不同采收期连翘、金钟花果实中连翘酯苷和连翘苷的含量测定

                   作者：曲欢欢,李白雪,燕菲,孙文基

【摘要】  目的 考察不同采收期连翘、金钟花果实中连翘酯苷和连翘苷的含量。方法 采用HPLC-PDA法,以Diamonsil-C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)为色谱柱,流动相为甲醇-水,梯度洗脱,流速为1 mL/min,检测波长270 nm。结果 连翘果实中连翘酯苷的含量远高于金钟花,金钟花果实中不含连翘苷。结论 不同采收期连翘、金钟花果实中连翘酯苷和连翘苷的含量有较大差别,金钟花不应混作连翘使用。

【关键词】  连翘；金钟花；连翘酯苷；连翘苷；含量测定

    Key words：Forsythia suspensa；Forsythia viridissima Lindl；forsythiaside；forsythin
 
　　连翘是历史悠久、使用广泛的一种中药,具有清热解毒、消肿散结的功效。我国药典收载的连翘为木犀科连翘属植物连翘Forsythia suspense (Thunb.)Vahl的干燥果实,主产于山西、河南、陕西[1]。对全国大部分地区使用的商品连翘调查发现,在少数地区有将同属植物金钟花F.viridissima Lindl.的果实混作连翘使用现象[2]。另外,近几年在连翘的主产区皆出现了“抢青”现象,产区“采青”时间过长,采收混乱,造成连翘品质差异较大,严重影响了连翘的质量和产量[3]。基于上述现象,本研究比较了不同采收期连翘、金钟花果实中连翘酯苷和连翘苷的含量,为中药连翘的质量控制提供理论依据。

　　1  材料

　　1.1  仪器与试剂
   
　　美国BECKMAN高效液相色谱仪,125型泵,168型PDA检测器,32Karat色谱工作站；HAMILTON微量进样器(HAMILTON公司)；微孔滤膜φ＝13 mm,0.45 μm(天津市色谱科学技术公司)；YCQ-300型超声波清洗器(上海凯波超声设备有限公司)。甲醇为色谱纯,水为双蒸水并经0.45 μm水系滤膜过滤。

　　1.2  样品

　　连翘酯苷、连翘苷对照品均为自行分离精制,并经UV、IR、NMR鉴定结构,HPLC检测,面积归一化法计算纯度,均大于99%。选西安医学院种植的连翘和金钟花为样株(经西北大学生命科学学院王亚洲副教授鉴定为Forsythia suspensa(Thumb.) Vahl和F.viridissima Lindl.,果实具体采收时间见表1。50 ℃干燥至恒重后,研成粉末,过2O目筛,备用。表1  连翘、金钟花果实样品采集情况(略)

　　2  方法与结果

　　2.1  色谱条件与系统适用性试验

    色谱柱：Diamonsil-C18(5 μm,4.6 mm×250 mm)。流动相：A-水,B-甲醇；B相洗脱梯度：0～14 min,34.6%；14～15 min, 34.6%～43.5%；15～23 min,43.5%；23～24 min,43.5%～45%；24～34 min,45%；34～36 min,45%～80%；36～40 min,80%；流速：1 mL/min。柱温：室温28 ℃；灵敏度0.02 AUFS；检测波长270 nm。理论塔板数以连翘酯苷计应不低于3 300,以连翘苷计应不低于7 600。色谱图见图1。

　　2.2  对照品溶液的制备

    分别精密称取连翘酯苷和连翘苷对照品9.86、4.40 mg置于10 mL量瓶中,用60%甲醇定容至刻度,置于冰箱中(4 ℃)保存备用。

　　2.3  供试品溶液的制备

    精密称取不同采收期连翘、金钟花果实的干燥粉末各约1.000 g置于具塞三角瓶中,精确加入甲醇30 mL,精密称质量,超声提取30 min后,用甲醇补足质量,加20 mL双蒸水,混匀,用微孔滤膜(4.5 μm)过滤,作为供试品溶液。

　　2.4  标准曲线及线性范围的考察

    精密吸取上述混合对照品溶液3、5、10、20、40、50 μL,进样测定,按上述色谱条件测定峰面积,按外标法以进样量X(μg)对峰面积Y进行回归,得连翘酯苷和连翘苷的回归方程,分别为：Y＝582 121X－816 019,r＝0.999 7；Y＝580 793X－33 182,r＝0.999 8。结果表明,连翘酯苷进样量在2.96～49.30 μg、连翘苷进样量在1.32～22.00 μg范围内与峰面积呈良好的线性关系。