ＴＮＦ－α、ＩＬ－６、ＩＬ－８与溃疡性结肠炎严重程度相关研究

　　【摘要】 目的观察血浆TNF-α、IL-6及IL-8与溃疡性结肠炎(UC)严重程度的相关性，探讨炎性细胞因子在UC发病中的作用。方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测不同严重程度溃疡性结肠炎患者56例及正常对照组血清TNF-α、IL-6及IL-8的水平。分别比较活动期溃疡性结肠炎患者与缓解期、正常对照组的TNF-α、IL-6及IL-8的水平的差异；比较缓解期患者与正常对照组的差异；比较重度溃疡性结肠炎患者与轻、中度患者血清TNF-α、IL-6及IL-8的水平的差异。结果 活动期溃疡性结肠炎患者血清TNF-α、IL-6及IL-8的水平明显高于缓解期和正常对照组(P<0．05)；缓解期患者血清TNF-α、IL-6及IL-8的水平与正常对照组相比差异无统计学意义(P>0．05)；重度溃疡性结肠炎患者血清TNF-α、IL-6及IL-8的水平高于轻、中度组(P<0．05)。结论 溃疡性结肠炎患者存在严重的细胞免疫功能紊乱；TNF-α、IL-6及IL-8在溃疡性结肠炎的发生和病情中起着重要作用；测定血清TNF-α、IL-6及IL-8的水平可反映溃疡性结肠炎的病情程度。?
　　【关键词】 溃疡性结肠炎；细胞因子；TNF-α；IL-6；IL-8??
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　　【Abstract】 Objective To observe the severity correlation of TNF-α、IL-6 and IL-8levels in plasma in patients with ulcerative colitis and investigate mechanism of ulcerative colitis． Methods TNF-α,IL-6 and IL-8 levels in plasma were measured with ELISA methods in 56 patients with ulcerative colitis and 20 normal persons as a control group． The active and catabolic phases of ulcerative colitis were compared and the difference were compared among slight，moderate and sever groups． Results The level of serum TNF-α,IL-6 and IL-8in active ulcerative colitis was much more higher than catabolic ulcerative colitis and contrast group(P<0．05)．The level had no significant differences between catabolic ulcerative colitis and contrast group(P>0．05)．The level in severe group was higher than that in moderate and slight group(P<0．05)．ConclusionsThere is a sever disorders of cellular immunity in the patients with active ulcerative colitis． TNF-α,IL-6 and IL-8 play the very important roles in the genesis and development of ulcerative colitis． The measurement of TNF-α,IL-6 and IL-8 levels in plasma may contribute to predict the severity of ulcerative colitis．?
　　【Key words】Ulcerative colitis;Cytokines;Tumor necrosis factor-alpha;Interleukin-6;Interleukin-8?
　　
　　溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，UC)尽管确切的病因不十分明了，但有证据显示UC的发生与免疫、遗传、环境及感染因素有关，免疫因素在其中发挥着重要作用 ，由活化的淋巴细胞、单核-巨噬细胞所分泌的作为免疫调节剂的促炎性细胞因子TNF-α、IL-6、IL-8等参与了肠黏膜炎性反应的起始和发展过程，在正常或异常的肠道免疫反应中起重要的作用。本文进一步阐明和探讨不同病情程度溃疡性结肠炎患者TNF-α、IL-6、IL-8等因子在其发病机制中的作用。?
　　1 对象和方法?
　　1．1 对象 48例患者来自本院门诊及住院的溃疡性结肠炎（UC）患者，其中男26例，女22例，年龄28～70岁，平均（39．6±9．5）岁；病程2个月～14年，平均（4．2±0．7）年。全部病例均符合2000年10月成都全国炎症性肠病研讨会制订的《对炎症性肠病诊断规范的建议》中的诊断标准；根据病情严重程度将48例UC患者分为轻(12例)，中(28例)，重度(8例)3级；病变范围累及直、乙状结肠者30例，累及左半结肠者14例，累及全结肠者4例。上述病例经内科系统治疗后病情缓解者(缓解期)34例。正常对照组30例，均来自健康体检者，两年内无胃肠道及其他炎症性肠疾病，排除风湿性疾病、感染和肿瘤患者，其中男16例，女14例；年龄20～65岁，平均（37．8±8．9）岁。?
　　1．2 测定方法 患者于入院后收集溃疡性结肠炎患者和正常对照组静脉血6 ml，EDTA抗凝。TNF-α、IL-6 、IL-8检测采用双抗体夹心ELISA法，在492 nm处测定吸光度(A值)，所有A值都应减除空白值后再行，绘出标准曲线，根据样品A值求出标本中各因子浓度。检测试剂盒由军事医学院邦定生物公司提供，严格按照试剂盒说明操作。?
　　1．3 统计学方法 计量资料以均值±标准差(x±s)表示，两组间比较采用t检验。统计运用SPSS 12．1软件完成。?
　　2 结果?
