消痤饮提取工艺的研究
2.4总黄酮含量测定
2.4.1测定波长的选择精密称取芦丁对照品适量，加60%(体积分数)乙醇使其溶解，制成质量浓度为0.2 mg·mL-1的对照品溶液。精密吸取对照品溶液4 mL于25 mL容量瓶中，加入蒸馏水6 mL，加5%(质量浓度)NaNO2溶液1 mL，混匀，放置6 min，加10%(质量浓度)Al(NO3)3溶液1 mL，摇匀，放置6 min，加4%(质量浓度)NaOH溶液10 mL，再加蒸馏水至刻度，摇匀，放置15 min。精密移取“2.2”项下供试品溶液1 mL至25 mL容量瓶中，同法显色。采用紫外-可见分光光度法进行全波长扫描，对照品、供试品溶液均在506 nm处有最大吸收，故选择506 nm为测定波长。
2.4.2标准曲线的制备[3]分别精密吸取对照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL于25 mL容量瓶中，按“2.4.1”项下方法显色，于506 nm测定吸光度，以芦丁对照品质量浓度(ρ)为横坐标，吸光度(A)为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程为A=9.3773ρ-9.1×103，r=0.999 5，线性范围为7474 ~44.844 μg·mL-1。
2.4.3含量测定精密吸取“2.2”项下供试品溶液1 mL，至25 mL容量瓶中，按“2.4.1”项下方法显色，于506 nm测定其吸光度，计算总黄酮的含量，见表2。方差分析见表3、4。表2正交试验结果与直观分析表3提取率方差分析表表4总黄酮含量方差分析表由表2、3可知，对提取物得率而言，因素B、D的影响具有统计学意义，因提取2次后杂质含量少于提取1次后的杂质含量，故选择较优方案为A2B3C2D2。由表2、4可知，对总黄酮含量而言，因素C、D的影响具有统计学意义，结合节能方面考虑，其较优的方案为A1B1C2D2。2个方案中C2、D2是共同选项。而因素B对总黄酮含量的影响无显著性，从提高提取物得率的角度出发应选择B3;因素A对2个测定指标的影响均无意义，故从简化工艺角度考虑选择A1。因此最佳提取工艺为A1B3C2D2，即浸渍时间为0.5 h，溶媒用量为13倍，煎煮次数为2次，醇沉体积分数为60%。
2.6验证试验
按最佳工艺条件平行提取3份样品，提取物得率分别为20.21%、19.82%、20.40%，RSD为1.47%;总黄酮质量分数分别为5.70、5.84、5.59 mg·g-1，RSD为2.19%。
3讨论
本试验通过对不同提取条件下消痤饮的提取物得率、总黄酮含量综合进行评定，发现溶媒用量、提取次数、醇沉体积分数是影响提取的关键因素，而浸渍时间影响较小。确定的最佳工艺条件为：浸渍时间为0.5 h，水用量为13倍，煎煮次数为2次，醇沉体积分数为60%。按此条件进行验证试验，结果表明该工艺稳定可行。
在实验过程中，发现醇沉时间对提取结果亦有影响，将在今后工作中作进一步探讨。
【参考文献】
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