鸡腿菇对小鼠小肠推进、胃排空功能的影响

                   作者：吴映明 林俏婉 曾燕琼 吴春梅 朱爱玉

【摘要】  【目的】观察鸡腿菇提取液对小鼠小肠推进和胃排空功能的影响。【方法】选用昆明种小鼠，采用炭末小肠推进试验和改良酚红含量测定法，分别观察不同剂量鸡腿菇对正常、新斯的明负荷、肾上腺素负荷小鼠小肠推动和胃排空功能的影响。【结果】鸡腿菇提取液可显著促进正常小鼠的胃肠运动（3.0、6.0、9.0、12.0g/kg剂量组）和胃排空功能（1.5、3.0、6.0、9.0、12.0g/kg剂量组），与正常对照组比较均有显著性差异（P＜0.05或P＜0.01）；对新斯的明负荷所致的小鼠小肠推进亢进（6.0g/kg剂量）、胃排空亢进（3.0g/kg剂量）均有显著的拮抗作用（P＜0.05）；对肾上腺素负荷所致的小肠推进抑制（6.0g/kg剂量）、胃排空抑制（3.0g/kg剂量）具有显著的拮抗作用（P＜0.05或P＜0.01）。【结论】鸡腿菇对胃肠运动功能具有双向调节作用：运动功能正常或低下时有促进作用，而运动功能亢进时则有抑制作用。

【关键词】  鸡腿菇/药； 胃肠运动/药物作用； 疾病模型，动物； 小鼠

    鸡腿菇(Coprinus comatus),学名毛头鬼伞, 其味甘平,具有益脾胃、清神宁智、助消化、增食欲及痔疮等功效［1］。关于鸡腿菇对小鼠小肠推进及胃排空的药效学研究未见报道。本实验主要观察了鸡腿菇子实体水溶性提取液（简称鸡腿菇提取液）对小鼠小肠推进、胃排空功能的影响，现报道如下。

    1  材料

    1.1  鸡腿菇制剂  鸡腿菇子实体购自广州清平中药材市场，经鉴定无误；产地为福建省莆田县，实验采用其水溶性提取液（1.00g/mL）。

    1.2  动物  昆明种小鼠， 普通级， 体质量18～22g，购自广州市白云区九佛强龙动物养殖场，合格证号：2008A009。

    1.3  药品、试剂与仪器  甲硫酸新斯的明注射液（上海信谊金朱药业有限公司， 批号：060202）；盐酸肾上腺素注射液（广州明兴制药厂， 批号：050501）；硫酸阿托品注射液（广东帮民制药厂有限公司，批号：021007）；羧甲基纤维素钠（广州市医药公司化学试剂玻璃仪器批发部经销，批号：980325），试验前用10g/L羧甲基纤维素钠配置成50g/L的炭末混悬液；酚红（浙江省温州市东升化工试剂厂，批号：051025），实验前配成0.4 g/L的酚红溶液（含100g/L明胶）；UNIVERSAL32R型高速冷冻离心机（德国Hettich公司）；UV2802PCS型可见紫外分光光度计（尤尼柯仪器有限公司）。

    2  方法与结果

    2.1  鸡腿菇对小鼠小肠推进功能的影响 

    2.1.1  各组对正常小鼠小肠推进功能的影响(炭末推进法)［2］  取小鼠80只，雌雄兼用，随机分为8组，每组10只，分为正常对照组，硫酸阿托品组，鸡腿茹1～6组（剂量分别为1.5、3.0、6.0、9.0、12.0、15.0g/kg）；后6组分别以鸡腿菇提取液灌胃，每日1次，25mL/kg，连续3d，正常对照组和硫酸阿托品组灌胃等容积的蒸馏水；实验前禁食12～16ｈ，实验当天再给药1次，硫酸阿托品组皮下注射6mg/kg硫酸阿托品， 药后30min， 每鼠灌胃50g/L的炭末混悬液10mL/kg；20min后，小鼠脱颈椎处死， 立即剖腹取出小肠全长，记录炭末前沿至幽门的距离，占小肠全长的百分比，结果见表1。

    表1结果显示，鸡腿菇3.0、6.0、9.0、12.0g/kg剂量组均能显著性促进正常小鼠的胃肠运动（P＜0.05或P＜0.01），但1.5g/kg和15.0g/kg剂量组对小鼠胃肠运动无显著影响（P＞0.05）；硫酸阿托品组对小鼠小肠推进有显著的抑制作用（P＜0.01）。表明鸡腿菇提取液对正常小鼠小肠的推进功能有促进作用，推进情况与剂量有关。表1  各组对正常小鼠小肠推进功能的影响统计方法：t检验；①P＜0.05，②P＜0.01，与正常对照组比较

