HPLC法测定复方五指柑胶囊中盐酸小檗碱的含量

　　2.7  重复性试验

    取5份同一批号样品,依供试品溶液制备方法制备并测定,每次10 μL,测定峰面积,含量分别为0.274%、0.265%、0.273%、0.271%、0.277%,平均含量为0.272%,RSD＝1.64%。表明本法重复性良好。

　　2.8  稳定性试验
   
　　取同一批号样品,按供试品溶液制备方法制备,分别在0、1、2、3、4、5、6、7、8 h进行测定,每次进样10 μL,比较峰面积,结果分别为287 882、294 712、293 151、288 945、295 062、294 328、301 690、293 207、292 426。平均峰面积为293 489.2,RSD＝1.27%。结果表明,样品制备后8 h内测定,结果均稳定,故应在8 h内完成测定。

　　2.9  回收率试验

    采用加样回收法,取同一批号已知含量的复方五指柑胶囊内容物5份,按比例添加盐酸小檗碱对照品液,按上述色谱条件测定,计算回收率,结果见表1。结果表明,本方法具有良好的回收率。 表1  盐酸小檗碱回收率试验结果（略）

　　2.10  样品测定
   
　　取3批样品,按照供试品溶液制备方法制备,每份测定3次,取平均值,计算含量。结果3批平均值为1.686 mg/粒。见表2。表2  样品中盐酸小檗碱含量测定结果（略）

　　3  讨论

　　3.1  测定波长的选择

    盐酸小檗碱对照品溶液在200～400 nm波长范围内进行光谱扫描,结果在265、347 nm波长处均有吸收,但用265 nm波长测定时有一定干扰,故采用347 nm波长检测,基线平稳,图谱杂质干扰少,重现性好。

　　3.2  流动相的选择

    曾采用乙腈-0.033 mol/L磷酸二氢钾水溶液(40∶60)、乙腈-0.033 mol/L磷酸二氢钾水溶液(30∶70)为流动相进行试验,结果后者盐酸小檗碱对照品色谱峰与其他杂质峰完全分开,达到基线分离且峰形较好,保留时间11 min左右,效果最好。

　　3.3  样品提取条件的选择

    采用正交试验法比较了超声时间、超声温度、提取溶媒对盐酸小檗碱提取率的影响,每个因素选择3个水平,以L9(34)正交表进行试验。试验结果表明,复方五指柑胶囊的最佳提取条件为盐酸-甲醇(1∶100),室温,超声提取30 min。

    本试验所用的方法操作简便,灵敏度高,重复性好,专属性强,可作为复方五指柑胶囊的质量控制方法。

【参考文献】
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　　[3] 孙文基,高 海,康阿龙.心肌炎片中黄连素的HPLC法测定[J].中成药, 1995,17(11)：11.

　　[4] 李宝明,何丽一.高效液相色谱法测定制霉灭滴胶囊中盐酸小檗碱的含量[J].药物分析杂志,2000,20(2)：128.