抗乳增片治疗大鼠乳腺增生的实验研究
作者：周会，龙子江，陈明，王靓，卞海，余燕, 崔东梅
【摘要】 目的 研究抗乳增片对大鼠乳腺增生病的作用及其机制。方法 采用手术摘除卵巢后腹腔注射苯甲酸雌二醇造成大鼠乳腺增生模型。结果 与模型组比较，抗乳增片治疗组的大鼠乳头红肿、增大均较轻;血清雌二醇水平较低，孕酮水平较高；凝血时间延长；血流变各项指标明显改善。结论 抗乳增片对大鼠乳腺增生病有治疗作用，其机制可能是通过调节大鼠的激素水平和改善血液流变性来实现的。
【关键词】 抗乳增片；乳腺增生；药效学；大鼠
乳腺增生可发生于青春期开始以后的任何年龄妇女，尤以20-45岁的女性居多，约占全部乳腺疾病的75%。无论在发达国家还是家，乳腺增生病都是女性乳房疾病的第一大病症且发病呈低龄化趋势。抗乳增片具有疏肝补肾、活血化瘀、止痛散结的功能。本实验拟通过观察本复方对乳腺增生模型大鼠的乳腺增生病的治疗作用,探讨该复方防治乳腺增生病的可能机制。
1 材料与方法
1.1 实验药物
苯甲酸雌二醇注射液由上海通用药业股份有限公司生产，批号：030402，规格：1mL∶2mg；逍遥丸由河南省宛西制药股份有限公司生产，批号：060118，规格：每8丸相当于原药材3g；抗乳增片由安徽省医药研究所提供。测定雌二醇(E2)、孕酮(P)的放免试剂盒由北京原子高科试剂公司生产；YDA?IV型血液粘度计由北京宏润达科技发展有限公司生产。
1.2 动物及其分组
普通级SD雌性未孕大鼠,体重(200±16)g，由本院实验动物研究中心提供。称重，随机分为6组，每组10只，分别为假手术组(A组)、模型对照组(B组)、阳性药物逍遥丸组(C组)和抗乳增片大、中、小剂量组(D、E、F组)。
1.3 大鼠乳腺增生模型的建立
假手术组大鼠只打开腹腔，不摘除卵巢，其他各组每鼠均摘除两侧卵巢，手术第2天起隔天腹腔注射苯甲酸雌二醇0.3mg/kg，连续15 次。此时大鼠乳头出现红、肿和增大,并有部分乳晕出现,大鼠乳腺增生模型形成。
1.4 给药方法
造模后抗乳增片大、中、小剂量组分别给予2.03、0.68、0.23g/kg抗乳增片；阳性对照组给予6.48g/kg逍遥丸；正常对照组和模型对照组灌服蒸馏水，给药量均为10mL/kg，每日1次，连续给药4周。
1.5 检测项目
1.5.1 大鼠乳房外观的检测
给药前后用游标卡尺测量各鼠第一对乳房(靠后肢)的乳头直径、高度，观察乳头颜色以及乳晕大小。
1.5.2 血清中雌二醇、孕酮的测定
给药4周后，从大鼠眼眶静脉丛取血，放免法测定血清雌二醇、孕酮的水平并用玻片法测定各组大鼠的凝血时间(coagulation time, CT)。
1.5.3 大鼠血流变学的测定
水合氯醛麻醉，主动脉放血处死大鼠，按要求留取血液，用YDA?IV型血液黏度计检测血液黏度，用压积管法检测红细胞压积(hematocrit, HCT)、血沉(erythrocyte sedimentation rate, ESR)；提取血浆,应用YDA?IV型血液黏度计检测血浆黏度。
1.6 统计学处理
原始数据采用SPSS 10. 0 统计软件包进行统计学处理，统计学方法为方差分析，组间比较采用t检验：P<0.05表示组间有显著性差异。
2 结 果
2.1 对大鼠乳头直径及高度变化的影响
造模后大鼠乳房明显肿大,表现为乳头直径和乳头高度均较正常组显著增加。给药后逍遥丸组及大、中剂量抗乳增片组大鼠乳头直径和乳头高度较模型组明显减小(表1)。表1 大鼠给药前后乳房直径和高度的变化（略）
2.2 对大鼠血清E2、P水平的影响
由表2可见，模型对照组大鼠血清E2比假手术组有显著增加(P<0.05)，P比假手术组显著减少(P<0.01)。给大鼠药物后，其中逍遥丸组，抗乳增片大、中剂量组大鼠血清E2、P变化显著。
2.3 对大鼠血液流变学的影响
模型对照组全血黏度、血浆黏度、血沉显著高于假手术组；且红细胞压积较低，凝血时间较短。各用药组血液流变学指标有所改善，大部分指标接近正常水平，且抗乳增片大、中剂量组作用优于低剂量组(表3)。说明该药有显著的活血化瘀的功能。表2 抗乳增片对乳腺增生大鼠血清E2、P水平的影响（略）表3 抗乳增片对乳腺增生大鼠血液流变学的影响（略）
3 讨 论
乳腺增生病的发病机制到目前为止仍不清楚。医学认为其发病机制与体内雌激素水平异常增高有关[1]。在治疗方面多采用降低雌二醇、纠正激素分泌紊乱的方法。国外一直采用针对雌激素增高选用抑制雌激素类药物的治疗方案，如达那唑、三苯氧胺等能抑制卵巢功能，使体内甾体激素大幅减低，竞争性与体内雌孕激素受体结合[2]。此法虽具有一定的疗效，但副作用大，停药后容易复发且会加重机体内分泌的紊乱。中医药治疗乳腺增生有一定的优势[3?7]，抗乳增片由柴胡、当归、白芍、白术、茯苓、甘草、王不留行等药制成，具有活血化瘀，软坚散结，疏肝行气之功效。实验中，采用摘除卵巢加注射雌二醇的方法造成大鼠乳腺增生病理模型[8]。经过抗乳增片治疗后其乳头的高度、直径明显缩小，血清雌二醇含量降低，而孕酮水平明显提高。治疗组大鼠的凝血时间长于模型对照组，各项血流变学指标接近假手术组。表明抗乳增片具有活血、化瘀、通络的作用，这可能是其治疗乳腺增生病的机制之一。另外，乳腺增生的发生、有明显的性激素依赖性。雌激素的主要作用是刺激乳腺导管的生长，而孕酮则能够对抗高雌激素状态，抑制垂体与卵巢功能，抑制病情发展[9]。实验结果显示模型对照组血浆E2水平显著高于正常组，大剂量治疗组血浆E2水平显著低于模型对照组，P水平显著高于模型对照组。这表明该药物的治疗作用与改善机体内分泌环境有关。这可能是该复方治疗乳腺增生病的机制之二。但是，有关抗乳增片的安全性、镇痛、消肿等其他作用机制的研究还在进行之中。
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