    2.1.2  各组对新斯的明所致小鼠小肠推进亢进的影响［3］  取小鼠30只，随机分为3组，每组10只，分为正常对照组、新斯的明组和鸡腿菇组（剂量为6.0g/kg）。鸡腿菇组以鸡腿菇提取液灌胃，每日1次，连续3ｄ；正常对照组和新斯的明组给予等容积的蒸馏水。实验前禁食12～16ｈ，实验当天再给药1次，药后0.5ｈ，除正常对照组外，各组均皮下注射甲硫酸新斯的明0.11mg/kg；15min后，各组小鼠均灌胃50g/L的炭末混悬液10mL/kg，20min后处死小鼠，立即剖腹取出小肠全长，记录炭末前沿至幽门的距离，计算占小肠全长的百分比，结果见表2。 表2  各组对新斯的明所致小鼠小肠推进亢进的影响统计方法：t检验；①P＜0.01， 与正常对照组比较；②P＜0.05，与新斯的明组比较

    表2结果显示,新斯的明可显著加快小鼠的小肠推进运动(P＜0.01)；6.0g/kg鸡腿菇提取液对新斯的明所致小鼠小肠推进亢进有显著拮抗作用(P＜0.05)。表明鸡腿菇提取液能抑制新斯的明所致小鼠小肠运动亢进。

    2.1.3  各组对肾上腺素所致的小鼠小肠推进抑制的影响［4］  取小鼠30只，随机分为3组，每组10只，分为正常对照组、肾上腺素组和鸡腿菇组（剂量为6.0g/kg)。鸡腿菇组以鸡腿菇提取液灌胃，每日1次，连续3ｄ；正常对照组和肾上腺素组给予等容积的蒸馏水。实验前禁食12～16ｈ，实验当天再给药1次，药后30min，除正常对照组外,各组均皮下注射盐酸肾上腺素0.5mg/kg，15min后，各组小鼠均灌胃50g/L的炭末混悬液10mL/kg，20min后处死小鼠。立即剖腹取出小肠全长，记录炭末前沿至幽门的距离, 计算占小肠全长的百分比，结果见表3。 表3  各组对肾上腺素所致小鼠小肠推进抑制的影响统计方法：t检验；①P＜0.01， 与正常对照组比较；②P＜0.01，与肾上腺素组比较

    表3结果显示，肾上腺素可显著抑制小鼠的小肠推进运动(P＜0.01)；6.0g/kg鸡腿菇提取液对肾上腺素所致的小鼠小肠推进抑制有显著拮抗作用(P＜0.01)。

    2.2  鸡腿菇对小鼠胃排空功能的影响 

    2.2.1  各组对正常小鼠胃排空功能的影响［2］  取小鼠70只，雌雄各半，随机分为7组，即正常对照组，硫酸阿托品组，鸡腿菇1～5组（剂量分别为1.5、3.0、6.0、9.0、12.0g/kg)，后5组以鸡腿菇提取液灌胃，每日1次，连续3d；正常对照组和硫酸阿托品组灌胃等容积的蒸馏水。实验前禁食12～16h，实验当天再给药1次，硫酸阿托品组皮下注射6mg/kg硫酸阿托品，给药45min后，每只小鼠灌胃0.4g/L的酚红溶液0.25mL，10min后，小鼠脱颈椎处死，打开腹腔，立即取出胃，将胃置于0.4g/L NaOH溶液中，沿胃大弯剪开，充分清洗胃内容物，取洗液5mL，3000r/min离心10min，吸取其上清液，于560nm波长处比色，测其吸光度，即为胃中酚红吸光度（D）值。计算胃酚红残留率,以胃酚红残留率为指标评价胃排空率。

    另取10只小鼠，每只小鼠用0.4g/L的酚红溶液0.25mL 灌胃， 立刻处死，按上述方法处理后测吸光度，取其均值作为标准值(胃排空为零),按下式胃排空率(p)［5］：p胃排空=(1?D试验组/D标准)×100%。 表4  各组对正常小鼠胃排空的影响统计方法：t检验；①P＜0.05， ②P＜0.01，与正常对照组比较

    表4结果显示，各剂量鸡腿菇组均可显著性促进正常小鼠胃排空(P＜0.05或P＜0.01)， 硫酸阿托品组对正常小鼠胃排空功能有显著抑制作用（P＜0.01）。表明鸡腿菇提取液对小鼠胃排空有促进作用，胃排空率与剂量有关。

    2.2.2  各组对新斯的明所致小鼠胃排空亢进的影响［3］取小鼠30只，雌雄各半，随机分为3组，每组10只，分为正常对照组、新斯的明组和鸡腿菇组。鸡腿菇组以鸡腿菇提取液3.0g/kg灌胃，每日1次，连续3d；新斯的明组和正常对照组灌胃等容积蒸馏水，实验前禁食12～16h，实验当天再给药1次，给药30min后，除正常对照组外，每只小鼠均皮下注射甲硫酸新斯的明0.11mg/kg；15min后全部小鼠灌胃0.4g/L的酚红溶液0.25mL，10min后脱颈椎处死小鼠，按2.2.1项下方法测吸光度，计算胃排空率，结果见表5。表5  各组对新斯的明所致小鼠胃排空亢进的影响统计方法：t检验；①P＜0.01， 与正常对照组比较；②P＜0.05，与新斯的明组比较

