不同来源百合中总皂苷元含量的比较研究

              作者：高彦宁，周日宝，童巧珍，刘湘丹，潘清平，刘平安

【摘要】  目的 测定不同来源百合中总皂苷元的含量。方法　采用分光光度法，高氯酸作为显色剂，在４０８ ｎｍ处测吸光度值。结果 各药材总皂苷元含量为０．１２２～０．２５１ ｍｇ／ｇ，其中以江苏省南通市的卷丹中总皂苷元含量最高。在１２．６～２２．７ μｇ／ｍＬ范围内薯蓣皂苷元浓度与吸光度呈良好的线性关系，回归方程为：Ａ＝３０．０５９Ｃ－０．０３４ １，ｒ＝０．９９９ ３。结论　不同来源百合中总皂苷元含量不同。

【关键词】  百合皂苷；含量；分光光度计；百合

    〔Ａｂｓｔｒａｃｔ〕 Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ total ｓａｐｏｎｉｎｓ ｆｒｏｍ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｌｉｌｙ． Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｗｉｔｈ ＨＣｌＯ４ ｆｏｒ ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｉｃ ｒｅａｃｔｉｏｎ ａｎｄ ａｔ ４０８ ｎｍ ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ，ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ｓａｐｏｎｇｅｉｎ ｌｅｖｅｌｓ ｉｎ ａｌｌ ｓａｍｐｌｅｓ． Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｓａｐｏｎｇｅｉｎ ｌｅｖｅｌｓ ｉｎ ｅａｃｈ ｓａｍｐｌｅ ｗｅｒｅ ｂｅｔｗｅｅｎ ０．１２２～０．２５１ ｍｇ／ｇ，ｉｎ ｗｈｉｃｈ ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｓａｐｏｎｉｎｓ ｉｎ Ｌｉｌｉｕｍ ｂｒｏｗｎｉｉ ｆｒｏｍ Ｊｉａｎｇｓｕ ｗａｓ ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔ，ｔｈｅ ｇｏｏｄ ｌｉｎｅａｒｉｔｙ ｗａｓ ｓｈｏｗｎ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ １２．６～２２．７ μｇ／ｍＬ ａｎｄ ｔｈｅ ｌｉｎｅａｒ ｅｑｕａｔｉｏｎ ｗａｓ： Ａ＝３０．０５９Ｃ－０．０３４１，ｒ＝０．９９９３． Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔ ｓｈｏｗｓ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｔｏｔａｌ ｓａｐｏｎｉｎｓ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｐｅｃｉｅｓ ｏｆ Ｌｉｌｉｕｍ ｂｒｏｗｎｉｉ ｉｓ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ．

    〔Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ〕 ｌｉｌｉｕｍ ｂｒｏｗｎｉｉ； ｔｏｔａｌ ｓａｐｏｎｉｎｓ； ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ

    中药百合来源于百合（Ｌｉｌｉｕｍ ｂｒｏｗｎｉｉ ｖａｒ．ｃｏｌｃｈｅｓｔｅｒｉ），卷丹（Ｌ． ｌａｎｃｉｆｏｌｉｕｍ Ｔｈｕｎｂ．）和细叶百合（Ｌ． ｐｕｍｉｌｕｍ ＤＣ．）的干燥肉质鳞茎，其肉质鳞茎的鳞片营养丰富，性味甘寒，具有止咳化痰、养阴清肺、清心安神、抗疲劳的功效［１］。研究结果表明，百合主要含有酚酸甘油酯、苷类、生物碱及多糖，它们都是有药用价值的活性成分。近几年国内外研究表明百合的药用功能与所含的甾体皂苷密切相关［２］。以往对百合的栽培方法、化学成分研究报道较多，但对其所含的总皂苷元的质量评价报道很少，为此，本实验检测了不同来源百合中总皂苷元的含量。现报道如下。

    １ 仪器与试剂

    １．１  仪器

    Ｂ５２００Ｓ型超声波提取器（必能信超声（上海）有限公司）；ＩＳＯ９００１型分析天平（南京庚辰仪器有限公司）；ＵＶ－１６００型紫外可见分光光度计（北京瑞利分析仪器公司）。

