汉桃叶胶囊质量标准研究

【摘要】目的  建立汉桃叶胶囊的质量控制标准。方法 采用高效液相色谱法测定该药品中反丁烯二酸的含量。结果 反丁烯二酸进样量在 0.013μg～ 0.26μg之间线性关系良好，r=0.999674。精密度测试，相对标准偏差(RSD%)=0.52%。加样回收率试验，平均回收率为98.69%（RSD=0.42%，n=5）结论 所采用的方法操作简便、快速、准确、可行性及重复性良好，能有效控制该制剂的质量。
【关键词】汉桃叶胶囊  反丁烯二酸  HPLC
        汉桃叶胶囊是由《部颁药品标准》中药成方制剂第七册收载的汉桃叶片改剂型而成，本品主要成份为汉桃叶，具有祛风止痛，舒筋活络的功效。用于三叉神经痛，坐骨神经痛，风湿关节痛。但原汉桃叶片质量标准中既没有鉴别又没有含量测定项目，为了有效控制该药品质量，我们采用高效液相色谱法测定了汉桃叶中有效成份反丁烯二酸的含量。结果表明该方法简便、重复性好，可作为该药品的质量控制方法。
        1  仪器与试药
        1.1仪器
        岛津CLC-ODS型高效液相色谱仪；Sartouris  BS124S型电子天平；KQ-3200B型超声清洗器。
        1.2试药
        乙腈、0.1%磷酸为色谱纯，其余试剂均为分析纯。
        1.3对照品
        反丁烯二酸（批号：100715-200212，供含量测定用；由中国药品生物制品检定所提供）
        2   含量测定
        2.1对照品溶液的制备  
精密称取反丁烯二酸对照品1.3mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
        2.2供试品溶液的制备  
        取本品10粒，剪破外壳，挤出内容物，取0.5g, 精密称定.加石油醚(60～90℃)50ml，搅匀，滤过，滤渣加甲醇超声溶解并转入25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
        2.3缺汉桃叶阴性溶液的制备
        取缺汉桃叶阴性样品1g，同3.2项供试品溶液制备方法制备。
        2.4测定波长的选择
        分别取反丁烯二酸对照品溶液适量，用UV-7501型紫外分光光度计进行扫描（200-250nm波长范围），结果反丁烯二酸在210nm处有最大吸收，综合文献资料，最后选择210nm为检测波长。
        2.5流动相的选择
        根据酸类成分的化学结构采用乙腈、0.1%磷酸进行分离，使用不同配比分别进行样品与对照品的定性定量比较，经过大量的筛选，删除分离度不够高的、柱效不够高的，最后选择：乙腈：0.1%磷酸(1：40)为流动相。
结果表明：以乙腈：0.1%磷酸(1：40)作为流动相，柱效最高、分离度大、无干扰、配制简便。
        2.6色谱条件  色谱柱：Shimpack  ODS柱(4.6mm×250 mm,5μm)；流动相：乙腈：0.1%磷酸 (1：40)；检测波长为210nm;流速：1ml/min；室温。理论塔板数按反丁烯二酸峰计算不低于2000。
        2.7阴性对照实验
        取不含反丁烯二酸的阴性样品，按供试品溶液制备方法制得阴性供试液，以上述色谱条件测定，结果阴性供试液与反丁烯二酸峰的相应保留时间处无吸收峰。
结果表明：汉桃叶胶囊处方中其他成分对反丁烯二酸测定无干扰。 
         
        图二: 反丁烯二酸对照品高效液相色谱图
        、
        图三: 汉桃叶胶囊 (批号: 050201 ) 高效液相色谱图
        2.8线性关系的考察
        精密称取反丁烯二酸对照品1.3ｍg，置100ml容量瓶中，加甲醇使溶解，并稀释至刻度，分别精密吸取上述溶液1ul、5ul、10ul、15ul、20ul、注入液相色谱仪。按上述色谱条件，得一系列峰面积，以反丁烯二酸的浓度为纵坐标，相应的峰面积为横坐标。得回归方程（见下图）。
         
         结果表明：反丁烯二酸进样量在 0.013μg～ 0.26μg之间线性关系良好。
        2.9系统适用性试验
        按拟定的色谱条件，用日本岛津色谱柱对汉桃叶胶囊(批号：050201)进行分析，计算理论板数。见下表