乌梅对308株临床菌株的抑菌效果
作者：李仲兴,王秀华,赵建宏,杨敬芳,李继红
【摘要】 目的 观察乌梅对临床菌株的抑菌效果。方法 采用琼脂稀释法,对乌梅进行308株临床菌株的抑菌活性检测。 结果 乌梅对112株金黄色葡萄球菌、112 株表皮葡萄球菌和28株肠球菌的MIC50分别为0.72、1.44、0.72 mg/mL；其MIC90分别为1.44、1.44、0.72 mg/mL。对肺炎克雷伯菌和大肠杆菌的MIC90分别为2.88、1.44 mg/mL。结论 乌梅对革兰阳性球菌和某些革兰阴性杆菌均有较好的抑菌活性。
【关键词】 乌梅；金黄色葡萄球菌；表皮葡萄球菌；肠球菌；大肠杆菌；琼脂稀释法
Abstract：Objective To observe antibacterial efficiency of Prunus mume Sieb et Zucc against clinical isolates. Method Antibacterial activity of Prunus mume Sieb et Zucc against 308 strains of clinical isolates were determined by agar dilution method. Results MIC50 of Prunus mume Sieb et Zucc against staphylococcus aureus (112 strains), S.epidermidis (112 strains), and Enterococci (28 strains) were 0.72, 1.44, 0.72 mg/mL, and MIC90 were 1.44, 1.44, 0.72 mg/mL respectively. The MIC90 of Prunus mume Sieb et Zucc to Klebsiella pneumoniae and E. coli were 2.88, 1.44 mg/mL respectively. Conclusion Prunus mume Sieb et Zucc has good antibacterial activity against Gram positive cocci and some Gram negative bacilli.
Key words：Prunus mume Sieb et Zucc；staphylococcus aureus；S.epidermidis；enterococci；E. coli；agar dilution method
乌梅抗菌作用有许多报道,1959年山东医学院微生物教研组报道,50%乌梅水煎剂对金黄色葡萄球菌有抑制作用[1]；1960年中国医学科学院药物研究所[2]报道,100%乌梅水煎剂对金黄色葡萄球菌的抗菌作用最强；1960年重庆医学院第一附属医院[3]报道,100%乌梅水煎剂对金黄色葡萄球菌无抑菌作用；赵氏等[4]报道；乌梅对脑膜炎球菌的抑菌环为20 mm；1992年周氏等[5]报道；乌梅对淋球菌的抑菌环为17～26 mm；1993年又报道对小肠结肠炎耶氏菌的抑菌环为≥27 mm[6]。上述报道大多为定性实验,一般使用1株菌株,所使用培养基也多为营养琼脂,所以其结果往往缺乏代表性。为此,我们采用琼脂稀释法,对乌梅进行308株临床菌株的抗菌作用检测。现报道如下。
1 实验材料
1.1 仪器
微量多点接种仪,北京医科大学昆仑药物发展研究所生产。
1.2 培养基
Mueller-Hinton琼脂(美国BD公司,BBL,简称M-H琼脂)。
1.3 药物
乌梅购自河北省药材公司。先将乌梅按常法做成煎液,即100 g乌梅文火煎后做成200 mL煎液(为50%乌梅煎液),备用。
1.4 菌种
从本院临床患者的血液、尿液、脓汁、痰等标本分离的菌株共308株,其中金黄色葡萄球菌112株,表皮葡萄球菌112株,肠球菌28株,肺炎克雷伯菌和大肠杆菌各28株。均按标准予以鉴定[7]。
2 实验方法
采用琼脂稀释法对乌梅进行定量抗菌实验。
2.1 药液稀释
排列无菌中试管10只,于2～10只管中加无菌蒸馏水10 mL,取50%(1∶2)乌梅水煎液20 mL,于第一管加入10 mL,第2管加入10 mL,于第2管混合后取出10 mL,加入第3管,再混合后取10 mL放入第4管,如此连续稀释至第9管取出10 mL弃掉。第10管只有无菌蒸馏水作对照。这样1～9管中含有不同浓度药液各10 mL。
2.2 含药平板制备
将已溶化的无菌M-H琼脂900 mL分装于10瓶,每瓶90 mL,将第1管含10 mL 50%的乌梅水煎液放入含90 mL培养基的瓶中,混合后倾注4个平板,每个平板含25 mL含药琼脂,第2管以后的平板制备同第1管,凝固后备用。这样第1组的琼脂平板实际含乌梅5%(1∶20),第2组为1∶40,第3组为1∶80。
含药培养基的药物浓度计算：将一定量(50 mL或100 mL)、一定比例(1∶2或1∶4)的原药材水煎液于37 ℃温箱中烘干,称重,求出每1 mL水煎液的实际重量,就可算出每1 mL培养基中水煎药液干重量。如每100 mL 50%乌梅煎液干重为11 500 mg,第1组每100 mL含药培养基含有煎液10 mL,那么每1 mL培养基含煎液干重则为：11500×10＝11.5(mg)
100 100
所以第1组含药培养基实际含煎剂干重为11.5 mg/mL,因倍量稀释,故第2组含药培养基为第1组数被2除即可。乌梅水煎剂即：1∶20＝11.5 mg/mL,1∶40＝5.75 mg/mL,1∶80＝2.88 mg/mL……。