运脾固表法防治小儿反复呼吸道感染的肠道微生态机制研究
作者：许双虹 陈晓刚 胡小英 刘华 赖东兰 李宜瑞 徐金燕
【摘要】 ［目的］探讨运脾固表法对反复呼吸道感染儿的肠道微生态的影响。［方法］选择1～12岁肺脾气虚型反复呼吸道感染患儿60例，随机分为组30例，对照组30例，治疗组口服运脾固表的中药复感宁方，对照组口服培菲康散（双歧三联活菌），疗程12周，比较两组治疗后双歧杆菌和肠杆菌菌群变化及B/E值，并与正常组对照。［结果］治疗后治疗组粪便标本中的双歧杆菌含量高于对照组（P<0.05），B/E值也高于对照组（P<0.05），而肠杆菌含量两组比较差异无显著意义（P>0.05）。治疗后两组粪便标本中的双歧杆菌含量及B/E值都仍然低于正常组（P<0.05），治疗组肠杆菌与正常组比较差异无显著意义（P>0.05），对照组则仍高于正常组（P<0.05）。［结论］运脾固表法能提高反复呼吸道感染儿肠道中双歧杆菌的数量及B/E值，降低肠杆菌含量，改善肠道微生态结构。
【关键词】 呼吸道感染；肺脾气虚；运脾固表；肠道微生态；小儿
Abstract：［Objective］ To explore the effect of the method of activating spleen to solidify superficial on intestinal microecology of children recurrent respiratory tract infection.［Method］ Select 60 cases aged 1～12 of Qi deficiency type of lung and spleen in recurrent respiratory tract infection,randomly divide them into treatment group 30 cases and control 30;the treatment one takes TCM Fugangning formula orally for activating spleen to solidify superficial;the other takes orally BIFICO,for 12 w;compare their Bifidobacteria(B) and Escherichia coli(E) changes and B/E value after treatment,compare it to the control one’s.［Result］ After treatment,in the dejecta samples,the B content was higher than that in control one（P<0.05）,so was B/E;while E had no marked difference between them（P>0.05）;the B and E content and B/E were lower than normal group（P<0.05）;there’s no marked difference compared with normal group on B（P>0.05）， while control group was more than the normal group（P<0.05）.［Conclusion］ Activating spleen to solidify superficial can improve B content and B/E in the intestine of children recurrent respiratory tract infection,reduce E content and improve intestinal microecological structure.
Key words: respiratory tract infection;Qi deficiency of lung and spleen;activate spleen to solidify superfacial;intestinal microecology;children
反复呼吸道感染（Recurrent Respiratory Tract Infection，RRTI）是指根据不同的年龄段，呼吸道感染每年发病在一定次数以上。其临床特点为反复发作的上、下呼吸道感染，部分患儿上感后可迅速为支气管炎或肺炎，少数则诱发哮喘。我们应用运脾固表法防治小儿反复呼吸道感染取得较好的临床疗效［1］。为探讨其对反复呼吸道感染儿的肠道微生态的影响，于2007年至2008年进行了以下研究。
1 临床资料
