ＩＬ－６，Ｆａｓ与慢性阻塞性肺疾病急性加重期的相关性研究

【摘要】 目的 探讨白介素-6（IL-6）与凋亡因子（Fas）在慢性阻塞性肺疾病急性加重期中的作用与意义及二者的相关性。方法 用ELISA方法检测35例慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者和32例健康对照组血清中IL-6和Fas的水平。结果 慢性阻塞性肺疾病急性加重期中IL-6与Fas的水平均显著高于对照组，差异具有显著性意义（P<0．05）。结论 Fas介导COPD患者的免疫细胞凋亡，IL-6与Fas共同参与了COPD的气道炎性反应，对判断COPD的急性加重及呼吸功能具有重要的临床意义。? 
　　【关键词】慢性阻塞性肺疾病；Fas／FasL；IL-6 
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　　【Abstract】 Objective To investigate the implication and correlation of serum IL-6 and Fas／Fasl ligand in patients with acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease(AECOPD).Methods The levels of serum IL-6 and Fas／FasL in 35 patients with acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease(AECOPD)and32 healthy control subjects were detected by ELISA．Results The levels of serumFas and IL-6 inpatients with acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease(AECOPD) were significantly higher than those in healthy control subjects，there was significant diference between the two groups（P<0．05）． Conclusion The Fas／FasL pathway can mediate apoptosis of immune cells in COPD，serum IL-6 and Fas may participate in the airway inflammatory process of COPD and may have important clinic significancein assessing acute exacerbation and pulmonary function of C0PD．? 
　　【Key words】Chronic obstructive pulmonary disease(COPD)；IL-6； Fas；FasL 
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　　慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种可以预防的、可以的疾病，以不完全可逆的气流受限为特点。气流受限常呈进行性加重，且多与肺部对有害颗粒或气体，主要是吸烟的异常炎症反应有关。世界卫生组织资料表明，COPD的死亡率居所有死因的第四位，且有逐年增加的趋势。COPD在临床上分急性加重和缓解期，呼吸道感染加重和促进COPD的，机体免疫功能的下降导致COPD患者反复发生呼吸道感染，尤其是T淋巴细胞的改变是其发病的重要原因之一[1]。Barnes报道[2]，重症COPD患者血浆Fas/FasL水平成倍成长，其可导致全血及肺内炎性细胞凋亡异常。本研究表明，IL-6与Fas的水平均显著高于对照组，差异具有显著性意义（P<0．05）。提示两者共同参与了COPD的气道炎性反应，对判断COPD的急性加重及呼吸功能具有重要的临床意义。? 
　　1 资料与方法? 
　　1．1 一般资料? 
　　1．1．1 对照组 健康人32例，男22例，女10例，均为郑州大学第二附属体检中心的健康人，年龄(65±5)岁，为肺功能检查正常，无近期感染等。? 
　　1．1．2 COPD组 自2007年10月至2008年3月间，郑州大学第二附属医院呼吸科收治的COPD急性加重患者35例，男24例，女11例，年龄（65±5）岁，都符合2002年中华医学会呼吸病学分会《慢性阻塞性肺疾病诊断指南》[3]的标准,所有患者均排除近期手术，自身免疫性疾病，严重的器官功能障碍，活动性风湿性疾病，近期使用各种免疫调节剂，糖皮质激素等，其性别、年龄与对照组比较无显著性差异，具有可比性。? 
　　1．2 方法 COPD患者均于入院第2天清晨空腹抽静脉血3 ml,分离血清，置于-30℃储存。对照组为清晨空腹抽取静脉血3 ml,分离血清。检测IL-6和Fas采用酶联免疫吸附试验，试剂盒购于美国RD公司进口分装的试剂盒。操作严格按各试剂盒说明书进行。用全自动酶标仪(Labsystems Dragon Wellscan MK3，芬兰)在450 nm处读取吸光度值并依照各标准绘制标准曲线，IL-6和Fas的浓度。? 
　　1．3 血气分析 血气分析于入院当天在股动脉抽取动脉血，部分患者在吸氧条件下抽取，用美国进口MEDICA EasyStart全自动血气电解质分析仪检测。? 
　　1．4 肺功能检测 FVC和FEV1．0用肺功能仪检测，肺功能仪为美国原装进口产品森迪斯，型号为VMAX22D。? 
　　1．5 统计学方法 数据用均数±标准差(x±s)表示，用SPSS 10．0 软件统计作t检验和直线相关分析，P<0．05为差异有统计学意义。? 
　　2 结果 ? 
　　2．1 AECOPD患者血清IL-6和Fas的水平，见表1。? 
　　2．2 AECOPD患者IL-6水平与FEV1/FVC的相关性，与PaCO2、PaO2的相关性，IL-6与Fas的相关性。结果显示IL-6与FEV1/FVC，动脉血氧分压（PaO2）成负相关，与动脉二氧化碳分压（PaCO2）成正相关，IL-6与Fas无明显直线相关性。? 
　　 
　　 
　　3 讨论? 
