醉鱼草不同部位提取物对实验性创面愈合作用的实验研究

                   作者：侯小涛，周丽霞，吴燕华

【摘要】  　　目的观察醉鱼草不同部位提取物对动物实验性烧伤创面愈合的影响。方法采用醉鱼草不同部位的水提取物和醇提取物配以油包水型基质做成药膏，对家兔Ⅱ°烧伤模型进行皮肤刺激性实验和治疗实验，其中皮肤刺激性实验以红斑、水肿及轻度焦痂作为参考指标；治疗实验以结痂率、愈合率、结痂时间和愈合时间作为参考指标，分别观察其愈合情况。结果醉鱼草不同部位的水提取物、醇提取物及基质对家兔皮肤均无刺激性（F﹤0.5）；醉鱼草茎水提取物和醇提取物配制的药膏对Ⅱ°烧伤家兔创面愈合表现出明显的效果（P﹤0.05）。而叶的水提取物和醇提取物配制的药膏无明显效果。结论醉鱼草茎提取物对Ⅱ°烧伤家兔表现出一定的促进创面愈合的作用。

【关键词】  醉鱼草； 水提取物； 醇提取物； 创面愈合

　　烧伤一般是指由于热力如沸水 (水、油、汤)、炽热金属 (液体或固体)、火焰、蒸气和高温气体等所致的体表组织损害；轻者皮肤肿胀，起水泡，疼痛；重者皮肤烧焦，甚至血管、神经、肌腱等同时受损；呼吸道也可烧伤。严重烧伤后发生失控性炎症反应，大量炎症介质的生成和释放在烧伤早期脏器损伤中扮演了重要角色［1］ 。炎性介质持续或过多地释放可引起全身多种炎性效应、细胞活化及凝血系统和补体系统激活，这种失控的炎症反应可以损伤血管内皮和远隔器官［2］。而且烧伤引起的剧烈疼痛和皮肤渗出等因素能导致休克，晚期出现感染、败血症，危及生命。因此，烧烫伤的治疗应首先缓解皮肤症状，促进皮肤愈合。
   
　　近年来中草药外治烧伤取得了较大的进展，许多外用中药的效果更为突出。治疗烧伤的外用剂型有膏剂、油剂、酊剂、糊剂、粉剂等多种形式 ［3，4］。醉鱼草Buddleja lindleyana Fort.为马钱科醉鱼草属植物，药用全草。《本草纲目》中有记载，常用于治疗烧烫伤、皮肤瘙痒、湿疹、皮炎、牛皮癣、痒疮、疥疮、漆疮等疾病［5］。醉鱼草主要含有柳杉二醇( Ⅰ) 、桃叶珊瑚苷( Ⅱ) 、半乳糖醇( Ⅲ)、胡萝卜苷( Ⅳ) ［6］、香草醛（vanllinⅠ）、香草酸（vanllinⅡ）、洋丁香酚苷（acteosideⅢ）、异洋丁香酚苷（acteosideⅣ）等成分，化学成分的类型较多，并具有抗炎、杀死钉螺、增强免疫等活性［7～9］。醉鱼草为一种对烧伤具有确切疗效的特色瑶药，在民间具有广泛的药用价值，但对其治疗烧伤、消除疤痕的机理未见报道。本研究初步构建家兔的烧伤模型，通过动物实验，初步考察了醉鱼草不同部位提取物对实验性创面的愈合作用，为进一步确定其有效成分，开发治疗烧伤的新药提供研究基础。

