单味中药金钱草、石韦、车前子对大鼠肾结石肾保护作用的实验研究

                  作者：邵绍丰 张爱鸣 刘 耀 翁志梁 李澄棣

【摘要】  目的：观察单味中药金钱草、石韦、车前子对大鼠肾结石模型肾的保护作用。方法：90只大鼠随机分为五组,采用1.25%乙二醇和1%氯化铵制备大鼠肾结石模型。造模同时用上述三种单味中药的免煎剂型分别按剂量给各中药组大鼠灌胃，模型组给予生理盐水灌胃，枸橼酸钾组用枸橼酸钾灌胃。4周后观察各组大鼠肾脏损伤情况。结果：各中药组大鼠肾脏损伤情况(肾充血、炎细胞浸润、肾小管扩张)明显轻于模型组(P<0.05)，与枸橼酸钾组相当。大鼠肾脏损伤表现为肾皮质明显充血，近曲小管水肿，髓质充血，间质水肿，远曲小管可见草酸钙结晶，程度不等的炎性细胞浸润，乳头管也可见结晶，肾盏内见脱落细胞。结论：单味中药金钱草、石韦、车前子对大鼠肾结石有良好的肾保护作用，促进尿中草酸钙结晶排泄可能是其作用机制。

【关键词】  大 鼠 肾结石 金钱草 石 韦 车前子 枸橼酸钾

　　Abstract Objective:To investigate the protection effect of Chinese herbs Christina loosestrife,Pyrrosia and Plantago on kidney injury in experimental rats with calcium oxalate stones.Methods:Calcium oxalate stone?induced kidney injury in 90 male SD rats was induced by injection of 1.25% ethylene and 1% ammonium chloride.Rats with kidney injury were randomly divided into 5 groups.Of them,3 groups were treated with Christina loosestrife,Pyrrosia and Plantago,respectively,rats in the positive control group were given tripotassium citrate,and the model group was given saline.All rats were treated for 4 weeks before execution.Results:The kidney injury in rats of Chinese herbs was significantly milder than that in the model group (P<0.05),similar to that in the tripotassium group.Pathology showed congestion in renal cortex vessels,edema of proximal convoluted tubule,congestion in renal medulla,interstitial edema,oxalate crystallization and inflammatory invasion in distal convoluted tubule,oxalate crystallization in teat duct,and exfoliated cells in renal calyceal in kidney injury rats.Conclusion:Chinese herbs Christina loosestrife,Pyrrosia and Plantago can lessen the kidney injury in rats with calcium oxalate stones.The underlying mechanism may be to increase the excreting of calcium oxalate stone in rat's urine.

　　Key words rat renal calculi Christina loosestrife Pyrrosia Plantago tripotassium citrate

　　泌尿系结石是泌尿外科常见病、多发病，我国泌尿系结石发病率为1%～5%。有关单味中药防治肾结石的研究报道较少。本研究通过动物实验验证单味中药金钱草、石韦、车前子对大鼠肾结石模型肾的保护作用，现报道如下。

　　1 材料与方法

　　1.1 实验动物 雄性SD大鼠90只，体重180～220g,普通级。购自上海中科院实验动物中心(上海斯莱克实验动物中心)。动物许可证号：SCXK(沪) 2007?0005。

　　1.2 药物和试剂 金钱草、石韦、车前子免煎剂型(均购自深圳三九医药股份有限公司);乙二醇(无锡市佳妮化工厂);氯化铵(浙江衢州巨化试剂有限公司);枸橼酸钾(上海化学试剂采购供应站)。成石液配制：每升液体含乙二醇12.5g+氯化铵10g[1]。

　　1.3 实验仪器 离心机;普通光学显微镜

　　1.4 方 法 利用随机分组表将90只大鼠随机分为模型组、金钱草组、石韦组、车前子组、阳性对照组(枸橼酸钾组)。每组18只。适应性饲养3天，3天后五组均每天每只大鼠给予成石液10ml(自由摄取)+水30ml(自由摄取)[2];造模同时，模型组每天给予生理盐水2ml灌胃;金钱草组、石韦组、车前子组分别给予金钱草、石韦、车前子免煎剂每天每只0.6g，均配置成2ml液体灌胃;枸橼酸钾组给予枸橼酸钾每天每只0.5g(配置成2ml液体灌胃);所有动物给予正常足量饲料，但控制饮水量。共饲养4周。

　　1.5 观察指标 饲养4周后，同期用下述方法取标本。用10%水合氯醛1ml腹腔注射，麻醉大鼠成功后即剖腹取左肾，固定后常规切片染色，普通光学显微镜下观察，由同一名病理科医生按同一标准(个人习惯标准)采用半定量法判定肾脏充血、炎细胞浸润和肾小管扩张情况。

