脓毒性脑病患儿血清神经元特异性烯醇酶及S100B蛋白的表达及其临床意义
作者：夏汉兵，余道兵，刘喜，刘纯义，陆必森，罗勇，刘方
【摘要】 目的 探讨脓毒性脑病(SAE)患儿血清脑损伤早期标志物神经元特异性烯醇酶(NSE)及S100B蛋白的表达,为临床早期诊断SAE及干预该病进展提供佐证。方法 选择36例SAE为研究对象，依据脓毒性脑病诊断标准分为早期和晚期病例，同时选择20例健康儿童为对照组。检测血清NSE及S100B蛋白水平，分析两组血清NSE及S100B蛋白水平之间的差异，并与健康对照组进行比较。结果 两期SAE血清NSE及S100B蛋白浓度明显高于对照组(P<0.01)，而且两期SAE之间存在显著性差异。早期和晚期SAE患儿进行改良GCS评分后，评分≤7的病例，其NSE和S100B蛋白增高水平无显著性差异。结论 SAE患儿血清中脑损伤标志物NSE及S100B蛋白异常表达，早期监测NSE和S100B蛋白的异常表达对判断病情及预后有积极意义。
【关键词】 脓毒性脑病;神经元特异性烯醇酶;S100B蛋白
ABSTRACT：Objective To investigate the expression and clinical significance of serum markers of early brain injury,neuron?specific enolase(NSE) and S100B protein in children with septic encephalopathy(SAE).Methods According to the diagnostic criteria of SAE,36 cases with SAE were divided into two groups with cases in early stage and ones in late stage,and 20 healthy children were selected as control group at the same time.Serum NSE and S100B protein levels were detected,and the differences of NSE and S100B protein between the two groups were analyzed.Results The levels of NSE and S?100B in the two groups with SAE were obviously higher than those in control group(P<0.01),and there were significant differences in serum concentrations of NSE and S?100B between the two groups.Conclusion There is significant increase of serum neuron?specific enolase and S100B protein in children with septic encephalopathy,which may be useful for early diagnosis and intervention of the disease.
KEY WORDS：Septic encephalopathy;Neuron?Specific enolase;S100B protein
脓毒症(sepsis)是儿科常见的危重症，其临床所发生的序贯性脏器损害中，脓毒症性脑病(SAE)很常见。根据病程可将SAE分为早期和晚期脑病两种[1],早期在多脏器衰竭发生前出现,晚期则在多脏器衰竭时出现。但早期中枢神经系统临床表现易被酸碱失衡、水电解质紊乱或原发病等因素所掩盖而失去诊治机会，故而作者通过探讨患儿血清中的脑损伤早期标志物神经元特异性烯醇酶(NSE)及S100B蛋白的表达，为临床早期干预脑功能损伤提供有力佐证。
1 资料与方法
1.1 一般资料
全部入选病例于2005年6月至2008年10月在我院重症监护室住院，诊断均符合小儿脓毒症诊断标准[2]和脓毒性脑病诊断标准[3],既往均无中枢神经系统疾病史,并排除尿毒症脑病、肝昏迷和毒物、药物中毒的36例患儿为研究组。其中男20例,女16例。年龄最小2月,最大3岁6个月,平均16.5个月。住院时间7.5±5.4d。早期脓毒性脑病21例,晚期脓毒性脑病15例。原发病包括:呼吸道感染24例(其中肺炎17例，化脓性扁桃体炎5例，喉炎2例)、败血症3例、感染性腹泻4例(其中中毒性菌痢1例)、伤寒2例、化脓性淋巴结炎2例和病毒感染1例。发病时间为原发病起病后2.4±1.0d。36例患儿均有意识障碍,其中嗜睡8例，昏睡12例, 浅昏迷9例,深昏迷7例。前囟紧张和(或)膨隆13例。颈项强直9例。惊厥26例,其中全身抽搐22例,局部抽搐4例。左侧肢体瘫痪2例。脑疝1例。死亡4例。本组患儿参照改良Glasgow昏迷评分[4](GCS)标准进行评分, 其中 GCS≤7分19例, GCS>7分17例。
选择20例同年龄段同期在我院儿科进行健康体检的正常健康儿为对照组。其中男12例，女8例;年龄最小2月,最大3岁8个月,平均17.5个月。
1.2 方法
1.2.1 标本收集
收集所有研究组的病例资料，进行标准化神经系统体检及GCS评分，肘静脉抽取血3ml,常温即刻送检，若超过8h未能送检，则储藏于4℃冰箱保存并于2d内送检。对照组取血方式与研究组相同。
1.2.2 检测方法
S?100B蛋白测定采用双抗体夹心ELISA法,试剂盒由美国LIFEKEY公司提供,用美国产ELX800型酶标仪检测。NSE测定采用放免法,试剂盒由瑞典CanAg公司提供，用美国BECKMAN公司生产的Access型贝克曼全自动化学发光免疫分析仪检测，均严格按说明书操作。
