血管内皮生长因子受体在骨髓增生异常综合征中的作用研究

                    作者：尤学芬，罗琼，丁润生，谢玉娟，陆德炎

【摘要】  　　目的：探讨血管内皮生长因子受体（VEGFR）在骨髓增生异常综合征（MDS）发病机制中的作用。方法：用流式细胞仪测定MDS患者及正常人骨髓单个核细胞VEGFR（VEGFR1和VEGFR2）表达率。结果：VEGFR1阳性表达率结果显示：MDS高危组＞MDS低危组＞正常组（P＜0.01）；MDS组和正常组的VEGFR2表达结果无差异（P＞0.05）。结论：MDS患者 VEGFR1阳性表达增高，VEGFR1阳性表达增高与MDS病程进展有关，提示在MDS转化为白血病过程中VEGFR1起重要作用。

【关键词】  骨髓增生异常综合征 血管内皮生长因子受体 血管生成

　　[Abstract]   Objective: To investigate the pathogenetic role of the VEGFR in MDS. Methods: The expression of VEGFR was determined by flow cytometry(FCM). Results: All bone marrow mononuclear cells had higher expression of VEGFR1 in MDS than that in the control group（P＜0.01）. But as to the expression of VEGFR2, there was no difference between these two groups（P＞0.05）. Conclusion: These data suggest that VEGFR1 is increased in MDS and may play a role in the leukemogenic process.

　　[Key word]   Myelodysplasyic syndrome； Vascular endothelial growth factor receptor； Angiogenesis

　　近年来越来越多的证据表明：多种血液系统恶性肿瘤患者骨髓中存在血管新生现象，血管新生及其调控因子与血液系统恶性肿瘤的发生、进展和预后有密切的关系。骨髓增生异常综合征（myelodysplasyic syndrome）是造血干细胞异质性的克隆性疾病，在疾病过程具有高风险转化为急性髓细胞白血病（AML）的特点，其确切的发病机制迄今不明。我们检测了MDS患者骨髓单个核细胞血管内皮生长因子受体（vascular endothelial growth factor receptor）水平，以探讨其在MDS发病机制、病情进展中的作用。

　　1   材料与方法

　　1.1   骨髓单个核细胞VEGFR检测  2002年6月~2005年10月我院门诊或住院患者，符合1997年WHO标准[1]。将MDS患者12例根据病情分成两组，难治性贫血（RA）、环状铁粒幼细胞增多性难治性贫血（RAS）为低危组，原始细胞增多性难治性贫血（RAEB）为高危组，男8例，女4例，年龄7~85岁，平均45 岁。正常对照组12例，均来自2004年7月～2005年12月本院住院患者及门诊患者。无菌采集骨髓液,枸橼酸钠抗凝,人淋巴细胞分离液常规分离骨髓单个核细胞，调整细胞密度至4×109/L，流式细胞仪（FCM，BD公司）分析骨髓单个核细胞表面VEGFR（VEGFR1和VEGFR2）表达。VEGFR检测试剂为BD公司产品。

　　1.2   统计学方法   用Stata7.0统计软件进行分析。检测结果，以x±s表示，两两比较采用q检验，以α=0.05作为检验水准。

　　VEGFR家族中有3种不同的酪氨酸激酶受体：VEGFR1（Flt1）、VEGFR2（KDR）和VEGFR3，其中VEGFR1和VEGFR2是血管内皮细胞特异性酪氨酸激酶蛋白受体，VEGFR3主要分布于淋巴管。VEGFR1和VEGFR2在脉管系统的形成中起至关重要的作用，已证实两者的破坏可导致胚胎死亡。 VEGFR2可能促进血管内皮细胞的进一步分化、增殖、迁移，在介导细胞增殖和迁移信号传导的途径中发挥主要作用[2]；而VEGFR1则作用于内皮细胞终末分化，传递分化信号，形成血管的管腔结构。两者在时间与空间上相互协作，共同调控血管新生的进行。

