复方大血藤对大鼠慢性非细菌性前列腺炎的作用

【摘要】  目的： 研究复方大血藤（CDXT）对慢性非细菌性前列腺炎的作用及作用机理，为临床用药提供药依据。方法： 于SD 雄性大鼠前列腺背叶注射消痔灵复制慢性非细菌性前列腺炎（CNP）动物模型,用复方大血藤进行，观察前列腺组织形态学变化，测定大鼠前列腺组织中肿瘤坏死因子- α（TNF?α）白介素- 8（IL?8）水平。结果： 复方大血藤能改善CNP模型大鼠前列腺的组织病理结构，减轻炎症反应，降低TNF?α和IL?8水平。结论： 复方大血藤可减轻CNP时的慢性炎症病理改变，其作用机制可能与降低前列腺组织中TNF?α和IL?8水平有关。

【关键词】  前列腺炎； 复方大血藤； 肿瘤坏死因子?α； 白细胞介素8

　　［Abstract］Objective: To study the effect and mechanism of Daxueteng compound (DXT) on chronic nonbacterial prostatitis induced by Xiaozhiling. Methods: Chronic nonbacterial prostatitis animal model was established by injecting xiaozhiling into the prostate notopodium of SD male rats. The rat models were treated with DXT. The therapeutical effect of DXT and the changes of prostate tissue were observed. The tissue levels of tumor necrosis factor?α（TNF?α） and interleukin?8（IL?8） were determined with radio?immunity method.Results: DXT inhibited the histo?pathological changes and relieved inflammatory reaction of model rats, and showed effects of depressing TNF?α and IL?8 in model rats. Conclusion: DXT can inhibit the chronic pathological changes of the prostatic tissue, to which the decrease of TNF?α and IL?8 levels in prostate tissue might be one of the mechanisms.

　　［Key words］ prostatitis, chemically induced; complex of daxueteng; tumor necrosis factor α; interleukin?8
   
　　慢性前列腺炎是男性泌尿生殖系统的常见病和多发病，且慢性非细菌性前列腺炎(CNP)占绝大多数。由于CNP的病因及发病机制尚未完全明了，临床表现各异，因此临床上治疗效果不甚理想[1]，有证据显示免疫反应在其发病过程中起重要作用[2]。细胞因子作为免疫应答中起重要作用的分子，在对疾病的治疗和预测疗效中已初步显示出重要性。有研究表明，中医药在治疗CNP中可通过免疫调节作用，抑制炎症反应，以达到治疗的目的。2008年1月～7月，研究复方大血藤（CDXT）药液对消痔灵所致大鼠前列腺炎的作用，并对作用机制进行探讨。

　　1  材料和方法

　　1.1  动物

　　雄性SD大鼠，体重200～250 g，由贵阳医学院实验动物中心提供，合格证号SCXK（黔）2002-0001。        

　　1.2 药物与试剂
    
　　CDXT药液由贵州省贵定县胡三帖药业有限公司提供，水剂，每毫升药液含生药0.1 g；前列闭尔通栓由黑龙江省济仁药业有限公司生产，批号Z20020130；丙酸睾酮注射液由天津金耀氨基酸有限公司生产，批号H12020531；消痔灵注射液由北京双鹤高科天然药物有限责任公司生产，批号Z11020605；TNF?α、IL?8药盒由天津九鼎医学生物工程有限公司提供。

　　1.3 造模、分组及给药
    
　　60只雄性SD大鼠予0.9%戊巴比妥钠按0.5 ml/100 g麻醉，无菌条件下腹部正中切口，暴露膀胱和精囊内侧的前列腺背叶，正常对照组10只大鼠于前列腺背叶注射0.2 ml/只生理盐水,其余50只大鼠于前列腺背叶注射25%消痔灵注射液0.2 ml/只，关腹。术后第7天将造模的50只大鼠随机分成5组，每组10只，即模型组，CDXT高剂量（0.64 g/kg）、中剂量（0.32 g/kg）、低剂量组(0.16 g/kg）以及阳性药对照组(前列闭尔通栓0.47 g/kg)。正常对照组及模型组直肠给予0.64 ml/100 g蒸馏水，CDXT各组按上述剂量分两次给药，即每天上午9时及下午1时直肠给药各一次，连续给药30 d。

　　1.4 观察指标

　　1.4.1 一般情况 

　　实验期间观察大鼠的行为活动、毛发、体重、饮食、粪便等，30 d后，称大鼠体重，于末次给药3 h后股动脉放血处死大鼠。

　　1.4.2 前列腺系数 

　　取前列腺，天平称重，前列腺系数（前列腺重量∶大鼠体重，g/100 g）。

　　1.4.3 大体形态学观察及光镜检查 

　　肉眼观察前列腺组织形态、色泽及与周围组织粘连的情况，取相同部位的前列腺组织放入10%甲醛中固定，石蜡包埋切片，HE染色，光镜下观察前列腺的组织病理变化。

　　1.4.4 TNF?α和IL?8水平 

　　取前列腺组织的左侧叶，电子天平称重后，按每100 mg加入1 ml生理盐水，冰水浴中匀浆，匀浆液在0 ℃条件下3 000 r/min离心15 min，取上清液，放免法测定TNF?α和IL?8水平。

　　1．5 统计方法
    
　　实验数据以（x±s）表示，采用SPSS 11.5统计软件，进行单因素方差分析（One?Way ANOVA）,各组间两两比较采用LSD法，以P<0.05有显著性差异。

