抗乳增片对乳腺增生模型家兔血液流变学的影响

                作者：周会，龙子江，陈明，王靓，卞海，崔东梅，余燕 

【摘要】  目的 研究抗乳增片对乳腺增生模型家兔血液流变学的影响。方法 采用肌肉注射苯甲酸雌二醇的方法造成家兔乳腺增生模型。结果 与模型组比较，抗乳增片组的血清MDA水平较低（P<0.05），SOD活性较高（P<0.05）；部分凝血酶原时间延长（P<0.05）；血液流变学各项指标明显改善。结论 抗乳增片能有效的降低家兔血液黏度并提高血清SOD活性，这可能是其能治疗乳腺增生病的主要机制。

【关键词】  抗乳增片；乳腺增生；血液流变学；家兔

    乳腺增生是以乳房出现肿块和胀痛为主要临床表现的一种既非炎症，亦非肿瘤的增生性病变。中医认为[1]，本病是由情志不舒，肝气郁结，气血运行不畅导致气滞痰凝血瘀，凝滞于乳房，搏结不散，日积月累而成。目前临床治疗乳腺增生并无确切的方案，抗乳增片系柴胡、丹参、黄芩等多味药物制成，具有活血化瘀，软坚散结，升阳舒肝之功效。本文采用家兔为模型研究其对家兔乳腺增生病的治疗作用及机制，为临床治疗乳腺增生病提供依据。

    1 材料与方法

    1.1  材料

    1.1.1  动物  雌性未孕家兔36只，体质量（2.5±0.2）kｇ，由本院实验动物研究中心提供。合格证号：20-012。

    1.1.2  药物  苯甲酸雌二醇注射液,由上海通用药业股份有限公司生产，批号：030402，规格：2 mg/mL；逍遥丸由河南省宛西制药股份有限公司生产，批号：060118，规格：每8丸相当于原药材3 g；抗乳增片(由安徽省医药研究所提供)。

    1.1.3  仪器  YDA-IV型血液黏度计，由北京宏润达科技有限公司生产；MPG-3E多能双通道血液凝聚仪:上海斯隆医电设备有限公司造；721分光光度计，北京特耳仪器设备有限公司造；试剂盒：超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）试剂盒购于南京建成生物试剂公司；凝血酶原时间（PT），部分凝血酶活化时间（APTT）试剂盒购于上海太阳生物技术有限公司。

    1.2  方法

    1.2.1  动物分组  取家兔36只，称体质量，按体质量随机分为6组,分别为正常组、模型组、阳性药物组（逍遥丸）和抗乳增片高、中、低剂量组（以下简称高、中、低剂量组）。

    1.2.2  模型制备  除正常组外,其余各组家兔每天肌肉注射苯甲酸雌二醇0.3 mg/kg，连续30 d。家兔乳头出现红、肿和增大,并有乳晕出现,乳腺增生模型即成[2]。

    1.2.3  给药剂量及方法  每组分别按一定剂量给药,抗乳增片低、中、高剂量组家兔分别按0.11，0.35，1.05 g/kg给予抗乳增片（按家兔体质量，相当于人等效用量的1，3，9倍）；阳性组按3.16 g/kg给予逍遥丸。上述药用蒸馏水配成相应浓度灌胃给药。正常组和模型组灌服蒸馏水，均为5 mL/kg，每日1次,连续给药4周。

    1.2.4  检测指标  给药4周后乌拉坦麻醉,腹主动脉取血处死家兔,按要求留取血液,用YDA-IV型血液黏度计检测全血黏度,用压积管法检测血沉和红细胞压积；MPG-3E多能双通道血液凝聚仪测定家兔PT及APTT；用化学发光法测定血清中MDA含量和SOD的活性。

