木蝴蝶药材中黄芩素和白杨素的含量测定
作者：仝会娟,张强,康琛,李曼玲
【摘要】 目的 建立木蝴蝶中黄芩素和白杨素的含量测定方法,为木蝴蝶的质量标准研究提供参考。方法 回流提取法获得供试品溶液,高效液相色谱法测定其含量。色谱条件：Kromasil-C18(5 μm,250 mm×4.6 mm)；流动相：甲醇-乙腈-水-冰醋酸(25∶25∶50∶0.2)；流速：1 mL/min；检测波长：275 nm；柱温：室温。结果 黄芩素和白杨素二者分离度和线性关系良好；RSD分别为1.53%和1.35%,表明重复性良好；回收率平均值分别为101.7%和103.0%,RSD分别为1.85%和1.59%,本方法回收率良好。结论 本方法简单可行,重复性好,能够为木蝴蝶质量控制提供参考数据。
【关键词】 木蝴蝶；黄芩素；白杨素；高效液相色谱法；含量测定
Abstract：Objective To establish a HPLC method of determining chrysin and baicalein in Senmen Oroxyli. Method The contents of chrysin and baicalein were determined by HPLC. The chromatographic conditions were：Kromasil-C18 column (5 μm, 250 mm×4.6 mm), with methanol-acetonitrile-water-glacial acetic acid (25∶25∶50∶0.2) as the mobile phase, at the flow rate of 1 mL/min, the detecting wavelength at 275 nm and at the room temperature. Results The contents of baicalein and chrysin could be detected by this HPLC method, and got good separation and good linear relationship. RSD were 1.53% and 1.35%, indicating good repeatability, recovery RSD were 1.85% and 1.59%, indicating a good recovery. Conclusion The method is simple, feasible and repeatable, and can be provide reference for quality control of Senmen Oroxyli.
Key words：Senmen Oroxyli；chrysin；baicalein；HPLC；content determination
木蝴蝶Senmen Oroxyli为紫葳科植物木蝴蝶Oxoylum indicum(L.) Vent.的干燥成熟种子。自1963年版《中华人民共和国药典》就开始收载。木蝴蝶味苦、甘,性凉,入肺、肝、胃经,有清肺利咽止咳、舒肝和胃之功效,主治肺热咳嗽、喉痹、音哑、肝胃气痛、疮口不敛。药理研究表明,木蝴蝶有抗炎、抗诱变、抗菌、抗癌及止咳作用。木蝴蝶的化学成分主要为黄酮及其苷类,还含有对羟基苯乙醇类、紫檀碱类化合物,并且从中发现挥发油类物质。到目前为止,对木蝴蝶的质量控制方面大多只有对黄芩苷的含量测定。本试验采用高效液相色谱(HPLC)法,同时对其中的白杨素和黄芩素进行了含量测定,以期对木蝴蝶的研究提供参考。
1 仪器与试药
HP1100 HPLC仪：G1314A紫外检测器,G1310A单泵,G1314A手动进样器,G1316A柱温箱,G1322A在线形脱气机,Agilent Chem-station色谱工作站；KQ-100型超声清洗器。
黄芩素(批号0732-9604)和白杨素对照品(批号110713- 200690)均购自中国药品生物制品检定所,供含量测定用。甲醇为色谱纯,其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱：Kromasil-C18(5 μm,250 mm×4.6 mm)；流动相：
甲醇-乙腈-水-冰醋酸(25∶25∶50∶0.2)；流速：1 mL/min；检测波长：275 nm；柱温：室温。色谱图见图1。
2.2 供试品溶液的制备
取本品粉末0.5 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入乙酸乙酯50 mL,称定重量,加热回流2 h,过滤,滤液蒸干,加甲醇定容至5 mL容量瓶中,过0.45 μm滤膜,取续滤液,即得供试品溶液。
2.3 对照品溶液的制备
精密称取黄芩素和白杨素对照品适量,加甲醇制成每1 mL含0.094 mg黄芩素和0.080 4 mg白杨素的溶液,即得对照品溶液。