促渗剂对青蒿琥酯贴剂体外经皮吸收的影响

              作者：邱琳,王乃婕,杜丰,梁秉文,叶祖光

【摘要】  目的 考察几种促渗剂对青蒿琥酯体外经皮吸收的影响,为青蒿琥酯贴剂的开发提供参考。方法 采用TK-6A型透皮扩散仪,以SD大鼠腹部皮肤为透皮屏障,测定含有不同浓度促渗剂的青蒿琥酯贴剂的累计透过量和经皮渗透速率。结果 各促渗剂对青蒿琥酯促渗作用大小依次为：油酸(OA)＞N-甲基吡咯烷酮(NMP)＞丙二醇(PG)＞氮酮(Azone)＞己二酸二异丙酯(IPA)。NMP和OA的促渗作用呈浓度依赖性,IPA和PG的促渗效果不随浓度的升高而增强,处方中高浓度的IPA和PG反而会抑制青蒿琥酯的透皮吸收。结论 10%OA对青蒿琥酯的促渗作用最显著。

【关键词】  青蒿琥酯；贴剂；经皮吸收；促渗剂；大鼠

    Abstract：Objective To investigate the effect of penetration enhancers on the percutaneous absorption of artesunate, and provide a reference for the development of artesunate transdermal delivery systems. Methods Penetration enhancers (in different concentrations) were incorporated into a 25% w/w artesunate matrix patch formulation. Modified Franz diffusion chambers and SD rat abdominal skin were used for in vitro skin permeation studies, the transdermal flux and permeation rate of artesunate in vitro were determined by HPLC. Result The enhancing effectiveness of the enhancers decreased in the order：OA＞NMP＞PG＞Azone＞IPA. Skin permeation was significantly enhanced by increasing the loading concentration of OA or NMP, larger IPA amount (8%) or PG amount (20%) could inhibit the permeation of artesunate. Conclusion Oleic acid was found to be the most efficient enhancer for artesunate, 10% is the most effective concentration.

    Key words：artesunate；transdermal delivery system；percutaneous absorption；penetration enhancers；rat
 
    青蒿琥酯(Artesunate)为常用的抗疟药,在临床上对抢救和治疗脑型疟和恶性疟等疗效显著,目前研究还发现其具有平喘、治疗弓形虫病、抗肿瘤、免疫调节等作用。青蒿琥酯多采用口服、肌肉注射、静脉注射给药,由于体内代谢迅速,消除半衰期很短,临床需要多次给药,才能有效降低复燃率,给患者带来很多不便,而透皮贴剂可以避免这些不利因素。本研究考察了不同促渗剂对青蒿琥酯透皮行为的影响,为青蒿琥酯透皮贴剂的研究和开发奠定基础。

　　1  材料

　　1.1  动物

    SD雄性大鼠,体重200 g左右,北京维通利华实验动物技术有限公司。

　　1.2  药物和试剂

    青蒿琥酯,批号061118,重庆华立武陵山制药有限公司；聚丙烯酸酯压敏胶(国民淀粉5号,美国国民淀粉公司提供)；氮酮(Azone,药用,湖北南星化工总厂)；油酸(OA,药用,德国APPLICHEM)；丙二醇(PG,药用,云南省玉溪市天山化工有限公司)；己二酸二异丙酯(IPA,国际特品公司提供)；棕榈酸异辛酯(IOP,国际特品公司提供)。甲醇为色谱纯,水为自制超纯水,其他试剂均为分析纯。

　　1.3  仪器

    涂布机(T2000L)；改良Franz扩散池(TK-20A)；安捷伦高效液相色谱仪(Agilent 110)。

　　2  方法与结果

　　2.1  贴剂的制备

    称取处方量丙烯酸酯类压敏胶,按处方量加入青蒿琥酯及促渗剂,混匀搅拌,真空脱气。控制涂布厚度为0.7 mm,使含药压敏胶均匀涂布在保护膜上,在50 ℃下干燥60 min,冷却后压覆背衬膜,备用。

　　2.2  贴剂的体外经皮渗透试验

　　2.2.1  离体皮肤的制备 

　　SD大鼠脱颈处死,剃除腹部皮肤毛,剥取腹部皮肤,小心去除皮下组织,生理盐水清洗后,用保鲜膜包好,置冰箱冷冻保存备用。

　　2.2.2  透皮试验 

　　将预处理皮肤置于扩散室与接受室之间(角质层面向扩散室),在角质层表面贴上药贴,固定好。在接收室中加入20%乙醇生理盐水约6 mL,液面恰与皮肤内层接触,开动电磁搅拌器(约400 r/min)和恒温维持在(37±0.5)℃,在设定的时间(2、4、6、8、24 h)取样,每次取完,补充相同体积的新鲜接收液。样品0.45 μm微孔滤膜过滤,用紫外分析方法检测浓度,计算累计透过量：Q＝[Cn×V＋∑C(n-1)×V]/A。

    Q：单位面积累积释放量；V：接收液体积；A：扩散池口面积；Cn：第n次取样的浓度。

    以药物稳定透过皮肤时的累积透过量Q对时间t线性回归所拟合直线的斜率即为经皮渗透速率(dQ/dt)μg/(cm2·h)。

　　2.3  接收液样品处理和检测方法的建立[1-2]

　　2.3.1  色谱条件 

　　色谱柱：Kromasil C18(250 mm×4.6 mm,
5 μm)；流动相：乙腈-0.01 mmol/L KH2PO4(48∶52,稀磷酸调pH值至3.0)；流速：1.0 mL/min；检测波长：210 nm；柱温：25 ℃。在该条件下青蒿琥酯与其他成分能达到基线分离,色谱图见图1。