竹荪提取液对砷中毒大鼠血细胞参数的影响
作者：罗鹏，张爱华，吴应宽，汪希兰，潘雪莉
【摘要】 目的： 分析竹荪提取液对砷中毒大鼠血细胞15项参数的影响，为防治砷中毒及竹荪资源的开发利用提供依据。方法： As2O3经口染毒，建立砷中毒动物模型，竹荪提取液灌胃14 d，采用F? 820半自动血细胞分析仪测定实验动物血细胞参数。 结果： （1）与正常对照组比较，砷中毒模型组红细胞计数（RBC）、红细胞压积（HCT）、淋巴细胞绝对值（W?SCC）、血小板（PLT）显著降低，P<0.05或 P<0.01；红细胞血红蛋白含量（MCH）、平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）显著升高，P<0.05或P<0.01；（2）与砷中毒模型组比较，竹荪组RBC、血红蛋白（HGB）、HCT呈现升高趋势，MCH呈降低趋势，MCHC随竹荪剂量升高而降低，高剂量组差异具有显著性（P<0.05），平均红细胞体积（MCV）、红细胞体积宽度（RDW?CV）呈升高趋势且高于正常对照组；白细胞（WBC）、W?SCC、中性粒细胞绝对值（W?LCC）呈上升趋势；淋巴细胞百分数（W?SCR）在竹荪低剂量组显著性降低（P<0.05），而后随剂量增加呈上升趋势；中性粒细胞百分数（W?LCR）在竹荪低剂量组显著性升高（P<0.05），而后随剂量增加呈下降趋势；PLT持续降低，血小板分布宽度（PDW）、平均血小板体积（MPV）呈上升趋势，但差异无统计学意义。结论： AS2O3对实验大鼠血液系统有一定的损害作用，竹荪提取液对砷所致的大鼠血液系统红细胞、白细胞、血小板等指标具有一定的保护作用。
【关键词】 砷中毒； 红细胞； 白细胞； 血小板； 竹荪提取液； 大鼠，Wister
［Abstract］ Objective: To analyze 15 blood parmeters in arseniasis rats that changed under the influence of extract from Dictyophora duplicate(EXD), so as to provide references for further study. Methods: Arsenic poisoning animal model was established by given AS2O3 to rats orally. EXT was than used to treat these rats orally for 14 days, and F?820 semi?automatic blood corpuscle analyzer was adopted to analyze the blood parameters of experimental animals. Results: (1)Compared with those of normal control group (group C), RBC, HCT, W?SCC, and PLT were lower and MCH, and MCHC were higher significantly in arsenic poisoning group (group AP) (P﹤0.05 or P﹤0.01); (2)In EXD treated groups (high and low doses), RBC, HGB, HCT,MCV, and RDW?CV were higher than those of group AP, and MCV, and RDW?CV were higher than those of group C. When dose increased, MCHC descended significantly in high dose group (P﹤0.05). WBC, W?SCC, and W?LCC increased more along with dose raise. W?SCR descended significantly in the low dose group (P﹤0.05), but increased more when dose increased. W?LCR had opposite display to W?SCR. PLT continuously reduced along with dose raise. PDW and MPV showed a rise trend, but it was not statistically significant. Conclusions: AS2O3 has harmful effect on blood system of experimental rats to some extent, and EXD has sheltering effect on blood system, and can cause changes of erythrocye, leucocyte, and platelet indexes, but the mechanisms need to be studied further.
［Key words］ arsenic poisoning; erythrocytes; leukocytes; blood platelets; extract from Dicty ophora duplicata; rats, Wister
竹荪营养丰富，既有保健补益作用，又具有提高机体免疫力及抗肿瘤活性等特殊药用功效，是一种食、药兼用菌。贵州省既是一个燃煤型砷中毒的重病区，同时也是竹荪资源丰富的省份，为了了解竹荪对砷中毒实验大鼠血液系统的影响和血细胞参数的变化特征，在前期研究的基础上[1]，进一步观察了竹荪提取液对砷中毒大鼠血液系统的影响，为竹荪资源的开发利用和砷中毒的防治提供实验依据。