　　2 结果

　　2.1 一般情况 

　　模型组大鼠与正常组大鼠比较，活动减少，毛发稀疏无光泽；给药组大鼠与模型组大鼠比较，毛发有光泽，一般情况尚可。

　　2.2 前列腺系数 

　　模型组大鼠前列腺系数增大，与对照组相比，差异有显著性（P<0.01）。CDXT各剂量组不同程度降低前列腺系数，与模型组相比，差异有显著性（P<0.01或P<0.05），见表1。表1  各组大鼠前列腺系数比较（略）注：与对照组比较,（1）P<0.01;与模型组比较，(2)P<0.05;(3)P<0.01。

　　2.3 TNF?α和IL?8的水平 

　　模型组大鼠前列腺组织中TNF?α和IL?8水平增高，与正常对照组相比，有显著性差异（P<0.01）。CDXT各剂量组可降低前列腺组织中TNF?α和IL?8水平，与模型组相比，差异有显著性（P<0.01或P<0.05），见表2。表2  各组大鼠前列腺组织中TNF?α和IL?8水平比较（略）注：与对照组比较,（1）P<0.01;与模型组比较，(2)P<0.05;(3)P<0.01。

　　2.4 组织形态学改变 

　　肉眼观察：正常组前列腺表面红润有光泽,腺体组织柔软有弹性,与周围组织无粘连,易于分离;模型组前列腺呈暗红色或棕黄色，质硬、弹性较差，与周围组织广泛粘连,体积较正常组较大，不易分离;与模型组相比，组前列腺质地相对较软，弹性较好，颜色鲜红，与周围组织的粘连程度较轻。镜下观察：正常组大鼠前列腺组织结构完整, 腺腔无明显扩张，无炎性细胞浸润或水肿，间质内见少量纤维组织和血管（图1）; 模型组大鼠前列腺上皮呈乳头状增生，部分可见腺上皮坏死脱落，腺腔明显扩张，间质水肿，有大量炎性细胞浸润，间质纤维组织增生明显，血管扩张充血（图2）；治疗组大鼠前列腺组织炎性病理改变较模型组减轻，腺上皮正常或增生减少，未见或少见腺腔扩张，间质内无炎性细胞浸润或炎性细胞浸润较少，血管无明显扩张充血或较少发生，图3～5。

　　3 讨论
    
　　研究表明，炎症反应在CNP的发生过程中具有重要作用，免疫反应也可能参与了CNP的发病机制[3]。在炎症反应应答的调节机制中，细胞因子起了很重要的作用。细胞因子的分泌是组织发生炎症以致最终发生纤维化的重要因素，调控这些炎性因子可间接抑制炎症反应，改变组织纤维化的进程[4]。
    
　　TNF?α是一种重要的炎性细胞因子，由单核巨噬细胞、中性粒细胞、NK细胞、活化的淋巴细胞和血管内皮细胞以及其他细胞产生, 能增强巨噬细胞的活性和杀伤功能,增强巨噬细胞促进免疫应答的能力，促进成纤维细胞的增殖，诱导炎症介质的产生,促进单核巨噬细胞和中性粒细胞的趋化作用,增加黏附分子的表达,调节各种血管内皮细胞表面抗原的表达,刺激中性粒细胞与血管内皮细胞的黏附。TNF?α也是最早引起全身炎症反应的因子，能引起血管内皮细胞结构改变，导致血管内皮细胞损伤，使血浆蛋白和水大量渗进局部组织，加重局部炎症反应。研究者检测了慢性前列腺炎患者前列腺液和精液中TNF?α的水平,均发现TNF?α水平高于正常人。Razumov等[5]研究也认为TNF?α的变化可以作为前列腺炎的一种诊断工具。IL?8是相对低分子质量强效炎症趋化因子，在炎症刺激后由巨噬细胞、内皮细胞和其他细胞大量产生，也可由TNF?α诱导产生，其主要作用是募集中性粒细胞和单核细胞进入炎症部位和调节白细胞黏附分子的表达，进一步加重炎症反应[7]。研究提示，IL?8可作为临床感染的一种新的诊断依据，在前列腺液中检测到IL?8 即可考虑前列腺可能受到感染[8]。研究也表明，TNF?α和IL?8的表达与前列腺炎的症状、组织病改变及治疗反应有关，其对指导慢性前列腺炎的治疗具有重要意义[8,9]。
    
　　模型组大鼠前列腺内注射消痔灵[10]，根据前列腺组织病理切片结果显示，成功地复制了与临床病理类型相似的大鼠CNP模型，用CDXT直肠给药后，对前列腺系数、组织病理变化进行了对比观察，并检测前列腺组织中TNF?α和IL?8水平，结果发现TNF?α和IL?8水平越高，炎症反应越重，这说明TNF?α和IL?8水平的变化与组织病理学改变结果一致，表明CDXT可以减轻CNP时的炎症反应，减少炎性细胞浸润，抑制间质纤维组织增生，其作用机制可能与降低前列腺组织中TNF?α和IL?8水平有关，CDXT通过调节局部免疫功能，减轻及控制细胞因子级联反应，从而减轻炎症反应的发生，达到治疗目的。

【】
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　　[3]周晓辉, 韩蕾, 周智恒,等.免疫性慢性非细菌性前列腺炎大鼠模型的形态学与分子生物学特性[J].中华男科学杂志,2005(4):290-295.

　　[4]郑智华,叶任高,李幼姬，等.前列腺素E1对C?BSA原位肾炎血清白细胞介素?1,肿瘤坏死因子及病理变化的调节[J].中华肾脏病杂志,1995(3):152.

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