    1.2.5  统计学分析  实验数据采用“ｘ±ｓ”表示，用t检验判断组间差异显著性。

    2 结果

    2.1  一般情况

    正常对照组和各用药组动物毛色光洁，活动自如，食欲良好，大小便正常。模型组家兔比较敏感、易怒，富有攻击性。

    2.2  抗乳增片对模型家兔血液流变性的影响

    模型组家兔全血黏度（高切、中切、低切）、血浆黏度、血沉显著高于正常组（Ｐ<0.05），红细胞压积低于正常组（Ｐ<0.01）。各用药组家兔全血黏度、血浆黏度、血沉较模型组低,红细胞压积较高。其中高剂量组作用优于中、低剂量组，许多指标接近正常组，说明该药具有活血化瘀、降低血黏的功能。结果见表1。

    2.3  抗乳增片对模型家兔PT、APTT的影响

    模型组家兔PT、APTT显著低于正常组，而抗乳增片高剂量组的PT、APTT明显高于模型组（Ｐ<0.05），其中APTT接近正常组水平。结果见表2。

    2.4  抗乳增片对模型家兔血清SOD活性和MDA含量的影响

    模型组家兔血清MDA比正常组显著增加(Ｐ<0.01)，SOD比正常对照组显著减少(Ｐ<0.05)。给大鼠灌胃高剂量的抗乳增片4周后，高、中剂量组血清MDA比模型组显著减少(Ｐ<0.05)；SOD活性较模型组升高(Ｐ<0.05)。结果见表3。

    3 讨论

    妇女乳腺增生病的发病机制极为复杂。中医认为，妇女多气血亏虚，加上情绪变化等因素容易导致气滞血瘀，经脉不通，代谢废物淤积于乳腺中，为乳房肿胀、疼痛、结块等。本文选用家兔建立乳腺增生模型来观察抗乳增片对实验性乳腺增生家兔血液流变学的影响。造模后家兔乳头红肿、竖起、坚实，有乳晕，呈紫红色，乳头高度与直径显著高于正常组，乳腺病检查结果显示模型组家兔乳腺增生明显，增生率100%，说明模型制备成功（另文）。

    已有报道,乳腺增生病患者的血液流变学发生变化，呈高黏状态[3]。本实验结果显示,模型组家兔PT、APPT短于正常组（Ｐ<0.05），也说明了乳腺增生家兔的血液处于高凝状态，与报道一致。抗乳增片能有效的改善家兔血液流变学指标，高剂量后其血液流变学指标明显改善（Ｐ<0.05），基本接近正常组,表明其能够降低血液黏度。正是因为该药能有效的改变血液病理状态,活血化瘀，减轻乳腺充血和结缔组织增生,能够改善全身和乳腺局部的血液循环,从而对乳腺增生的发生、发展具有抑制作用。

    另外，高立新等[4]、林成仁等[5]曾报道，乳腺增生病患者体内自由基增多，乳腺病变时脂质过氧化反应增强,自身抗氧化能力减弱。本实验也检测出模型组家兔MDA含量明显高于正常组（Ｐ<0.05），SOD活性显著低于正常组（Ｐ<0.05），而用抗乳增片治疗后,MDA含量明显下降（Ｐ<0.05），SOD活性显著增强（Ｐ<0.05）,提示抗乳增片能抑制脂质过氧化反应,保护抗氧化酶活力。抗乳增片对家兔乳腺增生的治疗作用可能与其能够对抗自由基，防止自由基对细胞膜的侵害作用，减轻乳房病变有关。

【文献】
  [1] 杨 毅.乳腺增生病研究概况[J].医药学刊，2005，8（23）：1 469-1 471.

[2] 甘长清，吴凯南，苏新良，等.三苯氧胺对大鼠乳腺增生形态学的影响[J].重庆医科大学学报,2003,28（4）：448-450.

[3] 蒋时红，刘旺根，杨丽萍，等.桂枝茯苓胶囊对大鼠乳腺增生病治疗作用的实验研究[J].中成药,2004，26（12）：1 040-1 042.

[4] 高立新，沙 文，李小燕，等.维生素E治疗乳腺增生的机理探讨[J].河南诊断与治疗杂志，2001,15（2）：124.

[5] 林成仁,马雪瑛,王 敏,等.青香丸(浓缩丸)对家兔乳腺增生的影响及机理研究[J].实验方剂学杂志,2003,9(5):35-38.