胃疡平浸膏抗胃溃疡作用研究

【摘要】  　　目的 观察胃疡平浸膏对3种胃溃疡模型动物的保护作用，并初步探讨作用机制。方法将动物分成生理盐水对照组(阴性对照)、胃苏冲剂组(阳性对照)、胃疡平小、中、大剂量组5组，分别灌胃给药一段时间后，按照传统造模方法诱导胃溃疡形成，然后溃疡面积；测定胃酸量、胃酸酸度、胃蛋白酶活性，并与对照组比较分析。结果胃疡平浸膏能抑制大鼠幽门结扎型胃溃疡、小鼠利血平型胃溃疡的形成；促进醋酸烧灼型胃溃疡的愈台；抑制胃液的分泌，降低胃液的酸度和胃蛋白酶含量。此外，该药对小鼠胃肠运动功能有很强的促进作用；能抑制冰醋酸引起小鼠扭体反应。结论胃疡平浸膏对各型胃溃疡均有不同程度的防治作用，其作用机制可能与该药物能减少溃疡鼠胃酸的分泌。

【关键词】  胃疡平； 胃溃疡； 大鼠； 防治作用

　　Abstract：ObjectiveTo investigate the preventive and therapeutic effects of Weiyangping Extract(WYPE) on gastric ulcer of rats and mice induced by different methods，and to exploit its possible mechanism．MethodsDrugs were administrated，and then the models of gastric ulcer were established according to traditional methods．The area of ulcer was calculated and the contents of gastric juice,pepsin and the gastric acidity were measured.ResultsWYPE could not only inhibit the formation of gastric ulcer of rats induced by pylorus ligature and of mice induced by reserpine，but also significantly promote the cure of ulcer induced by acid．Gastric acidity and the concertration of pepsin were decreased．In addition, WYPE could promote gastrointestinal peristalsis，reduce the body torsion induced by acetic acid in mice．ConclusionThese results suggest that WYPE has the preventive and therapeutic effects on gastric ulcer．The effect may be related to the reduction of gastric juice，the decrease in gastric acidity and the activities of pepsin，the analgesic action，etc．

　　Key words：Weiyangping Extract;  Gastric ulcer；  Rats；  Preventive and therapeutic effects

    胃疡平浸膏是在临床上使用多年的中药复方制剂。为深入探讨其抗胃溃疡的作用，本研究观察了该复方对两种急性(幽门结扎型和利血平型)和一种慢性(醋酸烧灼型)胃溃疡模型的防治作用，并通过测定溃疡大鼠胃液分泌量、胃蛋白酶活性以及胃肠运动功能，初步探讨该复方防治胃溃疡的作用机制。

　　1  材料与方法

　　1.1 药物 

　　胃疡平浸膏，由柴胡50 g，五味子40  g，芦荟25 g，丹参10 g，党参10 g等5味中药配伍水煎浓缩而成，含原生药1.49 g/ml，用生理盐水配制成各种浓度的溶液备用，批号20050108；胃苏冲剂，江苏扬子江药业集团公司产品，15 g/包，批号20050506；利血平注射液，上海医科大学红旗制药厂产品，1 mg/ml，批号20050504。

　　1.2 动物 

　　SD大鼠，180～240 g，雌雄不拘。上述动物由南通大学实验动物中心提供，合格证：SYXK（苏）2002-0022。

　　1.3  胃酸测定［1，2］ 

　　采用酸碱中和滴定法。精密量取一定量胃液，加游离酸指示剂(0.5%的对二甲基偶氮苯胺乙醇溶液)和酚酞乙醇(95%）溶液各2滴，用0.1 mol/L氢氧化钠进行滴定至红色消失，开始出现桔黄色为止，即为游离酸终点，继续用0.1 mol/L氢氧化钠滴定至溶液刚出现红色，即为总酸度终点。

　　1.4  胃蛋白酶活性的测定 

　　采用麦特毛细血管法［1］  。将内径为1～2 mm粗细均匀的毛细管截成10 cm长，洗净烘干，取适量蛋清充分打匀后用纱布过滤，将上述毛细管利用虹吸作用灌满蛋清(管内无气泡)，然后置于85℃热水中使蛋白质凝固，待冷后，取出用石蜡将蛋白管两端封固，贮冰箱中备用。实验时取胃液1 ml放入50 ml烧瓶中．加入0.05 mol/L盐酸溶液15 ml摇匀，放进长约2.0 cm 的蛋白管2根。塞好瓶口，放于37℃恒温箱温孵24 h，用尺测量蛋白管两端透明部分的长度(cm)，以两端之值求平均值。胃蛋白酶的单位=平均值2×16。

