茺蔚子降血压活性成分筛选的实验研究

                     作者：高文义，李银清，蔡广知，陶贵斌，贡济宇

【摘要】  目的：观察茺蔚子的降压作用并对其降压作用的具体化学成分进行初步探讨。方法：以正常大鼠在给药前后血压变化情况，观察茺蔚子的降压作用。空白对照组给予相应量的蒸馏水，阳性对照组给予硝苯吡啶0.003 g/kg；实验组给予茺蔚子醇提液的乙醚、乙酸乙酯、正丁醇和水萃取物，剂量为0.216 g/ mL；灌胃给药，连续10 d；采用颈动脉插管法，分别观察并记录最后1次给药后10、20、30、45、60 min时的血压变化。结果：茺蔚子水层对正常大鼠有明显降压作用(P＜0.05)，正丁醇层、乙酸乙酯层、乙醚层均可使正常大鼠收缩压降低(P＞0.05)，对舒张压无明显影响，但有一定降低趋势。结论：茺蔚子水溶性成分对正常大鼠降压作用明显，水层中主要含生物碱类成分，生物碱可能是茺蔚子降压作用的主要化学成分。

【关键词】  茺蔚子；降压作用；化学成分；大白鼠

　　茺蔚子为唇形科植物益母草Leonurus japonicus Houtt.的干燥成熟果实。史载于《神农本草经》，列为上品，历代本草均有收载。据报道［1-5］，茺蔚子主要用于原发性高血压、子宫脱垂、甲状腺机能亢进等症。茺蔚子化学成分丰富［6-10］，但是对其降血压作用的成分在国内尚未见详细报道。本实验对茺蔚子的降血压作用的成分进行了初步研究，为阐明其降血压作用和进一步开发利用奠定了基础。

　　1  材料与方法

　　1.1  材料

　　1.1.1  动物  昆明种大白鼠，体重180-200 g，雄性，由长春中医药大学中药药理动物室提供。

　　1.1.2  药物  茺蔚子由吉林省宏检医药药材有限公司购进；硝苯吡啶，杭州药厂生产,批号：900722；戊巴比妥钠溶液5 g/d，上海化学试剂厂，批号860122；其他试剂均为国产分析纯。

　　1.1.3  仪器  实验仪器BL-410型四道生理记录仪，成都泰盟科技有限公司生产；YH-4型生理压力传感器，北京航天医学工程研究所生产。

　　1.2  方法

　　1.2.1  茺蔚子化学成分提取工艺研究  取茺蔚子粉末100 g,超声提取2次，第1次加95%乙醇800 mL，第2次600 mL，每次30 min，过滤，总提取液回收乙醇，转移至蒸发皿中,80℃水浴挥散至无醇味,用40 mL蒸馏水转移至分液漏斗中，石油醚脱脂，除去石油醚，水层继续用DE，等量萃取至醚层无色，乙醚层回收溶剂后加1 mL吐温-80蒸馏水定容至463 mL，冰箱冷藏；水层挥散乙醚，继续用EtoAc等量萃取至酯层无色，酯层回收溶剂后用蒸馏水定容至463 mL，冰箱冷藏；水层挥散EtoAc，继续用水饱和n-BuOH等量萃取至醇层无色，醇层回收溶剂后用蒸馏水定容至463 mL，冰箱冷藏；水层挥散至无醇味定容至463 mL，冰箱冷藏。

　　1.2.2  分组  雄性大鼠60只，随机分为对照组，阳性对照组，茺蔚子水层组(CWZ)、乙醚组(DE)、乙酸乙酯组(EtoAc)和正丁醇组(n-BuOH)，每组10只。

　　1.2.3  给药方式  灌胃给药，连续10 d，每组每天给药1次，给药量0.5 mL/200 g体重(相当于生药0.108 g)［11］。

　　1.2.4  血压测定方法［12-13］  大鼠以戊巴比妥钠50 mg/kg体重腹腔注射，麻醉，仰卧固定于鼠手术台上，剪开颈部正中皮肤2 cm左右，分离肌肉，游离出左侧颈总动脉，结扎远心端，近心端用动脉夹阻断，将动脉在靠近远心端结扎一侧用眼科剪剪一“Ｖ”形小口，插入动脉插管，结扎，打开动脉夹。经YH-4型生理压力传感器与BL-410型四道生理记录仪生物机能实验系统连接记录动脉血压。剪开大鼠右上腹部皮肤，分离肌肉，打开腹腔，分离十二指肠，留用给药，手术完毕后约10 min，待大鼠血压稳定，开始记录给药前血压。然后进行十二指肠末次给药，并观察、记录给药后10、20、30、45、60 min时的血压变化。

