高效液相色谱法测定芎钩天麻丸中芍药苷的含量
来源：岁月联盟
时间：2015-10-12
【关键词】 芎钩天麻丸；含量测定；芍药苷；高效液相色谱法
[Abstract] Objective To establish a HPLC method for the determination of Paeoniflorin in xionggoutianma pills. Methods The chromatographic system consisted of C18 column,using Acetonitrile -0.1% Phosphate (14：86) as mobile phase.The content was detected at a waveleng of 230nm,the flow rate was 0.6ml•min-1 .Results The Paeoniflorin have a good tincar rolatim in the range of0.0433～0.6938μｇ（r=0.9999）,the average recovery was 98.94%，RSD=0.36%（n=6）. Conolusion The established method is accuracy ,sensitive and simple.It can be used for quality control of xionggoutianma pills.
[Keywords] xionggoutianma pills; Chlorogenic acid; content determination; HPLC
芎钩天麻丸是由川芎、钩藤、当归、石决明、桑寄生、细辛、珍珠母、黄芩、白芍、天麻等14 味药材加工制成的医院制剂，具有滋肾平肝、潜阳熄风、除晕止痛、降血压之功效，主治肝阳上亢、血虚失养引起的高血压，紧张性、血管性神经性头疼、头晕[1]。白芍为方中君药，芍药苷为白芍的主要有效成分，具有扩张血管、保护脑缺血、抗血栓、抗血小板聚集、抗高血脂等作用，对芎钩天麻丸疗效的发挥起重要作用。现行质量标准中未收载含量测定项目，不能有效的控制药品质量。本文以芍药苷为指标成分，建立了测定芎钩天麻丸中芍药苷的高效液相测定法，为该制剂的质量控制提供了客观的含量评价方法。
1 仪器与试药
1.1 仪器
Agilengt 1260高效液相色谱仪，AUW-220 D电子分析天平 DSQ10260超声仪。
1.2 试药
芍药苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号:110736-201035）；乙腈为色谱纯，水为本单位自制重蒸馏水，其余试剂为分析纯。芎钩天麻丸由柘城县人民医院提供。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱：Agilengt Eclipse Plus-C18色谱柱(4.6×100 mm)
流动相：乙腈-0.1%磷酸（14：86）为流动相[2]；流速0.6 ml•min-1；检测波长230 nm；进样量10 μl；理论板数按芍药苷峰计算应不低于3000[3]。
2.2 线性关系考察
取黄芩苷对照品约12.0 mg，精密称定，置25 ml棕色量瓶中，加甲醇适量，振摇使完全溶解后，稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。按照“2.1”项色谱条件，分别进样1、3、5、7、9、11、13、15、17 μl，记录芍药苷峰面积值，以峰面积积分值（Y）对对照品浓度（X）进行线性回归，得回归方程： Y=235.05674X+12.52003 r=0.9999。结果表明，黄芩苷对照品在0.4800～8.1600 μｇ范围内与峰面积值呈良好的线性关系。
2.3 供试品溶液及阴性对照溶液的制备
取本品约0.1 g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25 ml，称定重量，浸泡4 小时，超声处理20 分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，用0.45 um微孔滤膜滤过，续滤液作为供试品溶液。另取缺白芍的其他味药按处方工艺制成阴性制剂，按上述方法制备阴性对照溶液。
2.4 干扰试验
取对照品溶液、供试品溶液及阴性对照溶液各10 μl，按照“2.1”项色谱条件，分别进样测定，记录色谱图，黄芩苷的保留时间为8.818 min，理论塔板数为3512，黄芩苷与相邻峰的分离度大于1.5，峰型对称。阴性样品无干扰，结果见图1。
C阴性对照溶液
图1 高效液相色谱图