生物能活力素对人体肝功能和乙醇脱氢酶活性的影响
【摘要】 目的 观察生物能活力素对人体血清ADH活性的影响及对饮酒致肝损伤的防治作用。方法酒量相当的20名成年男性随机分为实验组和对照组，分别饮用加入生物能活力素和未加入生物能活力素的稻花香酒，采用生化酶法，分别测定饮酒前，饮酒3 d、5 d及7 d后血清中乙醇脱氢酶（ADH）活性，测定饮酒前和饮酒7天后肝功能。结果随着饮酒总量的不断增加，血清中ADH活性也不断增加，实验组ADH活性增加的幅度高于对照组，实验组7 d后ADH活性的变化值与对照组比较，有显著性差异（P＜0.05）。 实验组谷丙转氨酶和碱性磷酸酶在喝酒前后有显著性差异（P＜0.05），其余各项指标在喝酒前后无显著差异；对照组肝功能各项指标在喝酒前后均无显著差异。结论生物能活力素能显著增强血清中ADH活性，加速乙醇的代谢，同时可以降低酒精对肝脏功能的损害。
【关键词】 生物能活力素； 乙醇脱氢酶； 解酒； 肝功能
Abstract：ObjectiveTo observe the influence of bioenergy archaeus essential on the human body serum ADH activity and the preventive and therapeutic effect on liver injury induced by drinking wine.Methods 20 adult men whose capacity for liquor were divided into experiment group and control group at random. The two groups separately drank alcoholic liquors which had added the bioenergy archaeus essential and had not. Adopting the bio-chemicalase method, blood-serum ethanol dehydrogenase (ADH) activity was measured before drink alcohol and 3 days, 5 days and 7 days after drink alcohol, and liver functions were detected before drink alcohol and 7 days after drink alcohol. ResultsWith the increase of total drinking amount, the blood-serum ADH activity was also rising continuously. The increase of ADH activity in experiment group was higher than that of control group. Compared with control group, the variety of ADH activity after drink alcohol 7 days was increased distinctly in experiment group( P<0.05). At the same time, the glutamate-pyruvate transaminase and alkaline phosphatase showed remarkable difference( P<0.05) between before and after drink alcohol in experiment group, the rest indexes did not manifest obvious difference. In contrast group, the indexes of liver function did not show remarkably difference. ConclusionThe bioenergy archaeus essential can enhance the ADH activity significantly, and accelerate the metabolism of alcohol, at the same time, it can degrade the damage of the liver function induced by alcohol.
Key words：The bioenergy archaeus essential; Ethanol dehydrogenase; To alleviate a hangover; Liver function
乙醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase ,ADH) 是参与乙醇在体内代谢的主要酶，在乙醇第一关卡代谢中起重要作用，ADH催化乙醇脱氢反应生成乙醛，乙醛在体内经乙醛脱氢酶继续催化氧化反应，生成醋酸， 经三羟酸循环，彻底氧化供能或作为脂酸、胆固醇等合成原料。而在乙醇转化为乙醛的同时，NAD 转化为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)［1］ 。NADH在340 nm 有吸收峰，故本实验采取测定单位时间内生成的NADH 引起的吸收度变化率的方法，测定ADH 活性的变化。凡饮酒过度者都有醉酒， 宿醉之苦， 轻则头昏脑胀、步态蹒跚， 重则抽搐、昏迷，大小便失禁， 甚至发生呼吸衰竭而亡。因此， 如何有效预防醉酒， 宿醉后减轻醉酒症状，早醒酒、早解毒是一个重要的健康问题。ADH可以减少机体对乙醇的生物利用度,缓解乙醇对肝脏、脑等器官的毒害作用，防止酒精性肝病的发生。因此，提高ADH的活性可缓解乙醇对机体特别是对肝脏的毒害作用。本实验就生物能活力素对ADH活性及肝功能的影响作初步探讨，旨在为其解酒保肝提供理论依据。
1 器材
1.1 对象