    １．２  试药

    薯蓣皂苷元对照品（ｓｉｇｍａ公司）；乙醚，乙醇，硫酸，石油醚，甲醇，高氯酸，均为分析纯；样品及来源见表１。

    ２ 方法和结果

    ２．１  对照品溶液的配制

    精密称取薯蓣皂苷元标准品０．２０２ ｇ，用甲醇溶解，再用甲醇定容至１００ ｍＬ，取１ ｍＬ，甲醇定容至１０ ｍＬ，浓度为０．２０２ ｍｇ／ｍＬ，即得。

    ２．２  供试品溶液的制备

    精密称取６０ ℃烘干２ ｈ的百合粉末１５ ｇ（过２０目筛），置圆底烧瓶中，加入５０ ｍＬ乙醚密闭超声脱脂４５ ｍｉｎ，静置，过滤，脱脂２次，将药渣挥干乙醚，精密加入８０％乙醇１２０ ｍＬ，在７０ ℃水浴中提取３ ｈ，放冷后过滤，重复提取３次，回收溶剂得浸膏，加入１ ｍｏｌ／Ｌ硫酸８０ ｍＬ在１００ ℃水浴中水解６ ｈ，冷却后用８０ ｍＬ石油醚萃取３次，合并萃取液水洗至中性后，回收溶剂至干，用甲醇溶解，定容成１０ ｍＬ作为待测液备用。

    ２．３  标准曲线的绘制

    分别取对照品溶液０．２５、０．３０、０．３５、０．４０、０．４５ ｍＬ置于带塞试管内，挥干甲醇后，加入高氯酸４ ｍＬ，水浴７０ ℃，密闭显色３０ ｍｉｎ后，冰水浴１０ ｍｉｎ终止反应后以高氯酸为空白，在４０８ ｎｍ处测其吸光度值，记录吸光度值，绘制标准曲线，以其薯蓣皂苷元的浓度对吸光度进行线性回归，线性方程为Ａ＝３０．０５９Ｃ－０．０３４ １，ｒ＝０．９９９ ３，薯蓣皂苷元浓度在１２．６～２２．７ μｇ／ｍＬ的范围内与吸光度呈良好的线性关系。

    ２．４  样品测定 

    分别取０．３ ｍＬ的供试品溶液（７号样品只取０．２ ｍＬ）按２．３项下方法测得各样品中总皂苷元含量。不同来源百合样品及总皂苷元含量见表１。

    ３ 讨论

    研究表明百合中含有多种甾体皂苷类成分［３，４］，如果皂苷元、薯蓣皂苷元、麦冬皂苷Ｄ、卷丹皂苷Ａ。药理研究表明百合的正丁醇部位能明显减少小鼠的自发活动数，同时显著延长小鼠在常压下的耐缺氧时间及在冰水浴中的游泳时间，说明百合的正丁醇提取部位有明显的镇静及抗应激损伤的作用［５］。根据皂苷的溶解性，百合皂苷主要在正丁醇部位。该实验比较了不同来源百合中皂苷元的含量，从而为临床用药提供了依据。

    对不同来源的百合样品的实验结果进行统计分析（ｑ检验ａ＝０．０５），从分析结果可知：各对比组总皂苷元含量大多有差别，仅细叶百合与百合相比较没有差别。卷丹比兰州百合中总皂苷元含量高出约８１．５％，比百合、细叶百合分别高出２５．８％、２５．５％；百合、细叶百合中总皂苷元含量分别高出兰州百合４４．６％、４４．３％。这也从一定角度证明了卷丹、百合、细叶百合常做为药用百合，其中卷丹较好，百合可药食兼用；而兰州百合仅做食用百合。

    本实验将相同来源百合样品进行样本均数比较（ｔ检验ａ＝０．０００５），除了辽宁省清源县与吉林省长春市的细叶百合中总皂苷元含量无显著差异外，其它均有显著差异。卷丹中总皂苷元含量比较：江苏省南通市产卷丹高出湖南省龙山县产卷丹３０．７％；百合中总皂苷元含量比较：湖南省连源市产百合高出湖南省隆回县产百合３４．７％。

【】
  1 中华人民共和国卫生部药典委员会：中华人民共和国药典．北京：化学出版社，２００５：１０．

2 李　 林，张志杰，蔡宝昌，等．中药百合有效部位的药效学筛选，南京中医药大学学报．２００５，２１（３）：４７－４８．

3 吉宏武，丁霄森．百合皂苷的提取分离与结构初步鉴定．林产化学与工业． ２００１，２１（３）：４７－５１．

4 杨秀伟，吴云山，催育新，等．卷丹中新甾体皂苷的分离和鉴定．药学学报． ２００２，３７（１１）：８６３－８６６．

5 彭蕴茹，钱大玮，丁永芳，等． 百合不同提取部位的药理活性比较．现代中药研究与实践．２００６，２０（１）：３１－３２．