复方月见草油胶囊中γ?亚麻酸含量测定分析

                 作者：赵伟,蔡广知,王莎莎,谢小燕,贡济宇

【关键词】  月见草油；γ?亚麻酸；含量测定；GC?MS;气相色谱仪

基金项目:吉林省科技厅科技重大项目资助课题
　　

　　月见草油(evening primrose oil)采自柳叶菜科多年生草本植物月见草(Oenothera biennis L)的种子，含有多种脂肪酸成分且多为人体必需脂肪酸，其主要有效成分为γ?亚麻酸(γ?linolenic acid，化学结构为顺?6，9，12?十八碳三烯酸)，在体内可转变成花生四烯酸，为前列腺素及生物膜的构成提供前体。多年来，国内外学者对月见草油进行了大量的研究，现已证实其具有明显的抗炎、抗氧化、抗血栓、降血糖、降血脂、抗血小板聚集等药理作用，临床主要应用于糖尿病、高脂血症、动脉粥样硬化、冠心病、慢性肾功能不全等疾病的，现已广泛应用于医疗、保健及食品等领域。本文采用气相色谱法测定复方月见草胶囊中γ?亚麻酸的含量，通过气质联用的方法分析其他必需脂肪酸组成。

　　1  仪器与材料
     　　
　　电热恒温水浴、旋转蒸发器、岛津GC?14C气相色谱仪。尿素、KOH、甲醇、乙醇、盐酸、无水硫酸钠，均为分析纯。γ?亚麻酸甲酯对照品(药品生物制品检定所，批号：898?200101)。
　　
　　2  方法与结果

　　2.1  尿素包合［1］  将月见草精制油、尿素、乙醇按1：3：5的比例混合，加热搅拌使尿素充分溶解。在0℃条件下放置12 h，抽滤，滤液回收乙醇。冷却，加盐酸酸化至pH为1-2，水洗至中性，干燥，即得。

　　2.2  γ?亚麻酸的含量测定［2］

　　2.2.1  甲酯化反应  为准确测定不饱和脂肪酸的含量，对尿素包合产物进行甲酯化［3］。取5 g包合后得油，加100 mL甲醇，10 mL浓硫酸，水浴回流2h，回收甲醇，酸水层用石油醚振摇提取3次，每次15 mL，合并石油醚提取液，用水洗至中性后用无水硫酸钠干燥，回收石油醚，即得。

　　2.2.2  气相色谱测定条件  岛津GC?14C气相色谱仪，DB?WAX毛细管气相色谱柱，载气压力140 kPa，尾吹气压力200 kPa，程序升温，FID检测器。

　　2.2.3  实验结果  以γ?亚麻酸甲酯为对照品，采用气相色谱外标法测定含量为82.66％。

　　2.3  其他脂肪酸的分析

　　2.3.1  GC?MS条件  QP2010 GC?MS气相色谱－质谱联用仪；载气流速：1 mL/min；程序升温：170 ℃-196 ℃  4 ℃/min，196 ℃-198 ℃  0.5 ℃/min，停留4 min，198 ℃-200 ℃  1 ℃/min，200 ℃-220 ℃  5 ℃/min，220 ℃-270 ℃  10 ℃/min，色谱柱：HP-5MS(30 m×0.25 um×0.25 mm)；检测器：质谱检测器，EI:70ev。

　　2.3.2  分析结果  通过气质联用分析3种其他不饱和脂肪酸，含量测定结果：软脂酸(6.89％)、油酸(3.69％)、硬脂酸(0.59％)。

　　3  小结
     　　
　　本实验采用尿素包合法富集月见草油中的γ?亚麻酸，气相色谱法测定其含量为82.66％；用GC?MS分析了复方月见草油胶囊中其他的不饱和脂肪酸，并测定了其含量。
    
　　气相色谱法测定γ?亚麻酸的含量准确，快速，GC?MS分析法方便、简易，实验结果为制剂的质量标准研究奠定了基础。

【】
  　　［1］赵春芳,郝秀华,李平亚,等.月见草油的营养成分分析［J］.白求恩医科大学学报,2000,26(5):458-459.

　　［2］Katan MB,Zock PL & Mensink RP.Trans fatty acids and their effects on lipoproteins in humans［J］.Annual Reviews of Nutrition,1995,(15):473-493.

　　［3］P.P.Pillay and K Mahadeva Iyer.A chemical examination of Emblica of ficinalis［J］.Current Sci,1958,(27):266-7.