　　2．1 UC患者不同病期血清TNF-α、IL-6、IL-8水平比较 活动期溃疡性结肠炎患者血清TNF-α、IL-6、IL-8水平明显高于缓解期和正常对照组(P<0．05)；缓解期溃疡性结肠炎患者血清TNF-α、IL-6、IL-8水平与正常对照组相比差异无统计学意义(P>0．05),见表1。? 　　2．2 UC患者不同病情程度血清TNF-α、IL-6、IL-8水平比较 重度组溃疡性结肠炎患者血清TNF-α、IL-6、IL-8水平明显高于轻、中度组患者(P<0．05),见表2。?
　　
　　
　　3 讨论?
　　UC是以腹痛、腹泻、黏液脓血便、里急后重等为主要症状，以结肠黏膜慢性炎性反应和溃疡形成为病理特点的一种非特异性炎症性肠病。其确切的病因不十分明了，目前认为是在遗传物质和环境因素的基础上，由于各种微生物抗原的刺激，激活体内免疫系统，导致细胞因子的平衡受到破坏，各种炎症细胞活化、粘附分子表达异常，并向炎性反应部位聚集，释放多种炎性因子，从而导致肠组织的慢性炎症反应^[1]。因此，近年来各种炎症细胞、细胞因子在UC发病中的作用倍受重视^[2]。本研究显示UC患者血清TNF-α、IL-6、IL-8明显增高，并随病情的好转而下降，进一步证实这些细胞因子参与UC的病理过程且与病情轻重相关。?
　　TNF-α主要由单核细胞、巨噬细胞和T细胞产生， 它不仅能刺激巨噬细胞、纤维母细胞、平滑肌细胞、上皮细胞和内皮细胞分泌花生四烯酸代谢物、细胞因子和蛋白酶，还能吞噬细胞产物和补体片段引起细胞坏死、间质中蛋白质破坏和水肿的发生，从而促进胃肠细胞的组织损害。此外，TNF-α可协同IFN-γ 改变肠上皮细胞的形态结构和屏障特性，导致黏膜通透性增加；另TNF-α还可诱导结肠上皮细胞凋亡，促进UC的发生^[3]。UC患者病情进展时血清TNF-α水平升高与疾病活动的临床和实验室指标相符。因此，测定TNF-α对了解IBD患者的病变程度和活动度具有重要意义。?
　　IL-6主要由活化的巨噬细胞、淋巴细胞及上皮细胞分泌，其生物学效应类似于IL-1β，可通过STAT-3途径激活NK-KB而诱导细胞间黏附分子(ICAM-1)的极化表达，后者是在炎性肠病患者中性粒细胞、上皮细胞间相互作用中起重要作用的一种黏附颗粒。因而，在慢性肠道炎性反应的发病机制中起至关重要的作用^[4]。IL-6在急性炎症反应中的作用主要表现为对多种细胞的促炎作用和诱导肝组织产生急性反应蛋白，故活动期UC患者的血清IL-6水平比健康成人及缓解期患者显著升高。?
　　IL-8是一种强而有力的中性粒细胞趋化和活化因子，由单核细胞、上皮细胞、表皮细胞、纤维母细胞及T淋巴细胞在IL-1、TNF和外源性因子细菌多糖(LPS)的刺激下产生，主要生物学作用是趋化并激活中性粒细胞，促进中性粒细胞的溶酶体酶活性和吞噬作用，对嗜碱性粒细胞和T细胞也有一定的趋化作用。目前认为TNF、IL-1、IL-6诱发的炎症反应在很大程度上是通过诱导产生以IL-8为代表的趋化因子所介导的^[5]。UC患者IL-8水平显著升高，且与病灶的炎性反应程度成正相关，其检测可作为临床上判断疾病严重程度和疗效的指标。?
　　细胞因子在溃疡性结肠炎发病机制中的作用日渐明确，国外临床己开始实验性运用新的溃疡性结肠炎的措施，并取得一定的疗效，但正式用于临床之前还存在一些问题需要解决。在国内应用细胞因子及其拮抗剂类药物以缓解肠道炎症病变几乎尚属空白。随着细胞因子生物学特性的进一步阐明和新药的不断合成及综合应用，溃疡性结肠炎的临床治疗有望出现令人振奋的前景。?
　　
　　
　　［1］ Goral V,Celenk T, Kaplan A, et al． Plasma cytokine levels in ulcerative colitis． Hepatogastroenterology，2007, 54(76):1130-113．?
　　［2］ 卢艺涛，高静，姚桂琴． 溃疡性结肠炎患者相关细胞因子的实验性研究． 预防医学，2005，32(7):735-736．?
　　［3］ Schinzari F, Armuzzi A, De Pascalis B,et al． Tumor necrosis factor-alpha antagonism improves endothelial dysfunction in patients with Crohn’s disease． Clin Pharmacol Ther． 2008 , 83(1):70-76．?
　　［4］ Aleksandra Nielsen A,Nederby Nielsen J , Schmedes A, et al．Saliva Interleukin-6 in patients with inflammatory bowel disease．Scand J Gastroenterol， 2005 ,40(12):1444-1448．?
　　［5］ Reddy KP, Markowitz JE, Ruchelli ED, et al． Lamina propria and circulating interleukin-8 in newly and previously diagnosed pediatric inflammatory bowel disease patients． Dig Dis Sci，2007,52(2):365-372．