　　1.2.5  降压功效判定标准  显效：舒张压下降≥20 mmHg；收缩压下降≥30 mmHg；有效：舒张压下降≥10 mmHg；收缩压下降≥20 mmHg；无效：未达到以上标准者。

　　1.2.6  数据处理  对实验中所测得的血压进行统计分析，血压的平均值和均数相差的标准误，并进行组间t检验。

　　2  实验结果
    　　
　　在连续给药10 d后，与空白对照组比较，给予茺蔚子水层组的收缩压，舒张压差异均极显著，收缩压平均降低(35.21±11.92) mmHg,舒张压平均降低(22.05±5.26) mmHg；给予正丁醇层组、乙酸乙酯组、乙醚组收缩压差异显著，但舒张压无明显影响，但有降压趋势。见表1。

　　表1  CWZ对正常大鼠血压的影响（略）

　　注：与空白对照组进行组间t检验，各组比较：#P＜0.05，##P＜0.01

　　3  小结与讨论
    　 　
　　茺蔚子化学成分丰富，有报道［14］从茺蔚子的乙酸乙酯层中分离得到了6种成分，分别为β-谷甾醇、汉黄芩素、槲皮素、胡萝卜苷、magastigmane和核黄素，从水层中分离得到一个生物碱成分，经波谱鉴定为益母草宁。茺蔚子中还含有其他一些生物碱类成分。在临床中除用于月经不调、经闭、痛经、产后瘀血腹痛、目赤肿痛、目暗不明、头晕胀痛外，还常用于治疗原发性高血压，而且降压作用明显［15-16］。
    　　
　　经过本实验可知中药茺蔚子确实具有降压作用，与临床应用相符合。对正常大鼠血压作用明显，其水溶性成分对正常大鼠降压作用尤为明显，水层中主要含有生物碱类成分，可能是茺蔚子降压作用的主要化学成分。其降压作用的机理还有待于进一步探讨。

【】
  　　［1］毛德西.活血降压茺蔚子［J］.中医药报,2002,13(1):55-56.

　　［2］宋景平.茺蔚子的临床应用［J］.中国中医药报,2001,2(1):15-16.

　　［3］许凤珍.茺蔚子、僿莶草治疗高血压病255例［J］.中国社区医师,2002,2(17):20-21.

　　［4］柯增华.茺蔚子临证妙用［J］.陕西中医,2002,2(2):14-16.

　　［5］孙 浩.益母草、茺蔚子均为行血除水药,二者有何特长［J］.中医杂志,2006,12(5):4-5.

　　［6］魏晓舒.气相色谱内标法测定月见草油胶囊中γ-亚麻酸的含量［J］.应用药学,1996,13(1):55-56.

　　［7］徐 欣,王远程,杨 峰,等.香椿籽油的制取精炼及品质分析［J］.中国粮油学报,1994,9(3):38-40.

　　［8］林文群,陈宏靖,陈 忠.茺蔚子化学成分的研究［J］.福建师范大学学报：报,2001,17(2):84-87.

　　［9］刘晓冬,阎 霄,卫永第,等.苍术挥发油成分的分析［J］.分析测试学报,1998,17(3):56-57.

　　［10］蒋纪洋,潘明湖.不同炮制方法对茺蔚子水溶性成分含量的影响［J］.时珍国医国药,1993,(03):126-128.

　　［11］中华人民共和国药典委员会.中国药典［S］.北京：化学出版社，2005.

　　［12］陈 奇.中药药理实验方法［M］.北京:人民卫生出版社,1994:206,160.

　　［13］李仪奎.中药药理实验方法学［M］.上海:上海科学技术出版社,2000：150.

　　［14］高 佳,蔡广知,刘 汇,等.茺蔚子脂肪酸成分的研究［J］.长春中医药大学学报,2006,(3):40-41.

　　［15］晁 志,周秀佳.益母草类中药的研究概况和进展［J］.中草药,1998,29(6):415-416.

　　［16］阮会兰,杜俊蓉,曾庆忠,等.益母草的化学、药理和临床研究进展［J］.中国中药杂志,1991,16(3):138.