薄层扫描法测定导赤丸中盐酸小檗碱的含量

【摘要】  　　目的：探讨导赤丸的含量测定方法。方法：采用薄层扫描法对导赤丸中的盐酸小檗碱进行定量。结果：盐酸小檗碱点样量在0.025072～0.12536 μg呈良好的线性关系，回收率为96.96%。结论：本研究建立的导赤丸含量测定方法，准确、可靠、重现性好。

【关键词】  导赤丸 盐酸小檗碱 薄层扫描法

　　导赤丸是由连翘、黄连、栀子、大黄等药味制成的大蜜丸，具有清热泻火、利尿通便的功效，为了更好地控制药品含量，建立了荧光扫描法测定其黄连中盐酸小檗碱的含量。报告如下。

　　1  实验材料
    　　
　　CS?9000型薄层扫描仪(岛津)；硅胶G薄层板(烟台化工研究所);中性氧化铝(层析用)，100～200目(上海五四化学试剂厂)；盐酸小檗碱对照品(药品生物制品检定所)；样品导赤丸(北京中药五厂，批号940502?8，950101?8，850701?4，960102?8)山西华康药业股份有限公司，批号971101，971201，981001)。

　　2  方法与结果

　　2.1  供试品溶液的制备  取本品1 g，剪碎，精密称定，置100 mL量瓶中，加水5 mL，放置使溶散，加入盐酸—甲醇(1∶100)约80 mL，60℃水浴中加热15 min，超声处理15 min，放至室温加盐酸—甲醇(1∶100)稀释至刻度，过滤，精密量取续滤液5 mL，通过中性氧化铝柱(100～200目，3 g，0.9 cm)，以乙醇25 mL洗脱，洗脱液蒸干，用甲醇溶解并定容于 5 mL量瓶中，作为供试品溶液［1］。

　　2.2  对照品溶液的制备  取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成1 mL含0.025 mg溶液，为对照品溶液。

　　2.3  色谱分析  定量毛细管点样，展开条件：苯—醋酸乙酯—甲醇—乙丙醇—水(6∶3∶1.5∶1.5∶0.3)，置氨蒸气饱和层析缸内展开，激发波长366 nm。

　　2.4  定性试验  取样品溶液，点样、展开，挥干溶剂后每隔一定时间扫描1次。结果表明，荧光强度在4h内基本稳定。

　　2.5  精密度试验  (1)同点精密度(仪器精密度)：对同一斑点连续扫描5次，求得RSD为1.28%。(2)同板精密度：取样品溶液，在同一薄层板上点样5次，分别测定峰面积，求得RSD为0.94%。(3)异板精密度：取同一样品溶液，分别点于5块薄板上，测定其含量，求得RSD为1.21%。

　　2.6  线性关系考察  分别精密吸取盐酸小檗碱对照品溶液(25.072 mg／μL)1、2、3、4、5 mL，分别点于同以硅胶G薄层板上，测定峰面积，绘制标准曲线。结果在0.025072～0.12536 μg呈良好的线性关系，回归方程Y=312.0236+2055.577X,r=0.9997。

　　2.7  重视性试验  吸取供试品溶液4 μL，对照品溶液2、4 μL分别点于同一硅酸G薄层板上，依法测定含量。对同一样品进行5次测定，求得RSD为1.04%。

　　2.8  回收率试验  取已知含量的样品进行回收率试验，结果RSD为1.3%。

　　2.9  样品测定  按上述条件测定样品5批，结果见表1。

　　表1  样品中盐酸小檗碱含量测定结果（略）

　　3  小结
       
　　本实验采用中性氧化铝柱净化样品，可有效除去导赤丸中大黄等干扰物质，使薄层色谱几乎无杂质斑点，扫描图谱达到基线分离，回收率达95%以上［2?3］。荧光扫描法是一种较为成熟的方法，灵敏度高，点样量仅为0.05～0.1 μg，且精密度较好，考虑到药典标准的特殊性，故应选择本法，准确、可靠、简便易行［4］。

【】
  　　［1］国家药典委员会编.中华人民共和国药典(一部)［M］.北京:化学出版社,2005:214.

　　［2］迟芳振，刘 群，李伟妮.黄柏胶囊中盐酸小檗碱的含量测定［J］.医药导报,2005,24(9):82.

　　［3］陈燕祥,沈安华.白芷中欧前胡素的薄层扫描测定［J］.中成药研究,1991,11(6):26.

　　［4］敬小军，韩宝侠，张晓雷.高效液相色谱法测定前列通胶囊中盐酸小碱的含量［J］.长春中医药大学学报,2008,24(3):256?257.