RP-HPLC法测定血管康袋泡茶中芦丁的含量

                   作者：罗燕梅,焦正花,巢志茂   

【摘要】  目的 建立测定血管康袋泡茶中芦丁含量的方法。方法 采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC),十八烷基键合硅胶柱分离芦丁,以甲醇-水-冰醋酸(40∶60∶1)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长257 nm。结果 芦丁线性范围为0.06～0.3 μg,r=0.999 2,平均回收率为98.48%,RSD=0.87%(n=5)。结论 该法便捷、灵敏、准确、重现性好,可用于该产品的质量控制。

【关键词】  血管康袋泡茶；芦丁；反相高效液相色谱法

　　Abstract：Objective To establish a method for determination of rutin in Xueguankang Tea. Methods RP-HPLC method and C18 column were used for determination. Methanol-water-acetic acid (40∶60∶1) was the mobile phase with a flow rate of 1.0 mL/min. The detection wavelength was set at 257 nm. Results There was a good linear relationship of rutin within the range of 0.06～0.3 μg with r=0.999  2. The average recovery of rutin was 98.48 % with RSD=0.87% (n=5). Conclusion This method is convenient, sensitive, accurate and reproducible, and can be used for the quality control of Xueguankang Tea.
   
　　Key words：Xueguankang Tea；rutin；RP-HPLC
 
    血管康袋泡茶系由槐米等中药研制而成,具有凉血止血、疏肝平血之功效,能降低血管脆性,恢复血管弹性,清除自由基。临床主要用于治疗动脉硬化、脑溢血、心脑血管等疾病,并作为高血压病的辅助治疗药物。槐米为方中君药,芦丁为槐米的主要有效成分[1]。为有效控制该产品的内在质量,本实验采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)对该制剂中芦丁的含量进行了测定,结果表明,该法操作便捷、灵敏、准确、重现性好。

　　1  仪器与试药

　　美国Waters 1525高效液相色谱仪,Waters 2487紫外检测器,Bree色谱工作站,天津HS6150型超声波清洗器,METTLER AE240电子天平。芦丁对照品购自中国药品生物制品检定所(批号100080- 200305)；血管康袋泡茶由本院自制(批号20041228、20050109、20050807)。甲醇为色谱纯,冰醋酸为分析纯,水为纯净水。

　　2  方法与结果

　　2.1  色谱条件

    色谱柱：Symmetry C18(5 μm,4.6 mm×250 mm)；流动相：甲醇-水-冰醋酸(40∶60∶1)；流速：1.0 mL/min；柱温：室温；检测波长：257 nm。

　　2.2  对照品溶液的制备

    精密称取芦丁对照品适量,加甲醇制成每1 mL含0.149 8 mg的溶液,作为对照品溶液。

　　2.3  供试品溶液的制备

    取本品内容物,研细,过40目筛,取约0.1 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25 mL,称定重量,超声处理30 min,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,滤过。精密量取续滤液1 mL,置10 mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,用微孔滤膜(0.45 mm)滤过,取续滤液,即得。

　　2.4  线性关系的考察

    精密吸取芦丁对照品溶液(含芦丁0.149 8 mg/mL)1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL分别置于25 mL量瓶中,用甲醇定容至刻度,摇匀,按上述色谱条件,进样10 μL,测定,记录色谱图。以峰面积对进样量进行线性回归,得回归方程：Y＝26 139 583X－78 169.5,r＝0.999 2。结果表明,芦丁在0.06～0.3 μg范围内峰面积与进样量有良好的线性关系。