抗感冒颗粒的薄层色谱和含量测定研究

【摘要】  目的 建立抗感冒颗粒的质量标准。方法 采用薄层色谱法对处方中黄芩、甘草、桔梗进行鉴别；用高效液相色谱法测定制剂中黄芩苷的含量。采用AichromBond-AQ-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5 μm)；流动相：甲醇-水－磷酸(43∶57∶0.2)；流速：1.0 mL/min；柱温：30 ℃；检测波长：280 nm；进样量：10 μL。结果 薄层色谱专属性强；黄芩苷的线性范围为0.049 6～0.297 6 μg,r＝0.999 7,平均加样回收率为101.80%,RSD＝1.86%(n＝6)。结论 该方法简便、准确,重现性好,可作为抗感冒颗粒的质量控制标准。

【关键词】  抗感冒颗粒；黄芩苷；黄芩；甘草；桔梗；高效液相色谱法
 
　　Abstract：Objective To establish the quality standard for Kangganmao Granule. Methods Radix scutellariae, radix et rhizome glycyrrhizae and radix platycodonis in the prescription were identified by TLC. The content of the baicalin was determined by HPLC. The column of AichromBond-AQ-C18 (4.6 mm×150 mm, 5 μm) was used. The mobile phase was CH3OH-H2O-H3PO4 (43∶57∶0.2), with the flow of 1.0 mL/min, the column temperature of 30 ℃, and peaks were detected at 280 nm. Results The characteristic of identification by TLC was distinct and highly specific. The linear range of baicalin was 0.049 6～0.297 6 μg, r＝0.999 7, the average recovery was 101.80%, RSD＝1.86% (n＝6). Conclusion The method was easy to operate with accurate result and good reproducibility. It can be used effectively for the quality control of the preparation.
   
　　Key words：Kangganmao Granule；baicalin；radix scutellariae；radix et rhizome glycyrrhizae；radix platycodonis；HPLC
 
    抗感冒颗粒处方由金银花、连翘、黄芩等9味药材组成。用于风热感冒,发热恶风,鼻塞头痛,咽喉肿痛。本试验对方中黄芩、甘草、桔梗进行了鉴别,同时用HPLC法测定了制剂中黄芩苷的含量,建立了可靠、准确、专属性强的质量控制方法。

　　1  仪器与试药

    日本岛津LC-10ADVP高效液相色谱仪,岛津SPD-10AVP紫外检测器,HW色谱工作站。黄芩药材购自淮安市药材公司(由江苏某公司提供),经南京中医药大学王春根教授进行品种鉴定。黄芩苷对照品购自中国药品生物制品检定所(供含量测定用,批号10715-200212)。10批产品由江苏某公司生产并提供(批号分别为050601、050602、050603、050604、050605、050701、50702、050703、050704、050705)。甲醇、乙醇等试剂由上海久亿化学试剂有限公司生产,均为分析纯或色谱纯。

　　2  定性鉴别

　　2.1  黄芩薄层色谱鉴别

    取黄芩苷对照品,加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液,作为对照品溶液。取本品10 g,加甲醇30 mL,超声处理30 min,滤过,滤液蒸干,残渣加水5 mL,加热使溶解,趁热滤过,滤液用盐酸调节pH值至1～2,摇匀,80 ℃保温30 min,放冷,离心15 min,残渣加甲醇0.5 mL使溶解,作为供试品溶液[1]。取除黄芩以外的其它8味药材按处方比例制得阴性样品10 g,用与供试品溶液相同的方法制得阴性对照液。
   
　　吸取上述3种溶液各10 μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5∶3∶1∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1%三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,而阴性对照液无此斑点。

　　2.2  甘草薄层色谱鉴别

    取甘草对照药材 5 g,加盐酸1 mL及石油醚(60～90 ℃)25 mL,加热回流1 h,滤过,滤液挥干,残渣加石油醚(60～90 ℃)1 mL使溶解,作为对照药材溶液[2]。取本品15 g,加盐酸2 mL及石油醚(60～90 ℃)40 mL,用与对照药材溶液相同的方法制得供试品溶液。取除甘草以外的其它8味药材按处方比例制得的阴性样品15 g,用与供试品溶液相同的方法制得阴性对照液。
   
　　吸取上述3种溶液各10 μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以石油醚(60～90 ℃)-甲苯-乙酸乙酯-冰乙酸(10∶20∶7∶0.5)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%的磷钼酸乙醇溶液,在105 ℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应位置上,显相同颜色的斑点,而阴性对照液无此斑点。

　　2.3  桔梗薄层色谱鉴别[3]

    取桔梗对照药材5 g,加7%的硫酸乙醇-水(1∶3)混合液25 mL,加热回流1 h,放冷,用三氯甲烷提取2次,每次20 mL,合并三氯甲烷液,蒸干,残渣加甲醇1 mL使溶解,作为对照药材溶液。取本品15 g,加7%的硫酸乙醇-水(1∶3)混合液40 mL,用与对照药材溶液相同的方法制得供试品溶液。取除桔梗以外的其它8味药材按处方比例制得的阴性样品15 g,用与供试品溶液相同的方法制得阴性对照液。
  
　　吸取上述3种溶液各10 μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以三氯甲烷-乙醚(1∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105 ℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,而阴性对照液无此斑点。