湖北三峡稻花香酒厂职工，健康男性20名，年龄30～50周岁，酒量250～750 ml/d。
1.2 药物和试剂
生物能活力素由稻花香酒厂提供。稻花香酒由湖北三峡稻花香酒厂提供。血清（浆）乙醇脱氢酶（ADH）测定试剂盒由南京建成生物工程研究所生产，批号20060902。
1.3 仪器
WFZ UV-2100 型紫外可见光分光光度计，尤尾柯（上海）仪器有限公司生产；HH-S 型恒温水浴锅，金坛市亿通有限公司生产。
2 方法
2.1 受试对象的分组与处理
受试人员随机分为两组，试验采用随机双盲对照法。受试人员先禁酒1周，然后抽取肘正中静脉血2～3 ml 测定实验前即饮酒前的ADH活性和肝功能；取血后，当天即开始饮酒，实验组组饮用1号酒（生物能活力素∶稻花香酒=1∶1000），对照组饮用2号酒（稻花香酒），每人饮用250 ml/d，共7 d；同时在饮酒后第3天，第5天，第7天均抽取肘正中静脉血2～3ml，测定饮酒后不同时间的ADH活性，测定第7天后的肝功能。
2.2 样本的检测
2.2.1 检测原理
利用乙醇脱氢酶(ADH)催化氧化型辅酶Ⅰ反应的原理,通过测定340 nm吸光度变化率得出其酶活性。
2.2.2 检测方法
取血清50 μl，按照ADH测定试剂盒说明书上的步骤进行操作，测定A1、A2。
2.3 方法
定义： 在37℃条件下，每毫升血清（浆）每分钟催化产生1 nmol产物的酶量定义为一个酶活力单位。
血清（浆）中乙醇脱氢酶(ADH)活力计算公式：
ADH活力（U/ml）=测定（A2-A1）-空白（A2-A1）6.22×0.5×
反应液总体积（ml）样本量(ml)÷反应时间×1000
2.4 统计方法
实验数据均以±s表示，用SPSS11.0软件进行分析，组内比较采用ANOVA方差分析，组间比较采用独立样本t检验。对各组人员饮酒前后肝功能各项指标进行配对资料t检验。
3 结果
3.1 生物能活力素对人体血清ADH活性的影响
如表1所示，与实验前比较，3 d后两个组的血清ADH活性均增高，但无统计学差异；5 d后和7 d后两组的血清ADH活性均显著增高。结果还显示，1号组与2号组比较，实验前、3 d后和5 d后血清ADH活性的差异无统计学意义，但7 d后1号组的ADH活性明显高于2号组（2号组有一人在实验前未禁酒，故2号组实验人数以9计）。其变化曲线见图1。表1 两种酒对人体血清中ADH活性的影响（略）
由表1和图1可见，血清ADH的活性随着体内乙醇含量的增加而逐渐增加；1号组的血清ADH活性的增加幅度明显高于2号组，即生物能活力素对ADH的活性有协同作用。
3.2 生物能活力素对人体血清ADH活性变化值的影响
血清中ADH活性变化值（即后一次的ADH活性值减去前一次的ADH活性值所得到的差值），如表2所示。其直观图见图2。表2 两种酒对人体血清中ADH活性动态变化值的影响（略）
从表2可以发现，1号组5 d后的变化值（d5 - d3）高于3天后的变化值（d3 - d0），但无统计学差异，而7天后的变化值（d7 - d5）明显高于5天后的变化值（P＜0.05）；2号组每次的变化值均高于其前次的变化值，但均无统计学差异。结果同样显示，随着饮酒总量的不断增加，ADH活性的增加幅度也在不断上升，1号组与2号组相比，3天后和5天后的变化值均高于2号组，但无统计学差异，1号组7天后ADH活性的变化值明显高于2号组（P＜0.05）。这说明生物能活力素能显著提高ADH的活性，与之有协同作用。表3 生物能活力素与稻花香酒对人体肝功能的影响（略）
上述变化，可以从图2直观地观察。
3.3 生物能活力素对人体肝功能的影响两组实验人员饮酒前后肝功能指标测定结果见表1。
从表1可见，ALT测定结果表明，1号组在饮酒前后，差异有统计学意义（P<0.05），ALT是最敏感的肝功能检测指标之一，表明对肝脏损害有修复作用。2号组在饮酒后ALT值升高，但无统计学差异。ALP测定结果，1号组在饮酒前后，差异有统计学意义（P<0.05），但是单纯看ALP的值在临床上无意义。2号组在饮酒后ALP值升高，但无统计学差异。除ALT和ALP，肝功能的其它相关指标在饮酒前后差异无统计学意义。
4 讨论
人体摄入乙醇后,通过胃肠道吸收,90 %～98 %在肝脏代谢。肝脏的乙醇代谢系统，包括介乙醇脱氢酶（alcohol dehydrogenase,ADH）系统和非介乙醇脱氢酶(non-ADH)系统。通常以前一途径为主，而在长期酗酒者后一途径即非ADH代谢系统也形亢进［1］。本实验观察了生物能活力素对人体饮酒过程中不同时间血清ADH活性的影响。实验结果显示：①随着体内乙醇浓度的增高，血清ADH的活性逐渐增强，在第7天最高；②随着饮酒总量的不断增加，血清ADH的活性的动态变化值也在逐渐增加。③1号组血清ADH的活性在第5，7天高于2号组，有统计学差异，说明生物能活力素对肝中ADH活性有显著的协同作用。
同时在肝细胞，经过乙醇脱氢酶，过氧化氢体分解酶和肝微粒体乙醇氧化酶系三条途径氧化为乙醛，大量乙醛对肝细胞有明显的毒性作用，直接或间接导致肝细胞变性，坏死，以及纤维化，严重时可为肝硬化［2］。近年来，随着人们生活水平的提高和交往的扩大，在我国由于饮酒导致肝损伤的发生率呈明显上升趋势。生物能活力素在满足人们这些需求的同时，通过提高乙醇脱氢酶的活性等途径，保护肝细胞及改善其功能，对生命动力素的上述实验表明：短期内即可明显降低ALT（P<0.05）,而ALT是肝细胞受损及坏死最敏感的指标之一，可见，生物能活力素在保护肝细胞，改善肝功能方面有明显的统计学意义。从其结果来看，是否还可以逆转肝损伤，有待于进一步探讨。从结果来看，可以反映肝脏功能的其它一些指标虽有改变，但无明显的统计学意义，可能与以下因素有关：有些指标不太敏感，或者特异性不强；饮酒量太少，饮酒时间太短。从本实验及其它实验结果来看，生物能活力素具有很好的前景，如果能够从脏器损害的研究进入细胞因子、免疫反应、分子遗传学水平等领域，将有利于拓展生物能活力素对肝脏及人体的作用机制研究的深度与广度。
【】
［1］江正辉，王泰龄.酒精性肝病［M］.北京：医药科技出版社，2001：25.
［2］杨玉林，贺志安.肝脏疾病实验诊断［M］.北京：中国医药科技出版社，1996：10.
