痛清颗粒中芍药苷与葛根素的提取工艺研究

　　2.2.2  葛根素 

　　色谱条件：Lichrospher C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),Waters 515高效液相色谱仪；2487双波长紫外检测器；检测波长λ=250 nm；流动相为甲醇-水(25∶75)；流速为1.0 mL/min；0.5 AUFS；柱温30 ℃；进样量为5 μL。分别配制不同浓度的葛根素对照品溶液,在上述色谱条件下进行测定,以葛根素进样量(X)对峰面积(Y)进行线性拟合,回归方程为：Y=22 670 000X+15 521.725,r=0.999 9,结果在0.10～41.1 μg范围内线性关系良好。

　　2.3  水提样品处理与测定

    取水提正交设计所得样品,分别用测定芍药苷和葛根素的流动相稀释不同的倍数,充分振摇,高速离心处理,上清液用0.2 μm的微孔滤膜过滤,所得样品分别在上述测定芍药苷和葛根素的色谱条件下进行测定。

　　2.4  数据分析及实验结果

    对正交试验测定的数据进行极差和方差分析,结果见表2、表3。表2  痛清颗粒的正交试验数据极差分析表（略）注：综合评分(%)=芍药苷转移率×50%+葛根素转移率×50%。表3  痛清颗粒的正交试验数据方差分析表（略）注：F(2,2)0.05=19.0。
   
　　从表2极差分析结果可知,因素影响C>B>A,但3因素3个水平之间均无显著性差异(由表3可知)。由极差分析得出的最佳工艺组合是A3B1C3,即加水量为药材用量26倍,提取3次,第1次1.0 h,第2、3次每次各0.5 h,3次的加水量分别为14、6和6。而表2中最佳的实验组合是A2B2C3,芍药苷和葛根素的转移率均在90%以上,即加水量为22倍量,提取3次,分别提取1.5、1.0、0.5 h。对A3B1C3和A2B2C3进行重复实验,结果表明,两种有效成分的转移率均在85%以上,考虑到生产实际,选择最佳的提取工艺条件是A2B1C3。

　　3  小结
   
　　提取时间是影响中成药生产中中药药效成分浸出的一个重要因素,一般认为长时间加热会破坏有效成分。本实验发现,多次短时间连续提取对芍药苷、葛根素的浸出有利,时间延长导致转移率下降。证明芍药苷与葛根素受热不稳定,易发生水解等化学反应,不宜长时间加热。
　　

【参考文献】
  　[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].北京：化学工业出版社, 2005.68,273.

　　[2] 张晓燕,王金辉,李 铣.白芍的化学成分研究[J].沈阳药科大学学报, 2001,18(1)：30.