　　我们用流式细胞仪检测MDS患者骨髓单个核细胞VEGFR的结果表明，VEGFR1表达阳性率：MDS高危组＞MDS低危组＞正常组，而在介导细胞增殖和迁移信号传导途径中发挥主要作用的VEGFR2与正常人的差异无统计学意义，与Bellamy等[3]的研究结果基本一致。Bellamy等报道急性白血病和MDS患者的髓系原始细胞和单核系前体细胞主要高水平表达VEGFR1，特别是在未成熟细胞区域（ALIP）。

　　VEGFR1是最早被发现的VEGF的受体[4]，一些学者通过不同的实验结果提示：VEGFR1在某些环境中也可以发挥短暂的促内皮细胞生存作用[5]；如Luttum等[6]发现VEGFR1参与单核细胞介导的促进心肌缺血的模型侧枝血管的形成。LeCouter等[7]研究表明，VEGFR1的激活引起肝脏窦状隙内皮细胞旁分泌HGF、IL-6等细胞因子。

　　我们的研究结果表明：VEGFR1表达阳性率MDS高危组＞MDS低危组＞正常组，提示VEGFR1阳性表达增高与MDS病程进展有关，在MDS转化为白血病过程中VEGFR1可能起重要作用。

【】
  [1] Harris NL, Jaffe ES, Diebol D, et al. The World Health Organization classification of neoplastic diseases of the heamatopoietic and lymphoid tissues[J]. Histopathology,2000,36(1):69-92.

[2] Marchand GS, Noiseux N, Tanguay JF, et al. Blockade of in vivo VEGF-mediated angiogenesis by antisense gene therapy:role of Flk-1 and Flt-1 receptors[J]. Am J Physiol Heart Circ,2002,282(1):H194-204.

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[4] Infanger M, Faramarzi S, Grosse J, et al. Expression of vascular endothelial growth factor and receptor tyrosine kinases in cardiac ischemia/reperfusion injury[J]. Cardiovasc Pathol, 2007,16(5):291-299.

[5] Adini A, Kornage T, Firoozbakht F, et al. Placental growth fator is a survival factor for tumor endothelial cell and macrophages[J]. Cancer Res,2002,62(10):2749-2752.

[6] Luttun A, Tjwa M, Moons L, et al. Revascularization of ischemic tissue by PLGF treatment, and inhibition of tumor angiogenesis, arthritis and atherosclerosis by anti-Flt-1[J]. Nat, 2002,8(3):831-840.

[7] LeCouter J, Moritz DR, Li B, et al. Angiogenesis-independent endothelial protection of liver: role of VEGFR1[J]. Science, 2003, 299(4):890-893.

　　2   结      果

　　上述各组VEGFR1阳性表达结果显示：MDS患者组VEGFR1表达显著高于正常对照组（P＜0.01）； MDS低危组表达显著高于正常组而低于MDS高危组（P＜0.01），见表1。

　　对上述各组VEGFR2阳性表达率进行两两均数比较，均发现P＞0.05，见表1。

　　3   讨      论

　　MDS是造血系统异质性克隆增殖性疾病，其基本病变是克隆性造血干细胞、祖细胞发育异常导致无效造血以及高度转化为AML。

　　近年来，骨髓血管新生在各种恶性血液病中的意义日益受到重视，一些临床研究证实恶性血液病骨髓微血管密度增加。人类血管新生受促血管和抗血管生长因子的严密调控，即“血管形成开关的平衡假说”。在参与血管新生过程中，VEGF作用最强、特异性最高，其最主要的生物学作用是促进内皮细胞分裂增殖，在体外能促进内皮细胞生长，在体内可诱导血管新生。VEGF还可增加血管通透性，这是众多促血管生长因子中所特有的，VEGF与骨髓组织的血管内皮细胞表达的VEGFR结合，刺激内皮细胞的增殖及血管生成，从而导致骨髓微血管密度增高。