炙甘草汤对豚鼠心室肌细胞的电生理影响

                作者：王雪芳 刘艳明 张晓云 张淑萍 张秀琴

【摘要】  目的：研究炙甘草汤对豚鼠心室肌细胞电生理影响。方法：应用常规的玻璃微电极细胞内记录技术，观察炙甘草汤对豚鼠心室肌细胞的动作电位0相幅值（APA），动作电位时程（APD），50%复极化时间（APD50），90%复极化时间（APD90）的影响。结果：（1）用20mg/ml的炙甘草汤灌流后与正常对照组相比细胞电生理变化不明显;（2）用40mg/ml的炙甘草汤灌流后与正常对照组相比动作电位时程（APD）缩短（P<0.05），90%复极化时间（APD90）下降（P<0.05）;（3）用80mg/ml的炙甘草汤灌流后与正常对照组相比动作电位时程（APD）明显缩短（P<0.01），50%复极化时间（APD50）、90%复极化时间（APD90）下降（P<0.05）。结论：炙甘草汤能缩短豚鼠心室肌细胞动作电位时程及50%、90%复极化时间。

【关键词】  炙甘草汤;心室肌细胞;电生理

    【ABSTRACT】  Objective: To study the electrophysiology effect of Zhigancao Decoction on ventricle muscle cell of rats.Methods:The action potentials were recorded by conventional intracellular microelectrode technique and the amplitude of action potential(APA) and action potentials(APD) were observed.The effect of 50% and 90% of duration of action potential(APD50 and APD90) on ventricle muscle cell of rats that were perfused with Zhigancao Decoction was observed as well. Results: (1)For the ventricle muscle cell of rats perfused with 20mg/ml Zhigancao Decoction, electrophysiology had no changes compared with control. (2)For the ventricle muscle cell of rats perfused with 40mg/ml Zhigancao Decoction, the date action potentials(APD) ,90% of duration of action potential(APD90) decreasd(P<0.05) compared with control.(3) For the ventricle muscle cell of rats perfused with 80mg/ml Zhigancao Decoction, the date action potentials(APD) decreasd greatly (P<0.01),50% and 90% of duration of action potential(APD50 and APD90) decreasd(P<0.05) compared with control .Conclusion: Zhigancao Decoction makes the ventricle muscle cell of rats? date action potentials(APD) and 50%、 90% of duration of action potential(APD50 and APD90)decrease.

    【KEY WORDS】  Zhigancao decoction; Ventricle muscle cell; Electrophysiology

    目前，临床上常用炙甘草汤心律失常，其抗多种实验性心律失常的研究[1～9]较为广泛。炙甘草汤由甘草、生姜、桂枝、人参、生地黄、阿胶、麦门冬、麻子仁、枣等组成，为汉代张仲景所创，具有滋阴养血，益气温阳，止悸复脉功效，以脉结代，心动悸为证治要点。本实验应用常规的玻璃微电极细胞内记录技术，观察炙甘草汤对豚鼠心室肌细胞电生理影响，报告如下。

    1  材料与方法

    1．1  标本制备  选用32只0.25～0.5kg豚鼠，雌雄不拘，随机分为4组，每组8只。击颅致昏后迅速开胸取出心脏，冲洗。至于O2饱和的温度在32±0.5℃的改良Locke液（NaCl 0.157mol/L，KCl 0.56×10-2 mol/L，CaCl2 0.21×10-2mol/L，NaHCO3 0.18×10-2 mol/L，葡萄糖，0.56×10-2mol/L，pH7.4）中。剪去左右心耳，从主动脉进剪，沿右心室外侧缘剪开，暴露左心室，保留乳头肌周围1cm2，其余剪除。制好的标本以不锈钢针固定于灌流槽内的硅胶上，恒温、恒速灌流，流速为5ml/min，在灌流液中持续充以O2。标本在灌流液中稳定30min后开始实验。

    1．2  电位引导  玻璃微电极充以电极液后直流电阻为10～20Ω。使用刺激器引导出心室肌细胞的动作电位，使微电极稳定于同一细胞内，记录其动作电位图形。细胞内玻璃微电极引导的电信号经型微电极放大放大后，一路输入监听器监听，另一路经高速数模转换器输入微机，采样存储动作电位并分析其各项参数指标。

    1．3  观测指标  动作电位0相幅值（APA），动作电位时程（APD），50%复极化时间（APD50），90%复极化时间（APD90）

    1．4  实验过程和分组

    待刺激触发的心室细胞动作电位稳定后，开始采集一组正常的心室肌细胞动作电位做对照，再以不同浓度炙甘草汤进行灌流。分组：（1）20mg/ml的炙甘草汤组（n=8）；（2）40mg/ml的炙甘草汤组（n=8）；（3）80mg/ml的炙甘草汤组（n=8）。

    1．5  统计学处理  应用Excel统计软件进行，动作电位的各观察数据均用x±s表示，给因素前后各项指标采用自身配对t检验。

    2  结果 

     见表12007年2月王雪芳等：炙甘草汤对豚鼠心室肌细胞的电生理影响第1期2007年2月河北北方学院学报（医学版）第1期表1  炙甘草汤对豚鼠心室肌细胞的电生理影响 注:△P<0.05 vs control;**P<0.01 vs control

    3  讨论

    目前临床上常用炙甘草汤结合心律失常射频消融等多种方法心律失常，疗效显著。近年来,炙甘草汤的抗心律失常作用的实验研究较为广泛和深入。炙甘草汤对结扎大鼠左冠状动脉前降支造成的急性心肌缺血诱发大鼠心律失常有明显保护作用[10～13]。降低室早、室速及心律失常的总发生率，炙甘草汤可对抗BaCl2诱发的血虚大鼠的心律失常,作用与心得安(β受体阻断剂)相似[14～17]。炙甘草汤对氯仿致“血虚”小鼠室颤发生率,对乌头碱致“阴虚”和“脾虚”大鼠心律失常有对抗作用,减少其发生率[18]。炙甘草汤总提物、单个有效成分(包括甘草酸单铵盐、人参总皂苷、麦冬总皂苷)及其配伍能明显降低缺血再灌性诱发的离体大鼠心脏触发活动发生率,能明显抑制再灌心律失常的出现,对缺血再灌性心肌损伤有显著保护作用,且有效成分配伍的效应与剂量呈一定的正相关性[19]。炙甘草汤及其加味方能明显著降低大白鼠右心房自律性 [20]。本实验我们用20mg/ml的炙甘草汤灌流后与正常对照组相比心室肌细胞电生理变化不明显，用40mg/ml的炙甘草汤灌流后与对正常照组相比，发现动作电位时程（APD）缩短（P<0.05），90%复极化时间（APD90）下降（P<0.05），增加药物浓度后，我们用80mg/ml的炙甘草汤灌流后与对正常照组相比动作电位时程（APD）明显缩短（P<0.01），50%复极化时间（APD50）、90%复极化时间（APD90）下降（P<0.05）。通过本实验我们可以观察到炙甘草汤对豚鼠心室肌细胞电生理影响比较明显，使得心室肌细胞动作电位发生了明显的改变，而且观察发现炙甘草汤对豚鼠心室肌细胞电生理作用与对心脏其它细胞的电生理作用基本一致。即炙甘草汤能缩短豚鼠心室肌细胞动作电位时程及50%、90%复极化时间。同时本实验也可以为炙甘草汤临床心律失常用药及其中药学研究打下基础。

【】
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