婴幼儿轮状病毒肠炎细胞免疫功能的研究
作者：张学军，刘作义，尹显贵
【摘要】 目的 探讨婴幼儿患轮状病毒(Rotavirus，RV)肠炎时机体的细胞免疫状况,为防治婴幼儿RV肠炎开辟新思路。方法 测定30例婴幼儿RV肠炎血T细胞亚群，与同期11例正常婴幼儿作对照。结果 RV肠炎患儿血中CD3+、CD4+和CD4+/CD8+比值明显低于对照组(P值分别<0.01、<0.05和<0.05)，而CD8+细胞与对照组无显著差异，CD3+、CD4+细胞在RV肠炎的重度较轻度明显减少，差异有显著性(P<0.05和<0.01)，而CD8+及CD4+/CD8+比值在各种病情中无明显差异。结论 婴幼儿RV肠炎时，细胞免疫功能受到抑制，从而使全身和局部B细胞增殖及抗体的分泌减少，降低对RV感染的保护中和作用。因此，测定CD4+、CD4+/CD8+比值可能对肠炎的预后、疗效和转归有辅助诊断价值。
【关键词】 轮状病毒肠炎;婴幼儿;T细胞亚群
[Abstract] Objective To explore the cell immunity of infants with rotavirus (RV) enteritis and lay the groundwork of new therapy for treating infants with RV enteritis.Methods The blood specimens collected from 30 infants with RV enteritis and control were measured for the level of subset of T lymphocyte.Results CD3+，CD4+ and the ratio of CD4+/CD8+ were reduced obviously in RV enteritis compared with the control(P<0.01,<0.05 and<0.05 respectively),and no difference level of CD8+ were found between RV enteritis group and control,CD3+ and CD4+ were reduced obviously in serious enteritis than light enteritis(P<0.05 and <0.01).CD8+ and the ratio of CD4+/CD8+ were no difference in ever state.Conclusion Cell immunity was suppressed and resulted in reducing the proliferation of B lymphocyte and secretion of antibody at system and local in infants with RV enteritis.It is valuable for prognosis of enteritis to measure the level of CD3+,CD4+ and the ratio of CD4+/CD8+.
[Key words] rotavirus enteritislinfant;T lymphocyte
当今世界，轮状病毒(Rotavirus，RV)胃肠炎严重威胁着婴幼儿的健康和生命。急性腹泻患儿中，有11%~71%(平均33%)由RV引起[1]。住院的婴幼儿胃肠炎约80%为RV感染所致[2]。临床中发现RV肠炎患儿有的表现重，有的表现轻;有的恢复快，有的恢复慢;有的呈无症状感染[3];导致这种情况的原因除与RV的电泳型和基因型有关外，可能还与婴幼儿机体免疫状况有关。我们通过测定RV肠炎患儿血T细胞亚群，来了解患RV肠炎婴幼儿的细胞免疫状况，以探讨RV肠炎的防治新思路。
1 对象和方法
1.1 对象 选择2008年10月至2009年3月30例RV肠炎的住院患儿，年龄6~17个月(平均8.5个月)，男18例，女12例;大便RV抗原呈强阳性反应，均符合RV肠炎诊断标准[4];且大便普通培养和致病性大肠杆菌培养均为阴性;该研究组患儿平常均健康少病，营养状况良好;以抗病毒、体液疗法为主，未用免疫制剂治疗。对照组11例均为同期同龄正常婴幼儿。
1.2 方法 于患儿患病极期，用无菌干燥抗凝瓶收集静脉血1~2 ml，在6 h内，根据免疫荧光技术的原理，应用流式细胞仪测定T淋巴细胞亚群。用Simultest IMK-Lymphocyte Softwar分析所测定细胞的百分率。所用试剂及仪器均由美国BECTON DICKINSON(BD)公司提供。
1.3 统计学处理 计量资料以均数±标准差(x±s)表示，组间比较采用t检验或χ2检验。
2 结果