　　COPD患者存在着不同程度的炎性细胞浸润,疾病的急性加重可能与炎性介质释放有关。也有报道,吸烟、慢性缺氧时可影响机体某些介质及基因表达,促进肺实质细胞的凋亡[4],同时机体氧化剂和抗氧化剂失调也与细胞凋亡相关,提示细胞凋亡的增加可能也是COPD 急性加重的原因之一[5]。所以测定并比较COPD患者稳定期与急性加重期血浆中凋亡因子及炎性介质的动态变化,对于COPD 的深入研究和临床诊治均有重要意义。?本文表明AECOPD患者IL-6与Fas的水平均高于健康对照组，IL-6 FEV1/FVC，及动脉血氧分压（PaO2）成负相关、动脉血二氧化碳分压（PaCO2）成正相关，IL-6与Fas无明显直线相关性。? 
　　IL-6是一种主要由活化的单核细胞、巨噬细胞、T和B淋巴细胞、内皮细胞及成纤维细胞等分泌的具有多种生物学功能的细胞因子，因分子结构中保留了2个半胱氨酸残基而表现出化学趋化作用，参与COPD的气道炎性反应和气道重塑[6]。? 
　　IL-6与IL-11同属于IL-6家族，两者的三维结构相似，生物学活性也有部分重叠，而且信号转导均有gp2130分子的参与。肺内过度表达IL-6和IL-11的转基因小鼠表型研究发现，这两种细胞因子都参与了气道重构和肺实质的破坏。稳定期COPD患者诱导痰中的IL-6水平与COPD的急性加重（AE）频率正相关，而在AE期IL-6的水平较稳定期明显增高，并与诱导痰的细胞总数、嗜酸粒细胞数、淋巴细胞数显著相关。由此可见IL-6和IL-11在COPD的发生与过程中都具有重要作用，也是研究基因多态性与疾病易感性可供选择的重要靶位。? 
　　本试验结果示AECOPD患者IL-6的水平明显高于健康对照组（P<0．01），也证明了 IL-6能促进中性粒细胞的氧化反应，延缓中性粒细胞的凋亡，从而使中性粒细胞在炎性反应部位数量增多，使炎性反应持续，同时中性粒细胞在活化时释放的超氧阴离子增多，加重炎性反应，最终引起小气道和肺泡组织结构和功能的改变。 ? 
　　细胞凋亡是指为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主程序化死亡，是一个主动过程。它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等作用。Fas／FasL是细胞凋亡过程中重要的信号传递通路。Fas又称CD95，属于肿瘤坏死因子受体超家族成员，是一种跨膜蛋白，由325个氨基酸组成的受体分子。Fas一旦和配体FasL结合，可通过Fas分子启动致死性信号转导，最终引起细胞一系列特征性变化，使细胞死亡。? 
　　细胞凋亡异常包括两个方面：一是凋亡不足，尤其是炎性细胞凋亡不足，毒性产物释放增加，从而延长炎症过程；二是凋亡过度，尤其是肺组织的构架细胞，如肺泡上皮细胞的凋亡过度，则可以导致肺组织结构的破坏，最终产生肺纤维化。? 
　　Fas介导凋亡的聚集、激活途径的多个步骤上参与调节，如通过受体内吞或通过可溶性Fas或FasL在受体水平上进行调节，COPD中Fas／FasL的交联介导了局部组织的损伤，同时又参与局部和外周淋巴细胞的清除。Fas／FasL犹如一把双刃剑，如细胞毒T淋巴细胞除了分泌穿孔素和粒酶使靶细胞裂解外，还主要通过Fas途径使靶细胞凋亡，这是T细胞特异性的杀伤肿瘤细胞及其他靶细胞的主要方式，。Fas／FasL系统不仅仅转导细胞凋亡信号，在体内还参与血管发生和促炎症反应，如多种炎症介质的分泌(IL-1，IL-6，IL-8，MIP-la，Refs12、19和20)[7]。本试验结果示AECOPD患者的Fas水平高于健康对照组（P<0．05），表明COPD患者体内Fas／FasL倡导的自身反应性T淋巴细胞凋亡不能正常发生，参与了COPD 的急性发作过程。? 
　　综上所述，AECOPD患者IL-6与Fas的水平均高于健康对照组，与有关报道一致，说明了Fas介导COPD患者的细胞凋亡，IL-6与Fas共同参与了COPD的气道炎性反应，对判断COPD的急性加重及呼吸功能具有重要的临床意义。? 
　　 
　　参 考 文 献? 
　　［1］ 李成海，邹国华，马利军，等.老年慢性阻塞性肺疾病细胞免疫功能的初步探索.河南医药信息，2001，9(5)：7-9.? 
　　［2］ Barnes PG，Chowdhury B，Kharitonov SA．et al.Pulmonary biomarkers inchronic obstructive pulmonary disease,Am J Respir Crit Care Med，2006，174(1)：6-14.? 
　　［3］ 中华医学会呼吸病学分会慢性阻塞性肺疾病学组.慢性阻塞性肺疾病诊治指南.中华结核和呼吸杂志，2002，25(8)：453-460.? 
　　［4］ Barnes PG，Chowdhury B，Kharitonov SA．et al.Pulmonary biomarkers in chronic obstructive pulmonary disease.Am J Respir Crit Care Med，2006，174(1)：6-14.? 
　　［5］ Yasuda N，Gotoh K，Minatoguchi S．et al.An increase of soluble Fas．An inhibitor of apoptosis．associated with progression of COPD.Respir Med，1998，92(8)：993-999.? 
　　［6］ DE BOER WI．Cytokines and therapy in COPD.Chest，2002，121：209-218.? 
　　［7］ Chen JJ，Sun Y，NabelGJ．Regulation ofthe proinflammatory effectsofFas ligand(CD95L).Science，1998，282：1714-1717.?