抗敏颗粒质量标准研究

【摘要】  目的：建立抗敏颗粒剂的质量标准。方法：采用薄层色谱法对抗敏颗粒剂中的当归、桂枝进行薄层色谱鉴别；采用高效液相色谱法对黄芩中的黄芩苷的含量进行测定。结果显示：试验采用薄层色谱法定性鉴别，色谱斑点清晰，分离度良好，阴性液无干扰；以HPLC法测定本品黄芩中的黄芩苷的含量，方法精密度、稳定性、重复性良好，回收率在98.1～100.6%之间，RSD为1.5%。结论：本试验所确定的质量分析方法稳定可靠，能较为合理地对处方中各组分进行定性、定量检测，重复性强，可作为抗敏颗粒的质量标准。

【关键词】  抗敏颗粒剂 质量标准 薄层鉴别 高效液相色谱法

    Study on Quality Standards of Kangmin Granule

    【Abstract】Object:To establish the quality control method for Kangmin granule.Methods:Radix angelicae sinensis and Ramulus cinnamomi was identified by TLC;and the content of Baicalin were determined by HPLC.Result shows:the spots on the TLC are clear,The determination of Baicalin showed a good linear relationship at arrange of from 0.0944 to 0.9440μg,the average recoveries of Baicalin was from 98.1 to 100.6%,RSD was 1.50%.Conclusion: the qualitative and quantitative analytic methods are stable,reliable and easy to repeat.It can be applied as the standard of Kangmin Granule.

    【Key words】Kangmin granule Quality Standards TLC HPLC

    抗敏颗粒剂是本单位科研课题，由黄芩、当归、桂枝等药组成。具有补气固表、清热、养血之功效，临床用于变态反应性疾病获得了较好的疗效。本文对当归、桂枝进行了定性鉴别，并以高效液相色谱法测定黄芩中黄芩苷的含量。结果显示，方法可靠，重复性强，可作为质量控制的定量指标[1]。

    1  仪器与试剂

    1.1  仪器  安捷伦（LC1100）液相色谱仪；G21771AA-UV检测器；安捷伦色谱工作站；KQ3200超声波清洗器（江苏昆山）。

    1.2  试剂  硅胶G（青岛海洋化工厂）；黄芩苷（批号110715-200212）、当归、桂枝等对照品、对照药材由药品生物制品检定所提供；甲醇为色谱纯，蒸馏水，其他所用试剂均为分析纯。

    2  薄层定性鉴别

    2.1  当归的TLC鉴别  取本品1g，研细，加乙醇20ml，加热回流30min，滤过，滤液浓缩至1ml，作为供试品溶液。将处方中不含当归的其他药材，按本品工艺及上述供试品制备方法，制成阴性对照溶液。取当归对照药材1g，加乙醇10ml，同上法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（中国药典2005年版一部附录VIB）试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正丁烷-醋酸乙脂（9:1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性溶液无此斑点[2]，见图1。

    2.2  桂枝的TLC鉴别  取本品3g，研细，加石油醚（60～90℃）20ml，时时振摇，浸渍过夜，滤过，滤液挥散至约1ml，作为供试品溶液。将处方中不含桂枝的其他药材，按本品工艺制成样品，按上述供试品制备方法制成阴性溶液。取桂枝对照药材1g，同上法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（中国药典2005年版一部附录VIB）试验，吸取上供试品溶液、对照药材溶液与阴性溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正已烷-醋酸乙脂（17:3）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm检视。喷以10%香草醛浓硫酸溶液，于105℃加热至斑点显色清晰，置日光下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的斑点，阴性溶液无此斑点[3]。见图2、图3。

    3  含量测定

    3.1  色谱条件  色谱柱：ZorbaxEclipseXDBC18（150mm×4.6mm，5μm）；柱温：室温。甲醇-水-磷酸溶液（40:60:0.2）为流动相，检测波长：280nm，流速：1.0ml/min。色谱柱理论塔板数按葛根素峰不低于2500[3]。

