葛黄活血胶囊质量控制标准研究

　　3.5  线性关系考察
   
　　精密称取于60 ℃干燥至恒重的葛根素对照品16.63 mg,置于25 mL容量瓶中,加流动相稀释至刻度,制成葛根素标准贮备液(0.665 2 mg/mL)。分别配成0.332 6、0.166 3、0.083 15、0.041 58、0.020 79 mg/mL的系列对照品溶液,分别吸取上述溶液10 μL,注入液相色谱仪,测定。以峰面积为纵坐标,对照品浓度(mg/mL)为横坐标,绘制标准曲线,得回归方程：A＝38.133C＋0.889,r＝1.000 0。表明葛根素浓度在0.020 79～0.665 2 mg/mL之间呈良好的线性关系。

　　3.6  稳定性试验

   　 同一样品(批号060817)供试液,隔2 h测1次,共测7次,结果表明,试供液中葛根素在12 h内稳定,其稳定性结果RSD＝0.23%。

　　3.7  精密度试验

   　 同一样品(批号060817)供试液,依法测定,连续进样6次,测量值基本一致,其精密度结果RSD＝0.22%。

　　3.8  重复性试验

    　同一批号(批号060817)制剂,制备6份供试液,依法测定,重复性试验结果RSD＝1.25%,符合规定。

　　3.9  回收率试验
   
　　取已知含量的制剂(批号060817),进行加样回收率试验。取本品装量差异项下的内容物,研细,约0.13 g,共9份,精密称定,置锥形瓶中,加入浓度为0.332 5 mg/mL的标准品2.4、2.9、3.4 mL各3份,精密加30%乙醇使成25 mL,称定重量,超声处理(50 kHz,250 W)10 min,放冷,称重,用30%乙醇补足减失的重量,摇匀,用微孔滤膜(0.45 μm)滤过,取续滤液作为供试品溶液。依法测定,并计算葛根素回收率为99.68%,RSD＝0.38%,结果见表1。表1  加样回收率试验结果（略）

　　3.10  样品测定
   
　　取本品装量差异项下的内容物(批号060817、060818、060819),研细,取约0.25 g,精密称定,置锥形瓶中,精密加30%乙醇25 mL,称定重量,超声处理(50 kHz,250 W)10 min,放冷,称重,用30%乙醇补足减失的重量,摇匀,用微孔滤膜(0.45 μm)滤过,取续滤液,依法测定。以0.083 15 mg/mL葛根素对照品溶液进样测定,平均峰面积为3 175.85,根据外标一点法计算样品含量。结果见表2。表2  样品含量测定结果（略）

　　4  讨论
   
　　在供试品的处理方法实验中,对比了回流法和超声法2种提取方法,并比较了10、20、30 min不同超声时间。结果表明,超声法与回流法提取效果基本接近,但超声法操作简便,故选用超声法提取；超声提取时间对葛根素提取率基本无影响,故选用超声提取10 min。为了保证提取效果,超声时应稍振摇,使制剂样品在溶液中充分分散,防止结成团影响提取效果。
   
　　采用TLC法对制剂样品中秦艽进行鉴别时,尝试了以下3种展开剂：①氯仿-甲醇(5∶1)；②醋酸乙酯-甲醇(4∶1)；③乙醚-甲醇(4∶1)。结果显示,以醋酸乙酯-甲醇(4∶1)作为展开剂,斑点较清晰,分离效果好,重复性好,故选用该展开系统。

【参考文献】
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　　[2] 刘逢芹,刘田云,李贵海,等.分光光度法和HPLC法测定野葛藤总黄酮及葛根素的含量[J].中药材,2005,28(10)：895－896.

　　[3] 王春霞,李华康.补脾益肠丸中黄芪的薄层鉴别[J].时珍国医国药, 2000,11(3)：222.

　　[4] 周嘉琳,王永山.中药配方颗粒薄层色谱彩色图集[M].南京：江苏科学技术出版社,2004.113－114.

　　[5] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：化学工业出版社,2005.233－234.