研究组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+明显低于正常，差异有显著性(P<0.01、P<0.05、P<0.05);而CD8+ 与对照组差异无显著性;在研究组的不同病情中，重度病例较轻度病例的CD3+、CD4+明显减少;研究组CD3+、CD4+细胞及CD4+/CD8+比值的下降率(与同龄正常值比较)与对照组比较差异有显著性(P<0.001或P<0.05)，而CD8+与正常无差异，见表1、表2、表3。表1 研究组和对照组外周血T淋巴细胞亚群比较 表2 RV肠炎不同病情的T细胞亚群变化比较表3 研究组和对照组T细胞亚群变化率比较
3 讨论
自Bishop 1973年首次研究发现RV以来，国内外对RV病原学、RV感染流行病学及临床防治方面做了大量研究。但有关RV肠炎的机体免疫应答的研究报道较少。从临床中发现，应用一些免疫制剂对RV肠炎有一定疗效，可以减轻症状，缩短病程等[5]。
以往认为RV感染主要以体液免疫参与为主，近年来细胞免疫在RV感染中的作用日益受到重视[6]。免疫细胞除直接参与免疫应答和免疫调节外，在免疫应答过程中还可以产生各种生物活性物质，并发挥不同的生物学效应。临床测定CD3+、CD4+、CD8+ T淋巴细胞来了解机体的细胞免疫功能。CD3+细胞代表总的T淋巴细胞(Total T Lymphocyte，TTL)。CD4+代表辅助性T细胞(Helper T cell，TH)，TH1可分泌白细胞介素-2(Interleukin-2，IL-2)和干扰素(Interferon，IFN)。TH2分泌IL-4、IL-5、IL-6和IL-10，是刺激B细胞增殖和分泌抗体的重要辅助细胞，参与细胞毒作用和局部炎症反应[7]。CD8+代表抑制T细胞(Suppressor T cell，Ts)，在预防RV再感染和交叉感染中起着重要作用[8]。病毒感染时易影响CD3+、CD4+、CD8+细胞，使CD4+/CD8+比值下降，免疫调节功能紊乱，使T细胞不能有效地辅助/抑制免疫功能，导致杀伤性T细胞(Killer T cell，TK)不能发挥其细胞介导的细胞毒作用，B淋巴细胞产生抗体不足，从而影响免疫功能。本研究结果表明：婴幼儿RV肠炎时，CD3+、CD4+及CD4+/CD8+比值明显低于对照组，差异有显著性(P<0.01或P<0.05)，CD8+细胞与正常组无差异。在不同病情中，CD3+、CD4+细胞在重度腹泻病人与轻、中度腹泻病人比较下降差异有显著性(P<0.05)，与国内外报道一致[8]，而CD8+在各种病情中差异无显著性(P>0.05);在RV肠炎组中CD3+、CD4+细胞及CD4+/CD8+比值下降率与对照组比较差异有显著性(P<0.01和 0.05)，CD8+下降率与正常组差异无显著性(P>0.05)，这一结果充分说明婴幼儿RV肠炎时细胞免疫功能受到暂时和不同程度的抑制;CD3+、CD4+及CD4+/CD8+比值下降愈明显，病情愈重，恢复愈慢。CD4+下降导致CD8+相对较多，使CD4+/CD8+比值明显下降，细胞免疫功能受到抑制。这种比值的失调，使全身和局部细胞因子分泌失调和B淋巴细胞的增殖以及抗体的分泌减少，降低对RV感染的保护和中和作用。这还可能与CD4+分泌的某些细胞因子调节全身或局部细胞因子及中和抗体的分泌有关。因此测定CD4+、CD4+/CD8+比值可能对肠炎的预后、疗效和转归有辅助诊断价值。
【】
1 Korycka M.Epidemiology of rotaviral infections in children.Przegl Epidemiol,2001，55(3):275.
2 杜嗣廉,郑明新.小儿胃肠病学.北京:人民卫生出版社,1996,72.
3 Omoigberale AI,Ojukwu JO,Abiodun PO.Asymptomatic rotavirus infection within Benin City urban community,Nigeria.East Afr Med J,1996,73(10):688.
4 李梦东.实用传染病学,第2版.北京:人民卫生出版社,1998,160.
5 Hammarstrom L.Passive immunity against rotavirus in infants.Acta Paediatr Suppl,1999,88 (430):127.
6 刘仿,肖红.秋季腹泻患儿T细胞和红细胞免疫功能的观察.上海免疫学杂志,1998,18(2):114.
7 Mcneal MM,VanCott JL,Choi AH,et al.CD4 T cells are the only lymphocytes needed to protect mice against rotavirus shedding after intranasal immunization with chimeric VP6 protein and the adjuvant LT(R192G).J Virol,2002,76(2):560.
8 Araneo BA,Cebra JJ,Beuth J,et al.Problems and priorities for controlling opportunistic pathogens with new antimicrobial strategies.Zbl Bact,1996,283:413.