　　1.6 统计学方法 应用SPSS11.5统计软件包，等级资料采用非参数检验(秩和检验)的Mann?Whitney U检验。

　　2 实验结果

　　2.1 实验动物数量 饲养给药过程中，金钱草组和车前子组各死亡1只大鼠，故取得实验数据的共有88只大鼠。

　　2.2 五组左肾充血情况 半定量法测定左肾充血情况，四药物组的左肾充血情况均明显轻于模型组(P均<0.05)，见表1。三中药组与枸橼酸钾组比较，差异无统计学意义。模型组肾充血情况见图1、2。表1 五组大鼠左肾充血情况只

　　2.3 五组大鼠左肾炎细胞浸润情况 半定量法检测大鼠左肾炎细胞浸润情况，四个药物组大鼠的肾炎细胞浸润均轻于模型组(P<0.05);三中药组与枸橼酸钾组比较，差异无统计学意义，见表2。模型组肾炎细胞浸润情况见图3。表2 五组大鼠左肾炎细胞浸润情况只表3 五组大鼠左肾小管扩张情况只

　　图1 肾皮质充血明显，静脉淤血(模型组)图2 肾髓质充血明显(模型组)图3 高倍镜下，肾小管内白细胞浸润(模型组)2.4 五组大鼠左肾小管扩张情况 四药物组大鼠的左肾小管扩张情况均明显轻于模型组(P<0.05);三中药组与枸橼酸钾组比较，差异无统计学意义(P>0.05)，见表3。模型组肾小管扩张见图4。

　　3 讨 论

　　通过互联网数据库查询，目前有关中药肾结石的文章，多属于中药验方。随机选取27份各种肾结石中药方，经统计后发现使用最多是“三金”(金钱草23/27，鸡内金22/27，海金沙21/27)、“二石”(石韦18/27，滑石13/27)、“二子”(冬葵子12/27，车前子13/27)。“三金”(金钱草、鸡内金、海金沙)清热利湿、通淋排石，用于溶石排石，同时有防石护肾的作用，同属一类;“二子”(冬葵子、车前子)属于清热利尿药，用于预防结石、保护肾脏较有效;“二石”(石韦、滑石)属于利尿通淋药，也用于预防结石、保护肾脏。笔者在三组药物中各选一药进行实验研究，以观察、比较疗效。

　　中药研究表明，金钱草的药理作用为：①增加尿量，②增强输尿管蠕动;③抑制结晶形成过程;④调节pH值;⑤具有抗炎镇痛、细胞免疫抑制、抗菌、抗氧化、抑制肝脏脂质过氧化作用等。车前子具有利尿作用 ，能增加尿素、尿酸及氯化钠的排泄。石韦利尿通淋、清热止血的功效。用于热淋、血淋、石淋、小便不通、淋沥涩痛[3，4]。利尿及促进输尿管蠕动作用在中医属“排石”作用;抑制结晶形成过程、影响调节因子、形成络合物属“防石”作用;调节pH值属“溶石”作用;而抗炎、抑菌、镇痛等则属“护肾”作用[4]。

　　枸橼酸是一种很强的钙离子螯合剂，可降低钙离子活性、浓度及其饱和度，从而减少钙盐结晶的形成。枸橼酸钾能抑制草酸钙和磷酸钙结晶的析出，阻断结石的成核、生长和聚集过程，同时也可碱化尿液，且具有利尿作用[5]。本实验表明，枸橼酸钾能明显减少大鼠肾集合系统内草酸钙结晶形成，减轻大鼠肾脏损伤。

　　实验结果显示，三种单味中药均能减轻大鼠肾脏损伤，疗效与枸橼酸钾相当。且应用单味中药制剂后尿中草酸钙结晶排泄明显高于模型组，而枸橼酸钾组却并不明显。这表明单味中药金钱草、石韦、车前子预防肾结石、保护肾脏的作用可能主要是通过增加尿中草酸钙结晶的排泄，减少其在肾内堆积而达到的，但其详细机制尚待进一步研究。

【】
  　　1 赵宗江，于 波，宋秀英，等.筛选乙二醇法复制大鼠肾结石模型最佳剂量的比较研究.中西医结合肾病杂志，2007,8(11)：628?630

　　2 钟 铃，熊爱华，杨秀华，等.乙二醇法复制肾结石模型给药途径和方法的比较.中国病理生理杂志，2000，16(1)：381?382

　　3 吴金英，贾占红，孙建宁.复方石韦片主要药效的实验研究.浙江实用医学，2005，10(5)：311?313

　　4 杨玲娟，狄留庆，方 芸.中药防治泌尿系结石概述.中国药学杂志，2006,26(11)：1401?1403

　　5 余志运，石洪波，张雪军，等.金桔液预防草酸钙肾结石的实验与临床研究.临床泌尿外科杂志，2005，20(9)：543?545