地锦草不同萃取部位体外抗真菌作用研究

　　1.6.4 结果判定 皮肤癣菌,26 ℃孵育7～14 d读结果。念珠菌,36 ℃孵育48 h读结果。读取MIC值时,应在不搅动的情况下与对照孔按下列标准比较。0：肉眼清晰;1：略模糊(80%受抑制);2：浊度显著减低(50%受抑制);3：浊度轻度减低;4：浊度未减低。本试验药物取1或2为判定终点。

　　1.6.5 质量控制 按照NCCLS方案,对近平滑念珠菌XYZ 5001进行反复测定,其两性霉素B的MIC值0.5～4.0 μg/mL,氟康唑的MIC值1.0～4.0 μg/mL,5-氟胞嘧啶的MIC值0.12～0.5 μg/mL。

　　每次试验以此菌株为对照,只有当其MIC值介于其质控范围之内时,方认为试验操作准确可靠。且只有当生长对照孔生长良好,空白对照无生长,其他孔随药物浓度升高,呈现真菌生长梯度受抑制时,方证明试验成功。

　　2 结果

　　(见表1)

　　表1 地锦草不同萃取部位和TBF抗真菌药物敏感性试验结果注：1.地锦草石油醚萃取部位;2.地锦草氯仿萃取部位;3.地锦草

　　3 讨论

　　地锦草是维吾尔医常用药材,临床主要用其复方百癣夏塔热(由地锦草、诃子肉、毛诃子肉、司卡摩尼亚酯、芦荟、西青果药材组成)治疗手癣、体癣、足癣、花斑癣、银屑病等皮肤疾病[5]。地锦草主要含有黄酮、三萜、香豆素、甾醇、鞣质及酚酸类等化合物[6]。药理研究表明,地锦草及其复方具有抗菌、抗炎、抗过敏、免疫调节、抗氧化、保肝、止血及解毒等多种作用[7-11]。

　　本研究通过不同极性溶剂萃取分离的方法将地锦草主要化学组分分成几部分,通过体外药敏试验筛选,验证其不同萃取部位体外抗真菌活性。结果发现,地锦草4个不同萃取部位中,由于分离后的石油醚和氯仿部位在药敏试验中的溶解度甚小,不能很严谨地读出药敏结果,正丁醇及水部位对皮肤癣菌有明显的抑制作用,其强度正丁醇部位>水部位。本研究将中药化学提取分离手段与药理试验密切结合,方法快捷、简捷,结果可靠,初步完成了地锦草不同部位的分离与体外药敏检测,为进一步研究其抗真菌有效单体及作用机制奠定了基础。

【参考文献】
  　[1] 买买提明?沙比尔,乌兰?阿尔甫.维吾尔药材标准(上册)[S].乌鲁木齐：新疆科技卫生出版社,1993.99.

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　　[3] 古力娜?达吾提,尤丽吐孜,艾则孜?亚森,等.维药地锦草软膏的体外抗真菌及其对豚鼠皮肤真菌感染的治疗作用研究[J].中药药理与临床, 2007,23(5)：178-180.

　　[4] National Committee for Clinical Laboratory Standards. Reference Method for Broth Dilution Antifungal Susceptibility Testing of Filamentous Fungi. Approved Standard (M38-A)[S].USA,2002.

　　[5] 亚森?吐尔逊,哈木拉提,张彦福,等.中华人民共和国卫生部药品标准——维吾尔药分册[S].乌鲁木齐：新疆科技卫生出版社,1999.124.

　　[6] 柳润辉,孔令义.地锦草脂溶性成分研究[J].天然产物研究与开发, 2005,17(4)：437-439.

　　[7] 谭 红,刘 伟.地锦草总黄酮的体外抑菌试验[J].中国兽医医药杂志, 2007,26(4)：5-6.

　　[8] 陈福星,陈文英,褚景生,等.地锦草水煎液对小鼠IFN-γ的影响[J].中国兽医杂志,2007,43(4)：46-47.

　　[9] 曹瑞珍,魏永春,张国文,等.地锦草总黄酮对D-半乳糖衰老模型小鼠抗氧化作用的研究[J].卫生研究,2007,36(3)：387.

　　[10] 阿不都热依木,阿不都艾尼,哈木拉提,等.五种维吾尔药的清除羟自由基及抗DNA损伤作用研究[J].中草药,2001,32(3)：236-238.

　　[11] 曹瑞珍,魏永春,强 欣,等.地锦草总黄酮预防四氯化碳所致急性肝损伤的实验研究[J].时珍国医国药,2007,18(1)：85-86.