织以此起到排除异物的作用，而肿瘤细胞则以此作用排除化疗药物，起到自身保护的作用。P_gp还有保护癌细胞免受损伤，减少凋亡的作用，其表达水平与肿瘤耐药程度呈正比［4～6］，常是影响化疗效果的重要因素之一。目前关于子宫颈癌耐药性的研究鲜有报道。我们用S_P免疫组化法探讨正常子宫颈、CIN和子宫颈癌组织的P_gp表达情况，发现上述组织均表达P_gp，证实子宫颈组织P_gp表达具有普遍性，子宫颈癌不需要化疗诱导即先天对化疗药物耐药，这与临床上子宫颈癌通常对化疗不敏感相吻合。P_gp表达升高引起肿瘤细胞产生耐药的机制是①提高药物的外排作用，减少药物在细胞内聚积的浓度；②直接与药物结合，从而使药物无法进入细胞发挥杀伤作用［7］。此外，我们还发现子宫颈癌P_gp强阳性表达较正常子宫颈组织高(P<005)，提示P_gp表达可能与子宫颈癌的生物学行为有关。
从表1可以看出，子宫颈癌P_gp强阳性表达与临床分期、肿瘤的分化程度以及病理组织类型无关，这与文献报道不完全一致［7］，可能与研究的病例数较少有关。本研究结果表明子宫颈癌先天耐药，其重要原因是子宫颈癌普遍表达P_gp。其高表达并非对所有药物都有耐受，主要可造成肿瘤对几种亲脂性药物产生耐受，其中对生物碱类高度耐受，对蒽环类中度耐受，对VP16等低度耐受，对烷化剂或抗代谢类药物不耐受。故在P_gp阳性患者的化疗方案中，注重CDDP、MTX、5_Fu或氮芥等可能更可取。同时可尝试使用P_gp封闭剂(如Ca2+通道阻滞剂、ATP消耗剂等)，可部分或完全逆转癌细胞的药物耐受性，从而提高肿瘤对化疗药物的敏感性［7］。我们认为既然子宫颈癌是先天的P_gp高表达型肿瘤，故其应以手术为主，辅以放疗。对晚期不能手术者更不可用化疗，否则不仅无助于肿瘤的治疗，而且药物的毒性作用还会加重病情［8］。只有当子宫颈癌对放疗缺乏即时的反应(1～3个月内)而有可能复发时，才应考虑采用辅助化疗［2］，并尽量少用或不用与P_gp强阳性表达有关的抗肿瘤药物。
文献：
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