　　1.5  统计学方法 

　　用stata统计软件进行方差分析、t检验。

　　2  结 果

　　2.1  对不同胃溃疡模型的治疗保护作用

　　2.1.1  醋酸烧灼型胃溃疡 

　　将大鼠分为5组，即生理盐水对照组、胃苏冲剂组、胃疡平小剂量组、胃疡平中剂量组、胃疡平大剂量组(以下各实验分组均与此同)。大鼠按Takage方法［1］诱导胃溃疡，制模24 h后随机分组并给药，连续7 d，第8天处死动物，结扎贲门取出胃，沿胃大弯侧剪开，洗净胃内容物，展开胃壁，将其固定于玻璃片上。测量溃疡面积(mm )并按Okabe法计算溃疡指数（以下实验算法相同）。结果显示，与生理盐水对照组相比，大剂量胃疡平浸膏能显著促进溃疡的愈合(P＜0.01）；中剂量次之(P＜0.05）；小剂量则无明显差异（P＞0.05） ；胃疡平各剂量间呈现一定的量-效关系；大剂量胃疡平浸膏的作用优于胃苏冲剂组(P＜0.05）。结果见表1及图1。表1  胃疡平浸膏对醋酸烧灼型胃溃疡模型的保护作用(略)

　　2.1.2  利血平型胃溃疡

　　参照Parmar方法进行。大鼠随机分组，预防性给药6 d，1次/d，最后1次给药后，皮下注射利血平10 mg/kg体重，6d后处死动物，测量溃疡面积(mm)，并溃疡指数。结果显示胃疡平各剂量组对胃溃疡均有保护作用，胃疡平浸膏大剂量组能显著抑制利血平型胃溃疡的形成(P＜0.01)，中剂量和小剂量作用依次减小(P＜0.01或P＜0.05)，呈现明显的量-效关系；胃苏冲剂组的作用与胃疡平浸膏大剂量组相仿(P＞O.05)。结果见表2及图2。表2  胃疡平浸膏对利血平型胃溃疡模型的保护作用(略)

　　2.1.3  幽门结扎型胃溃疡  

　　各组大鼠分别灌胃给药6 d后，参照Shay氏传统的经典造模方法，将实验大鼠行幽门结扎并停止供水，约18 h后处死，测量溃疡面积(mm)，并计算溃疡指数。结果显示，与生理盐水对照组相比，中、大剂量的胃疡平浸膏能明显抑制胃溃疡的形成(P＜0.05或P＜0.01)；胃苏冲剂组的作用与胃疡平浸膏大剂量组相仿(P＞0.05)。结果见表3。表3  胃疡平浸膏对幽门结扎型胃溃疡模型的保护作用(略)

　　2.2  对胃液分泌的影响 

　　将大鼠分组给药6d后，接Shay法制胃溃疡模型，在结扎大鼠幽门5 h后，收集胃液，以2 500～3 000 r/min离心10 min，取上清液分别测定游离酸、总酸度和胃蛋白酶活性。实验表明，胃疡平大剂量组能明显减少大鼠胃液的分泌量（P＜0.01），减少总酸度排出量，并明显降低了胃蛋白酶的含量（P＜0.01），与胃苏冲剂的作用相仿；中、小剂量组对酸度和胃蛋白酶的含量的影响不明显(P＞0.05)。结果见表4。表4  胃疡平浸膏对胃液分泌的影响（略)

　　2.3  对胃肠运动功能的影响

　　大鼠随机分组，连续给药6 d，最后1次给药后禁食12 h，不禁水，然后每组小鼠分别灌服墨汁阿拉伯胶溶液0.1 ml/10 g体重，30 min后将动物处死，打开腹腔分离肠系膜，剪取上至幽门、下至回盲部的肠管，置于托盘上。轻轻将之拉成直线，以幽门至墨汁前沿作为“墨汁在肠内推进距离”，并同时测量肠管的总长度，以两者的比值大小反映胃肠运动功能的强弱，墨汁推进百分率（%）=［墨汁在肠内推进距离/cm/小肠全长/cm］×100%。结果显示，与生理盐水对照组相比，其余各给药组均能明显提高小鼠胃肠推进速度，其中胃疡平大、中、小剂量间呈现明显的量-效关系，大剂量胃疡平组与胃苏冲剂组作用相仿。