    表5结果显示，新斯的明组与正常对照组比较有显著性差异（P＜0.01），说明新斯的明能促进正常小鼠的胃排空；3.0g/kg鸡腿菇提取液对新斯的明所致的小鼠胃排空亢进有显著拮抗作用（P＜0.05）。

    2.2.3  各组对肾上腺素所致的小鼠胃排空抑制的影响［4］  取小鼠30只，雌雄兼用，随机分为3组，每组10只，分为正常对照组、肾上腺素组和鸡腿组，鸡腿菇组以鸡腿菇提取液3.0g/kg灌胃，每日1次，连续3d；肾上腺素组和正常对照组给予等容积蒸馏水，实验前禁食12～16h，实验当天再给药1次，给药30min后，除正常对照组外，每只小鼠均皮下注射肾上腺素0.30mg/kg；15min后全部小鼠灌胃0.4g/L的酚红溶液0.25mL，10min后脱颈椎处死小鼠，按2.2.1项下方法测吸光度，计算胃排空率，结果见表6。表6  各组对肾上腺素所致小鼠胃排空抑制的影响统计方法：t检验；①P＜0.01， 与正常对照组比较；②P＜0.05，与肾上腺素组比较

    表6结果表明，肾上腺素组与正常对照组比较有显著性差异（P＜0.01），说明肾上腺素能显著抑制正常小鼠的胃排空；3.0g/kg鸡腿菇提取液对肾上腺素所致的小鼠胃排空抑制有显著拮抗作用（P＜0.05）。

    3  讨论

    药理研究表明［6］，鸡腿菇具有提高机体免疫力、抑制肿瘤生长及调节血糖的作用，为癌症及糖尿病提供了一种具有研发前景的新药。本研究观察了鸡腿菇提取液对小鼠小肠推进和胃排空功能的影响，并初步探讨其作用机理。

    本实验结果表明，鸡腿菇提取液既能加强正常小鼠小肠推进、胃排空作用，有类似胃肠促动药的作用，又能抑制小鼠因新斯的明负荷引起的胃肠功能亢进， 对肾上腺素引起的肠胃功能抑制有拮抗作用；而且鸡腿菇对胃肠运动机能有双向调节作用，即在胃肠运动功能正常或低下时，它能促进胃肠运动，而在胃肠功能呈现亢进时，它则显示出抑制作用。

    胃肠运动受不同层次神经系统的调节，包括中枢神经系统、自主神经及肠神经系统的调节，这些神经系统对胃肠运动的调节是通过神经递质来发挥其作用的，其中包括胆碱能神经［7］。乙酰胆碱是平滑肌内兴奋传递的化学物质，能激动M胆碱能受体，兴奋胃肠道，从而增加肠管的收缩幅度和张力。新斯的明为抗胆碱酯酶药物，可抑制胆碱酯酶水解乙酰胆碱的活性，发挥拟胆碱作用［8］。鸡腿菇提取液对新斯的明所致小肠推进和胃排空亢进的拮抗作用可能与抗胆碱能受体有关，确切机制有待进一步研究。

【】
  ［１］李志洲,邓百万,杨海涛,等. 鸡腿菇多糖中β?葡聚糖含量的酶法测定［Ｊ］.食品, 2006,27(1): 190.

［2］陈奇.中药药理研究方法［M］.北京:人民卫生出版社, 1993：332.

［3］中华人民共和国卫生部药政管理局.中药新药研究指南［S］. 北京: 人民卫生出版社，1995：137.

［4］官福兰, 王汝俊, 王建华. 陈皮及橙皮甙对小鼠胃排空、小肠推进功能的影响［Ｊ］. 中药药理与临床, 2002, 18(3): 7.

［5］舒任庚,宋子荣,陈杰. 青钱柳对小鼠胃排空的抑制作用［Ｊ］.江西中医学院学报,2005, 17(3):35.

［6］余杰, 崔鹏举, 陈美珍, 等. 鸡腿菇多糖的研究进展［Ｊ］. 安徽农学通报,2007, 13(20): 84.

［7］李春梅, 李桂生, 李敏, 等. 荜芨水提取物对小鼠胃排空及肠推进的影响［Ｊ］. 中药药理与临床, 2007, 23(3)：58.

［8］韩坚, 钟志勇, 景丽, 等. 芍药甘草汤对肠道运动的作用观察［Ｊ］. 广州中医药大学学报, 2007, 24(1): 55.