组合药敏纸片技术及装置的研究

【摘要】  目的:设计一种组合药敏纸片的方法,并制作其装置。方法：在与培养皿等大的白纸片上，通过培养皿的面积在里面画七个最大面积等大的圆，在圆的中心做上清晰的标记，做药敏时，将培养皿放在此定位器上，将不同的药物纸片分别放到标志上。将与平皿同样大小的铁板均匀的焊七个短细钢针，再用同样大小的铁板钻七个小孔与之对应，分别焊2个柄焊成剪子或钳子的结构，使用时先高压灭菌，然后将所选药敏纸片插到钢钉上，将铁片和培养皿对齐，用手一捏纸片落入培养皿内，用无菌镊子稍压即可。结果：将原来的多次操作变为一次操作，使操作过程简化，减轻了检验人员的劳动强度，减少了污染机会，避免了手工操作的人为误差。结论：组合药敏纸片法操作时间短，污染得到了有效的控制，结果更准确、可靠。

【关键词】  组合药敏纸片技术；药敏试验；装置

Research of Quick Scraps of Paper Technology of Medicine and Device
    Abstract: Objective One kind of method that makes up the quick scraps of paper of medicine design,and his device is made.Methods On the blank paper piece bigwaiting pass through counting the area of culture dish drawing the big circles such as seven areas the biggest in the interior,and does the distinct labeling,and does medicine when quick,and puts the culture dish on this locator,and puts the different pharmaceuticals scraps of paper to the mark respectively at the round center with the culture dish.The iron plate that will be equally big or small with the flat instrument even welds seven short carefully steel needles,and the structure into scissors or pliers welds respectively 2 handles welding seven apertures on the brill used equally big or smalllythe iron plate again andcorrespondence,high?handedly during the use exterminates bacterium first,then inserts the quick scraps of paper of the medicine selecting to the steel nail,with iron piece and the culture dish to neat,pinching the scraps of paper falling inside the culture dish with the hand,namely the tweezers are pressed passablely slightly with the asepsis.Results Will originally the many times operation becomes once the operation,has made the function simplification,and has lightened the labour intensity of inspection personnel,and has reduced the pollution chance,and has avoided the personal error of manual operations.Conclusion It is short to make up the quick scraps of paper law operating time of medicine , and pollutes having got effective control,and the result is more accurate and reliable.
    Key word: The combination quick scraps of paper technology of medicine；Drug sensitivity test;Device

    目前，国内实验室的药敏实验，普遍采用的是世界卫生组织推荐的K?B法［1］，其原理是将分离培养后的细菌接种到固体培养基上，然后把含有不同药物的药敏纸片放置到上述培养基上，通过药物的梯度扩散，检测细菌对药物的敏感性。这种操作方法不仅繁琐、药敏纸片分布不匀，而且污染机会大，易造成结果不准确。我们设计了一种组合药敏纸片的方法，对细菌药敏实验的方法进行了改进。本法可以使药敏纸片在培养基上分布均匀，减少污染机会及人为误差，便于观察结果及药敏统计学分析，操作简便、结果准确可靠，现介绍如下。
   1  材料与方法
1.1  材料
1.1.1  试剂  营养琼脂（上海伊华医学科技有限公司生产）；药敏纸片（上海伊华医学科技有限公司生产）；脱纤维羊血，自采。
1.1.2  培养基的制备  普通平板：称取营养琼脂4.5 g加蒸馏水100 ml，121℃ 30 min,以无菌手续，分装高压灭菌后的培养皿（直径9 cm）内；血平板：将灭菌后的营养琼脂冷至40℃～50℃，加入脱纤维羊血8 ml～12 ml，分装倾倒血平板（直径9 cm）；巧克力平板：装灭菌后的营养琼脂冷至70℃～80℃，加入10 ml脱纤维羊血，分装倾倒平板（直径9 cm）。

1.2  方法
1.2.1  组合药敏纸片技术装置的制作  在与培养皿等大的白纸片上，通过培养皿的面积在里面画七个最大面积的等大的圆，在圆的中心做上清晰的标记，做药敏时，将培养皿放在此定位器上，将不同的药物纸片分别放到标志上，这样就解决了放置不均匀的问题，这一改进没有影响到接种过程，所以对结果没有影响。为了解决多次放置药敏感纸片反复开启培养皿，减少污染的问题，我们研制了药敏纸片放置器，即先将与平皿同样大小的铁板均匀的焊七个短细钢针，再用同样大小的铁板钻七个小孔与之对应，分别焊2个柄焊成剪子或钳子的结构，使用时先高压灭菌，然后将所选药敏纸片插到钢钉上，将铁片和培养皿对齐，用手一捏纸片落入培养皿内，用无菌镊子稍压即可。为了解决不同人员选择药敏纸片随意性大的问题，根据美国国立临床实验室（NCCLS）推荐的标准制成了多个系列，如G+球菌：红、青、氨、苄、氯、复合磺胺、可、头孢噻肟、头孢三嗪，G-杆菌：氨、苄、头孢唑啉、庆大、丁卡、头孢吡肟、头胞哌酮、头孢呋新，G+杆菌等系列，特殊情况另行调整。这样即避免了人为因素造成的差异，又便于统计分析。怎样减轻操作人员的劳动强度，提高准确性、减少误差。我们作了进一步的研究，将不同的药敏纸片整合到支撑物上，所谓支撑物就是一种可以支撑药敏纸片，又不影响细菌生长、药物扩散及结果观察的物质，制作时将不同的药敏纸片带标记的一面，均匀的整合到支撑物上，无菌制作，一个组合药敏纸片单独包装，用时剪开用摄子夹出放入接种好细菌的培养皿即可（药敏纸片向下，支撑物在上面覆盖）。
1.2.2  方法  不同的标本常规处理后，分别接种到普通平板、血平板、巧克力平板。根据细菌需要的环境不同，分别进行普通培养-CO2培养、厌氧培养等，经35℃ 18 h～24 h培养。根据细菌培养的结果选用不同的组合药敏纸片，按 “K?B”操作标准做药敏实验，同时用组合药敏纸片进行比较。
     2  结果
    116例份标本“K?B”法与组合药敏纸片法结果比较见表1。
表1  116例份标本“K?B”法与组合药敏纸片法结果比较
方法平均做一份
标本所需时间(s)纸片分布不均影响
结果观察例数（n）污染例数
（n）K?B法7'26367组合药敏纸片法1'4002
    从表中可知, 组合药敏纸片法操作时间短，污染得到了有效的控制，结果更准确、可靠。

　　3  讨论

    组合药敏纸片法得出结果与“K?B”法比较，有以下优点：将原来的多次操作变为一次操作，使操作过程简化，使工作量减少为原来的1/7，减轻了检验人员的劳动强度，同时更重要的是减少了污染机会，使结果准确可靠；各种纸片的距离都经过仔细计算，纸片分布均匀，避免了手工操作的人为误差；根据细菌对药物的敏感性不同制成多个系列，固定成一定的模式，便于统计分析，同时可作细菌耐药性实验的质量控制，避免了操作人员随意性选择引起的差异，值得推广应用。