　　2.4  镇痛作用 

　　小鼠随机分组，预防性给药6 d，最后1次给药1 h后，每鼠腹腔注射0.7% 冰醋酸0.1 ml/10 g体重致痛，记录注射致痛剂后15 min内各鼠扭体次数。结果显示在注射致痛剂后15 min内，除小剂量胃疡平组外，其余4组小鼠扭体次数明显少于生理盐水对照组(P<0.01)。

　　3  讨论

    目前对胃溃疡形成的原因有多种解释，尚未形成肯定的病因理论。有关研究表明，胃溃疡形成之一是胃黏膜屏障功能受破坏，使氢离子从胃腔中回渗损伤黏膜。胃疡平浸膏是由柴胡、五味子、芦荟、丹参、党参等5味中药配伍而成，研究表明其中各单味中药均有较好的抗溃疡作用，如柴胡皂苷抑制胃液分泌，降低胃液的酸度，抑制胃蛋白酶活性，降低胃溃疡的发生率，芦荟对胃损伤有显著的抑制作用，抑制胃蛋白酶活性和胃酸分泌。丹参抑制实验性胃溃疡的形成，增加胃黏膜血流，减少氢离子逆扩散，保护黏膜屏障完整性，增强其防御机能。党参抗胃溃疡的发生，可能是通过提高胃黏膜的前列腺素水平，对抗胃溃疡的攻击因子，从而增强胃粘膜屏障。
   
　　本实验用两种急性胃溃疡模型及一种慢性胃溃疡模型研究了胃疡平浸膏防治溃疡的作用。幽门结扎型胃溃疡是由于幽门结扎后使胃液在胃内潴留，造成胃酸、胃蛋白酶的侵蚀消化力处于亢进状态所致。对该模型的胃分泌实验显示，胃疡平浸膏能抑制胃液的分泌、明显降低胃液的酸度和胃蛋白酶的活性，说明抑制胃酸、胃蛋白酶的侵蚀力是该药保护幽门结扎型溃疡的可能作用机制。醋酸烧灼型胃溃疡的发生是醋酸直接对胃组织的侵蚀，造成局部血液循环障碍引起溃疡，其病理形态和修复酷似人类胃溃疡，有利于观察药物的效果。本实验发现胃疡平浸膏对该模型胃溃疡有良好的治疗作用，表现在治疗一段时间后溃疡面积较对照组明显减少，说明该药有促进溃疡愈合的作用。利血平性胃溃疡可使儿茶酚胺耗竭，迷走神经的兴奋性相对提高，使胃液分泌增加，胃黏膜缺血而致溃疡。胃疡平浸膏对该模型溃疡的保护作用可能与抑制其胃液分泌作用有关。此外该中药制剂对溃疡小鼠的胃肠运动功能有明显的促进作用，这可能与该浸膏能改善胃溃疡的临床症状有关。胃疡平浸膏既能防止幽门结扎及迷走神经兴奋所致的急性胃溃疡的形成，又有促进醋酸所致慢性胃溃疡的愈合和改善消化不良的作用。实验结果表明胃疡平浸膏是一种较好的抗胃溃疡的中药复方制剂。

【】
  　　［1］中华人民共和国卫生部药政局.新药(西药)临床前研究指导原则汇编(药学药毒理学)［S］.1993：88.

　　［2］胡觉民，延光．延胡索酸抗大鼠实验性胃溃疡的作用［A］.陈 奇.中药药理研究方法学［M］.北京：人民卫生出版社，1993：462.

　　［3］邓兰琼,王国荣. 柴胡桂枝汤对乙酸胃溃疡大鼠再生黏膜表层黏液的影响［J］.中西医结合消化杂志，2005,13(4)：243.

　　［4］傅继华, 温涛,徐琛，等. 芦荟多糖对动物实验性胃溃疡的影响［J］.中草药，2006，37(6)：894.

　　［5］李廷荃，马贵同 ，赵晋明.丹参对大鼠胃溃疡愈合过程中碱性成纤维细胞生长因子及其受体［J］.上海中医药杂志，2005，39(12)：51.

　　［6］刘海鹏，陈向涛. 党参、白及、制大黄及其配伍抗大鼠实验性胃溃疡作用［J］.中国临床药理学与治疗学杂志，1997,2(2)：92.