滋阴补肾丸对广防己减毒作用的初步研究

　　2.4  标准曲线的制备

    　精密吸取对照品储备液1、2、3、4、5、6 mL,分别置10 mL的量瓶中,用无水乙醇稀释至刻度。按“1.4”项下的色谱条件,依次进样测定,测得AA-Ⅰ的峰面积。以AA-Ⅰ的进样量(μg)为横坐标,以对应的峰面积为纵坐标,绘制标准曲线。由标准曲线可知,在0.08～0.40 μg之间,进样量与峰面积之间呈良好的线性关系,回归方程为：Y＝1.7×105X＋5 248,r＝0.999 9。

　　2.5  精密度试验

  　  精密吸取对照品溶液10 μL,按“1.4”项下的色谱条件,注入液相色谱仪,测定对照品溶液的峰面积,平行测定5次。结果RSD＝0.45%,表明精密度良好。

　　2.6  稳定性试验

  　  按“1.4”项下色谱条件,精密吸取10 μL供试液1,注入液相色谱仪,测定,然后于2、4、8、12、24 h各测定1次,结果RSD＝0.10%,表明供试品溶液在24 h内测定结果稳定。

　　2.7  重复性试验

  　  取广防己样品0.6 g,精密称定,共称取5份,照“2.2.1”项下操作,制成供试品溶液。在“1.4”项下的色谱条件下,分别精密吸取供试品溶液各10 μL,注入液相色谱仪,测定,计算AA-Ⅰ的质量。结果RSD＝0.78%,表明重复性良好。

　　2.8  加样回收率试验

   　 取0.2 mL供试液1,用无水乙醇定容为1 mL,作为供试液3。取0.2 mL供试液1,加入标准溶液0.15 mL,用无水乙醇定容为1 mL,作为供试液4。取标准溶液0.15 mL,用无水乙醇定容为1 mL,作为供试液5。取以上各供试液10 μL,按“1.4”项下色谱条件测定,结果回收率为(99.5±0.5)%,RSD＝0.5%。

　　2.9  马兜铃酸A对照品的定量分析
   
　　分别取供试液1、2,按“1.4”项下色谱条件测定并计算各样品中AA-Ⅰ的含量。结果表明,广防己与滋阴补肾丸共煎后,AA-Ⅰ含量降低了30.04%,可见,滋阴补肾丸可以明显降低广防己中AA-Ⅰ的含量。见图2、表1。表1  广防己与滋阴补肾丸共煎后的AA-I含量比较（略）

　　3  讨论

  　  国内外学者现已公认,广防己的肾毒性与其所含主要成分马兜铃酸有关,而其中马兜铃酸A为主要毒性成分[1],且含量较大,故将马兜铃酸A作为测试指标。在提取方法上为了尽量符合临床实际,我们选用了加热水提的方法,提取次数为2次。

　　广防己祛风止痛、清热利水,主治湿热身痛、风湿痹痛、下肢水肿、小便不利等症[2]。湿热之邪极易伤阴,同时广防己利水亦易伤阴。故需配伍养阴药,使邪正兼顾。肾阴为一身阴津之根,滋阴补肾丸为中医滋补肾阴的代表方剂,滋补肾阴,增强正气,既能补已伤之阴液,又能防阴液之再耗。其滋阴之作用,恰恰能制约广防己的利水伤阴之性。因而滋阴补肾丸能够降低广防己利水伤阴的不良反应。

 　   本研究表明,滋阴补肾丸可以明显降低广防己中马兜铃酸A的含量,为广防己等含马兜铃酸类中药的解毒提供了科学依据和新的思路。

【参考文献】
  　　[1] Vanhaelen M, Vanhaelen-Fastre R, But P, et al.Identification of aristolochin acidi in Chinese herbs[J].Lancet,1994,343：174.

　　[2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：化学工业出版社,2000.31－32.