1.3 统计学处理
数据采用均数±标准差表示,将所得数据进行两两独立样本t检验,运用SPSS10.0软件包进行统计学分析。
2 结 果
3组血清NSE检测结果分别为:早期(13.62±2.93)μg/L,晚期(27.15±9.84)μg/L,对照组(6.26±2.08)μg/L。早期和晚期分别与对照组比较差异均有统计学意义，P均<0.01。
3组血清S100B蛋白检测结果分别为：早期(2.27±0.99)μg/L,晚期(3.97±1.33)μg/L,对照组(0.35±0.21)μg/L。早期和晚期分别与对照组比较差异均有统计学意义，P均<0.01。
21例早期病例参照改良Glasgow昏迷评分，其中早期>7分15例，≤7分6例;晚期>7分15例，≤7分6例
3 讨 论
脓毒症是儿科常见危重症，国内外研究表明，脓毒症患儿脑血管内皮可有不同程度的损伤，引起微血管血栓形成、毛细血管通透性增加、血管扩张及低血压，导致脑血流的自主调节功能受损及全身血压下降[5]。加之病理过程中释放的细胞因子和NO引起线粒体功能失调而影响脑功能。另外脓毒症时血浆芳香族氨基酸水平升高[6，7]，易于通过血脑屏障进入脑组织而取代正常神经递质，进而干扰神经细胞功能。上述因素直接或间接作用于神经细胞和神经胶质细胞,引起脑细胞特别是星形胶质细胞的肿胀和变性,加重血脑屏障破坏和细胞膜损伤,产生和加重血管源性及细胞毒性脑水肿，发生脓毒症性脑病。
NSE是烯醇酶的一种同工酶,γ亚基组成的同工酶特异地存在于神经细胞和神经内分泌细胞。S100B蛋白是脑特异性蛋白，在评价星型神经胶质细胞损伤中有很高的特异性。两者是脑损伤早期诊断及预后评价的标志物。SAE患儿由于神经元和神经胶质细胞破坏，NSE和S100B蛋白释放到脑脊液甚至血液，故而血浆中两者表达增加。
本资料SAE早期和晚期研究组患儿NSE和S100B蛋白水平较对照组明显增高，提示脑损害存在。需要指出的是，本资料早期和晚期SAE患儿进行改良GCS评分后，评分≤7的病例，其NSE和S100B蛋白增高水平无显著性差异，提示单凭GCS评分尚不能判断SAE患儿脑损害程度。究其原因可能为以下因素会干扰对SAE患者神经系统的判断，进而影响GCS评分：①体温及血压等生命体征在SAE不同时期差别显著性不大;②频繁使用镇静剂;③机体代谢紊乱如酸中毒、血糖紊乱、低钙血症等在不同时期可有不同程度异常。
临床单凭GCS评分不能准确判断脑损伤实际程度，许多学者亦通过一些脑电生或神经系统影像学检查来了解SAE患儿脑损伤程度，已得到一些有意义的结论[8,9]。但SAE患儿临床病情较危重，许多病儿不宜搬动，此类操作执行起来比较困难，所以，进行血清NSE和S100B蛋白监测更具客观性及可操作性，特别是对于早期SAE患儿意义更大。本组SAE早期血清NSE和S100B蛋白较正常对照组已有显著增高，提示脑损害已存在，而晚期病例较早期病例增高也有显著性，表明脑损伤程度更重。因此，若早期对SAE患儿进行监测，对判断病情及预后有一定意义，临床早期积极有效地进行干预，便可防止脑损害进一步加重，减少该病病残率及死亡率。
【】
[1]Consales G,Gaudioar DE.Sepsis associated encephalo?pathy[J].Minerva Anestesiol,2005,71:39
[2] Bone RC,Balk RA,Cerra FB,et al.American college of chest physicians/society of critical care medicine consensus coference: definition for sepsis and guide?line for the use of innovative the rapies in sepsis[J].Crit Care Med,1992,20(6):864
[3] Papadopoulos MC,Davies DC, Moss RF, et al, Patho?physiology of septic encephalopathy:a review[J].Crit Care Med,2000,28(8):3019
[4] 中华医学会儿会急救学组.改良Glasgow昏迷评分法[J].中华儿科杂志, 1995,33(6):372
[5] 钱素云.脓毒症性脑病的研究进展[J].实用儿科临床杂志,2007,22(6):405
[6] Basler T,Meier Hellmann A,Bredle D,et al.Amino acid imbalance early in septic encephalopathy[J].Intens Care Med,2002,28(3):293
[7] Nakamura T,Kawagoe Y,Matsuda T,et al.Effects of polymyxin B2 immobilized fiber hemoper fusion on amino acid imbalance in septic encephalopathy[J].Blood Purif,2003,21(425):282
[8] Young GB,Bolton CF,Archibald YM,et al.The electroen cephalogram in sepsis?associated encephalopathy[J].J Clin Neurophysiol,1992, 9:145
[9] Zauner C,Gendo A,KramerL,et al.Impaired subcortical and cortical sensory evoked potential pathways in septic patients[J].Crit Care Med,2002,30:1136
