正交试验法优选壮腰膝五味药材组方提取工艺研究

       2.3 总黄酮含量的测定方法
        2.3.1 对照品溶液制备
        精密称取芦丁（批号100080-200707，购于中国药品生物制品鉴定所）5.1 mg，加甲醇溶解并定容至100 mL，即得0.051 mg/mL。
        2.3.2 标准曲线的制备
        吸取芦丁标准溶液：0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL 于10 mL 比色管中，加甲醇至刻度，摇匀，于波长360 nm 比色。求得回归方程，Y=31.29X+0.0018 R2 = 0.9997，计算试样中总黄酮含量。
        2.3.3 供试品溶液的制备
        称取一定量的试样(大约0.5 g)，加乙醇定容至25 mL，摇匀后，超声提取20 min，放置，吸取上清液1.0 mL，于蒸发皿中，加1g 聚酰胺粉吸附，于水浴上挥去乙醇，然后转入层析柱。先用甲苯洗，甲苯液弃去，然后用甲醇洗脱黄酮，定容至25 mL。此液于波长360 nm 测定吸收值。计算试样中总黄酮含量。
        3 结果
        见表2。
        4 结果分析
        影响因素大小顺序为C>A>B，即提取为最重要，其次为含醇量。
        5 讨论
        ①中药复方常含多种药材，若以某个药材的成分为标准考察提取工艺则不能反映全面，故多选用总成分做标准。但单一成分也不能全面反映，建议选取几种总成分综合评定。
        ②实验室正交设计研究时与生产存在差别，一般实验室提取更完全，出膏率高，有效成分含量略高；生产应根据情况进行调整。
参考文献
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