1 材料和方法
1.1 试剂
As2O3，分析纯，由贵阳医学院公共卫生学院中心实验室提供。
1.2 竹荪提取液的制备
市售竹荪干品250 g洗净，加3 000 ml双蒸水浸泡3 ｈ，制成匀浆，煮沸60 min，用8层纱布过滤，浓缩至500 ml，浓度为0.5 g/ml，4 ℃保存备用。
1.3 动物分组
Wistar健康大鼠32只，体重180～200 g，雌雄各半，贵阳医学院动物实验中心提供，合格证号SCXK（黔）2002-0001。随机分为4组：正常对照组，砷中毒模型组（5.0 mg/kg），砷+竹荪低剂量组(As2O35.0 mg/kg+竹荪5.0 g/kg)；砷+竹荪高剂量组（As2O35.0 mg/kg+竹荪10.0 g/kg）。2 ml/100 g灌胃染毒，每天1次，连续7 d，染毒7 d后给正常饮食、饮水；竹荪各剂量组用竹荪提取液灌胃，每天1次连续2周。2周后处死动物，颈动脉采血，肝素抗凝，4 ℃保存备用。
1.4 检测指标
采用Sysmex F?820半自动血细胞分析仪测定，严格按仪器说明书操作。测定：红细胞计数（RBC）、血红蛋白（HGB）、红细胞压积（HCT）、平均红细胞体积（MCV）、平均红细胞血红蛋白含量（MCH）、平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）、红细胞体积分布宽度（RDW?CV）、白细胞计数（WBC）、淋巴细胞百分数（W?SCR）、中性粒细胞百分数（W?LCR）、淋巴细胞绝对值（W?SCC）、中性粒细胞绝对值（W?LCC）、血小板（PLT）、血小板分布宽度（PDW）、平均血小板体积（MPV）。
1.5 统计学分析
采用SPSS 10.0统计软件进行分析，组间比较采用方差分析，P<0.05差异有统计学意义。
2 结果
2.1 血液红细胞系各项指标
由表1可见，砷中毒模型组与正常对照组相比，RBC和HCT显著降低，MCH和MCHC显著升高，P<0.05或P<0.01；与砷中毒模型组比较，竹荪处理组RBC、HGB、HCT呈现升高趋势，MCH呈降低趋势；MCHC随竹荪剂量升高而降低，高剂量组差异有显著性（P<0.05）；MCV、RDW?CV呈升高趋势，且高于正常对照组。贵阳医学院学报 34卷 6期罗 鹏等 竹荪提取液对砷中毒大鼠血细胞参数的影响表1 各组大鼠血液红细胞系各项指标检测结果（略）注：与正常对照组比较， （1）P<0.05，（2）P<0.01；与砷中毒模型组比较，（3）P<0.05。
2.2 血液白细胞系各项指标
由表2可见，与正常对照组比较，砷中毒模型组除W?SCC差异具有显著性（P<0.05）外，其余指标差异无统计学意义；与砷中毒模型组比较，WBC、W?SCC、W?LCC指标呈上升趋势；W?SCR在竹荪低剂量组显著性降低（P<0.05），而后随剂量增加呈上升趋势；W?LCR在竹荪低剂量组显著性升高（P<0.05），而后随剂量增加呈下降趋势。表2 各组大鼠血液白细胞系各项指标检测结果（略）注：（1）与正常对照组比较，P<0.05；（2）与砷中毒模型组比较，P<0.05。
2.3 血液血小板系指标
由表3可见，与正常对照组比较，PLT明显降低，P<0.05；与砷中毒模型组比较，竹荪处理组PLT持续降低，PDW、MPV呈上升趋势，差异无统计学意义。表3 各组大鼠血液血小板系各项指标检测结果（略）注：（1）与正常对照组比较，P<0.05。
3 讨论
由于砷在界分布很广，长期过量摄入可引起砷中毒，地方性砷中毒是一种严重威胁人类健康的疾病[2，3]，砷可对机体多器官、多系统造成损伤[4]。我省是地方性砷中毒的重病区，早在20世纪60年代，贵州省就发现了世界上独有的燃煤污染型砷中毒病区，病区主要分布在兴仁、兴义、安龙和织金等市、县的9个乡镇32个行政村，暴露人口约4万人，砷中毒患者2 848人[5]。
竹荪是一种珍贵的食药用真菌，含有多种活性成分，有多种维生素、微量元素及多糖，竹荪多糖系异多糖，其中多糖组分是半乳糖、葡萄糖、甘露糖和木糖[6]。多糖是具有高活性的大分子物质,它在抗肿瘤、抗凝血、抗炎症、刺激免疫以及降血糖方面都有一定的作用[7]。贵州省的竹荪资源丰富，竹荪中所含的真菌多糖具有丰富的生物活性且无毒副作用，是有开发前途的保健食品和药物资源。此次研究发现，与正常对照组比较，砷中毒模型组RBC、HCT、W?SCC、PLT显著降低，P<0.05或P<0.01；MCH、MCHC显著升高，P<0.05或P<0.01。实验结果表明，砷中毒模型组实验动物血液系统参数发生了较为明显的改变，表明血液系统可能是砷毒性作用较为敏感的靶系统。与砷中毒模型组比较，竹荪剂量组RBC、HGB、HCT呈现升高趋势，MCH呈降低趋势，MCHC随竹荪剂量升高而降低，高剂量组差异具有显著性（P<0.05），MCV、RDW?CV呈升高趋势且高于正常对照组；WBC、W?SCC、W?LCC指标呈上升趋势。W?SCR在竹荪低剂量组显著性降低（P<0.05），而后随剂量增加呈上升趋势；W?LCR在竹荪低剂量组显著性升高（P<0.05），而后随剂量增加呈下降趋势；PLT持续降低，PDW、MPV呈上升趋势。结果表明，竹荪提取液对砷所造成的血液系统损害具有一定程度的保护作用，其作用机制可能与竹荪所具有的抗氧化损伤、提高机体免疫力等作用有关 [8，9] 。
综上所述，竹荪提取液可对血液系统具有一定程度的保护作用，可减轻砷对血液系统的损伤，其作用机制有待进一步的研究。同时，应进一步深入研究竹荪的药用价值，为地方性砷中毒的防治提供新的思路和实验依据。
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