    3.2  方法学考察

    3.2.1  检测波长的选择  取黄芩苷加甲醇溶液于紫外分光光度计上绘制紫外吸收光谱，波长范围200～400nm，根据测定结果，最大吸收波长为280nm。

    3.2.2  供试品制备  取本品10g，研细，精密称定0.3g，加70%甲醇40ml，加热回流3小时，放冷，过滤，滤液置100ml量瓶中，用少量70%甲醇分次洗涤容器壁和残渣，洗液滤入同一量瓶中，加70%甲醇至刻度，摇匀，精密吸取1ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，即得。

    3.2.3  阴性试验  取除去黄芩以外的其它药材，按供试品制备方法制成。测定法，分别精密吸取供试品溶液、阴性液、对照品溶液各10μl，注入液相色谱仪中测定，绘制液相色谱图，由色谱图提示，在对照品色谱相应的位置上，供试品溶液具有相同保留时间的色谱峰，阴性液在此峰位无吸收，对本品中黄芩苷含量测定无干扰，方法专属性良好[3]，见附图4、图5、图6。

    3.3  线性范围考察  精密称取黄芩苷对照品0.236mg/ml，分别精密吸取对照品溶液各1.0、2.5、5.0、7.5、10.0ml，置25ml量瓶中，加30%乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀。分别精密吸取对照品溶液各10μl溶液，注入液相色谱器仪中，测定色谱峰面积，测定结果经线性回归，回归方程为：Y=3558.3X＋36.098；r=0.9998，测定结果提示，黄芩苷进样量在0.0944～0.9440μg范围内线性关系良好。

    3.4  稳定性试验考察  精密称取本品1.3g，按3.3.2项下制备供试液，精密取同一供试液，按0、2、4、6、8小时时间间隔，分别进样分析，测定色谱峰面积，测定结果RSD为1.40%，表明样品在8小时内基本稳

    定。

    3.5  精密度试验考察  精密称取本品1.3g，按3.3.2项下制备供试液，精密取同一供试液，分别精密吸取10μl，连续进样5次，按前述色谱条件进样分析，测定色谱峰面积，RSD为1.10%。

    3.6  重复性试验考察  取同一批号样品，依法独立测定5次，结果RSD为1.12 %，表明本方法重现性良好。

    3.7  回收率试验考察  精密称取已知含量样品（批号：20070108，含量12.57mg/g）5份，分别精密加入葛根素对照品溶液（16.01mg/ml）1ml，依前法测定，结果见表1。表1 回收率试验测定结果测定结果提示，本方法回收率在98.1～100.6%之间，RSD为1.50%，符合有关规定。

    3.8  样品含量测定结果  经采用3.3.2项和3.2项下方法，测定供试品中黄芩苷含量，测定结果见表2。表2  3批样品含量测定结果（略）

    4  讨论与结果

    4.1  当归的薄层鉴别时，展距不宜过长，否则斑点容易扩散，且本色谱放置后斑点荧光逐渐减弱，应注意及时记录结果。

    4.2  在含量测定中，我们针对流动相进行了筛选，本

    实验先后采以甲醇-水-磷酸（47:53:0.2）（Ⅰ）[3]，甲醇-水-磷酸（40:60:0.2）（Ⅱ），为流动相，在系统（Ⅱ）的条件下，供试溶液中黄芩苷与相邻组分分离度良好，阴性液无干扰。故确立甲醇-水-磷酸（40: 60:0.2）为流动相系统。

【】
  [1] 张承烈．抗过敏中药研究进展[J]．浙江中西医结合杂志，2005，15（4）：34．

[2] 张军平．宫颈康颗粒质量标准研究[J]．药房，2006，7（2）：126．

[3] 药典委员会．中华人民共和国药典2005年版第一部[S]．北京：化学出版社，2005：211．