　　1  材料与仪器

　　1.1  动物家兔(新西兰大耳兔)，♀♂兼取，体质量1.9～2.3 kg/只，购于中医学院动物中心。

　　1.2  药品与试剂美宝湿润烫伤膏（汕头市美宝制药有限公司，产品批号：20050205。）；脱毛剂（10%硫化钠  中国南江区宣治化工厂生产  批号 031106）；麻醉剂（戊巴比妥钠  上海国药集团化学试剂有限公司生产者 批号 WS20050411）；95%乙醇（上海试一化学试剂有限公司  批号0060829  GB-679-80）；无水乙醇（广西师范学院化学试剂厂生产  批号：050619）；纯水：（优普系列超纯水机制取）；单硬脂酸甘油脂：（广东 汕头市西陇化工厂 批号：050422-2）；Span80 (上海申宇医药化工有限公司  批号：050306m)；甘油：（浙江凤凰化工股份有限公司生产 批号020008  南昌白云医药化工有限公司分装 分装批号：030103）；蓖麻油：（南名华鑫化工有限公司）；生理盐水 （自制）。醉鱼草叶水提取浸膏；醉鱼草叶醇提取浸膏；醉鱼草茎水提取浸膏；醉鱼草茎醇提取浸膏。

　　1.3  仪器优普系列超纯水机（成都超纯水科技有限公司  型号：upk-11-20  编号：06080361）；旋转蒸发仪 （上海亚荣生生化仪器厂  型号：RE-52AA）；中药打粉机  （浙江温岭市奥力药材器械厂 型号：AK400A）；电热恒温水浴锅 （北京意成科技有限公司  型号：DGSY-11）；电炉  （天津市泰斯特仪器有限公司）；天平 （上海精科天平  型号：HC-TP11-1）；剪刀、手术刀片、兔台、棉球等。

　　2  方法

　　2.1  浸膏的提取

　　2.1.1  水提浸膏的提取分别取叶200 g和茎600 g加入10倍左右的纯水，煎煮40 min，冷却，过滤。滤渣再加水适量煎煮3次，过滤，合并所得滤液浓缩制得浸膏分别为134.1 g和61.3 g，得膏率分别为67.1% 和15.3%，冰箱4℃保存。

　　2.1.2  醇提浸膏的提取分别取叶1 000 g和茎600 g加入10倍的95%乙醇，水浴回流2 h冷却，过滤，滤液备用，滤渣再加乙醇适量回流3次，每次1.5 h，合并所得滤液，浓缩制得浸膏分别为261.5 g和66.36 g，得膏率分别为26.2%和11.1%，冰箱4℃保存。

　　2.2  基质的选配见表1。根据用于皮肤药膏基质的要求：安全，对皮肤无刺激性，有一定的湿度，有较好的附着性等进行基质的选配实验。结果表明，试验方案5所配制的基质细腻油滑，且水洗即可洗干净，符合皮肤外用条件，是比较理想的基质，故按照方案5将醉鱼草不同部位提取物配制成药膏进行动物实验。表1  基质选配方案（略）

　　2.3  皮肤刺激性实验

　　2.3.1  动物分组取家兔9 只，体质量2.20～2.50 kg，随机编号，每只从脊椎两侧上下各取两部位共分为4个部位，共36个部位。按随机平均把36个部位分为6个组：空白对照组、基质组、醉鱼草叶水提物组、醉鱼草叶醇提物组、醉鱼草茎水提物组、醉鱼草茎醇提物组。

　　2.3.2  动物造模及实验方法在动物背部两侧用10%硫化钠脱毛，去毛面积两侧各为2 ㎝×2 ㎝；分别取一定量的醉鱼草叶水提物，醉鱼草叶醇提物，醉鱼草茎水提物，醉鱼草茎醇提物作为给药组，基质和生理盐水作为对照组。按组涂药，给药 24 h 后，用温水洗去残留药物，分别在去除药物后第1，24，48小时观察给药部位有无红斑及水肿，按表2，表3评分，并评价刺激强度。结果见表4。

　　2.4  烧伤实验

　　2.4.1  动物分组取家兔12 只，雌8只雄4只，体质量1.95～2.20 kg，随机编号，每只从脊椎两侧上下各取两部位共分为4个部位，共48个部位。按随机平均把48个部位分为6个组：空白对照组，阳性药美宝组，醉鱼草叶水提物药膏组，醉鱼草叶醇提物药膏组，醉鱼草茎水提物药膏组，醉鱼草茎醇提物药膏组。