1.1 纳入标准 参照全国第一届小儿呼吸道疾病学术会议（1987年）制定的RRTI诊断标准［2］：（1）年龄：① 0 ～ 2 岁，每年上呼吸道感染 ≥7 次，或下呼吸道感染 ≥3 次；② 3 ～5 岁，每年上呼吸道感染 ≥6 次，或下呼吸道感染≥ 2 次；③ 6 ～ 12 岁，每年上呼吸道感染≥ 5 次，或下呼吸道感染≥ 2 次。（2）上呼吸道感染第2次距第1次至少7 d以上。（3）若上感次数未达到标准，可加下呼吸道感染次数，但不能用上呼吸道感染次数折抵下呼吸道感染，否则诊断不能成立，观察时限至少1年。中医辨证分型标准：肺脾气虚的辨证参照国家中医药管理局《中医病证诊断疗效标准》［3］拟定。
1.2 排除标准 （1）不符合上述诊断标准和分型标准者；（2）患儿重度营养不良或合并有严重心、肝、肾、肺系疾病、造血系统疾病或先天性免疫缺陷者；（3）近一个月内曾用过免疫抑制剂或免疫调节剂者；（4）不愿配合研究者。
1.3 一般资料 广州中医药大学第一附属儿科门诊的1～12岁患儿60例，均符合上述诊断标准和分型标准。随机分为治疗组和对照组，每组30例，另选15例同年龄段的正常健康儿童作为健康儿童对照组。分别采用t检验和非校正法对两组资料进行检验，结果显示两组资料在性别、年龄、体重分布上均无统计学差异（P>0.05）。
2 方法
2.1 治疗方法
2.1.1 治疗组 口服感宁方（药物组成：五爪龙12g，太子参12g，茯苓12g，猴头菇12g，五叶参9g，薏苡仁12g，鸡内金6g，生甘草3g），以上用量适用于3～6岁儿童，2～3岁减少1/3量，6～12岁增加1/3量，每日1剂，水煎服，于患儿RRTI的缓解期开始服用，连用12周为1疗程。
2.1.2 对照组 采用培菲康散（双歧三联活菌）（上海信谊医药有限公司生产，1g/包，每包含双歧三联活菌3.0×107CFU）口服，2～3岁每日1次，每次1包；3～6岁每日2次，每次1包；6～12岁每日3次，每次1包，连用12周为1疗程，疗程结束后1周取粪便标本检测。
2.2 肠道微生态的检测 疗程结束后第7天留取新鲜大便2～5g，并于半小时内放入-20℃冰箱储存。粪便标本中的DNA用德国QIAGEN公司提供的QIAamp DNA Stool Mini Kit提取，并由中山大学达安基因诊断中心采用Taqman荧光定量PCR技术检测粪便标本中双歧杆菌及大肠杆菌的DNA含量，结果分析用PE 7000全自动荧光定量PCR仪。
2.3 统计学方法 应用SPSS统计软件包，所得结果以x±s表示，计量资料用t检验。
3 结果
3.1 前比较 见表1。
表1 治疗前三组粪便标本中双歧杆菌和肠杆菌及B/E值的比较（略）
与对照组比较，*P>0.05，与正常组比较，**P<0.01，△P<0.01
3.2 治疗后比较 见表2。
表2 治疗后三组粪便标本中双歧杆菌和肠杆菌及B/E值的比较（略）
与对照组比较，*P<0.05，△P>0.05，▲P<0.05；与正常组比较，*P<0.05，△P>0.05，▲P<0.05，**P<0.05
4 讨论
RRTI的病机关键在于正虚，肺脾气虚是其发病的主要原因。而脾气虚与肠道微生态失衡有关。
运脾固表中药复方复感宁方健脾益气、补肺固表，兼能化痰利湿消食，扶正祛邪。本方应用于临床多年取得较好的疗效。我们推测其作用机制之一是通过调节肠道微生态而改善机体的免疫功能。
本研究结果表明：治疗前治疗组与对照组粪便标本中的双歧杆菌与肠杆菌含量及B/E值比较差异均无显著意义（P>0.05），具有可比性。两组粪便标本中的双歧杆菌含量及B/E值较正常组降低（P<0.01），而肠杆菌较正常组高（P<0.01），差异有统计学意义，提示RRTI患儿存在肠道菌群失调，表现为双歧杆菌含量及B/E值下降，而肠杆菌含量升高。双歧杆菌是存在于人体的益生菌，它的减少可致机体抗病能力的降低，可能是小儿RRTI病情反反复复的原因之一；肠杆菌在机体正常状态下无致病性，而机体抵抗力下降时，细菌移位到肠外部位可作为条件致病菌而引起疾病，其释放的物质可加速有害菌群的孳生，同时也抑制有益菌群的正常功能。
治疗后治疗组粪便标本中的双歧杆菌含量高于对照组，差异有显著意义（P<0.05），B/E值也高于对照组（P<0.05），而肠杆菌含量两组比较差异无显著意义（P>0.05），治疗后两组粪便标本中的双歧杆菌含量及B/E值都仍然低于正常组（P<0.05），治疗后治疗组肠杆菌与正常组比较差异无显著意义（P>0.05），对照组则仍高于正常组（P<0.05），有统计学差异。提示两种方法均有改善肠道微生态的作用，可使粪便标本中的双歧杆菌含量及B/E值升高，且双歧杆菌的增长幅度，治疗组高于对照组，B/E值治疗组也高于对照组，运脾固表法优于微生态制剂培菲康散（双歧三联活菌）。双歧杆菌及B/E值的增高提示患儿肠道定植抗力增强［4］，局部微生态失衡得到调整。
【】
［1］ 李伟元，李宜瑞.复感宁方治疗肺脾气虚挟湿滞型复感儿疗效观察［J］.辽宁中医杂志，2004，31(2)：23?24.
［2］ 胡仪吉.反复呼吸道感染的诊断标准［J］.中华儿科杂志，1988，26(1)：41.
［3］ 国家中医药管理局.中医病证诊断疗效标准［S］.南京大学出版社，1994:6.
［4］ 吴仲文,李兰娟,马伟杭，等.肠道微生物定植抗力的新指标?B/E值［J］.浙江预防医学，2000，12(7)：4?5.
