甲状腺素对重症急性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障功能的保护作用

【摘要】  ［目的］探讨重症急性胰腺炎时甲状腺激素的代谢异常与肠黏膜屏障损伤之间的关系，观察外源性甲状腺激素对肠黏膜屏障的保护作用.［方法］取Wistar大鼠分为假手术对照组、胰腺炎组及甲状腺素组，均应用牛磺胆酸钠制作重症急性胰腺炎模型，腹腔注射给予假手术对照组及胰腺炎组大鼠生理盐水2mL／kg,给予甲状腺素组大鼠甲状腺素15μg/kg.于给药12h时检测外周血FT3,FT4,促甲状腺激素和门静脉血内毒素及血清淀粉酶水平，并观察肠黏膜形态学变化.［结果］胰腺炎组大鼠血清FT3,FT4值显著降低，血浆内毒素及血清淀粉酶水平显著升高，肠黏膜损伤评分升高,与假手术对照组比较均有显著性差异；甲状腺素组大鼠内毒素水平与胰腺炎组比较显著降低，血清FT3,FT4值显著升高.［结论］胰腺炎时补充外源性甲状腺素对肠黏膜屏障功能具有保护作用.

【关键词】  胰腺炎 急性坏死性 肠黏膜 甲状腺激素 大鼠

    ABSTRACT:OBJECTIVETo investigate the relationship between abnormal metabolism of thyroxin and injury of intestinal barrier, and observe the protective effects of exogenous thyroxin for intestinal barrier function in rats.METHODSWistar rats were randomly divided into 3 groups: sham operation group (SO),  severe acute pancreatitis (SAP) group,   thyroxin (TH) group.  Serum FT3, FT4, TSH  levels and serum amylase, plasma endotoxin level in the portal vein and injure of instestinal mucosal grade were examined on 12h.RESULTSCompare with SO group,  in SAP group the serum FT3, FT4 levels were decreased, serum amyluse, plasma endotoxin level in portal vein were increased, and injure grade of intestinal mucosal were increased, and have significantly difference. Compare with SO group and TH group showed no significantly difference.CONCLUSIONSupplement of exogenous thyroxin can protect intestinal mucosal barrier in rats with severe acute pancreatitis.

    Key words:pancreatitis, acute necrotizing;intestinal mucosa;thyroid hormones;rats

    目前因肠黏膜屏障功能损害所致的内源性感染仍是引发重症急性胰腺炎患者出现多脏器功能衰竭,甚至死亡的重要原因［1］.本研究通过建立重症急性胰腺炎动物模型，探讨重症急性胰腺炎时甲状腺素的代谢异常与肠黏膜屏障损伤之间的关系，观察了外源性甲状腺素对肠黏膜屏障的保护作用.

    1  材料与方法

    1.1  材料  实验动物取健康Wistar大鼠，雌雄不限，体重为200～250g，由延边大学医学部实验动物科提供.甲状腺素、鲎试剂盒及牛磺胆酸钠为SIGMA公司产品；甲状腺素放射免疫试剂盒及促甲状腺素放射免疫试剂盒均为天津原子能公司产品.主要仪器有D?37520型高速冷冻离心机、UV?2100型分光光度计、DFM?96型多管放射免疫计数器及日本岛津产SP?4430型全自动生物化学分析仪.

    1.2  方法

    1.2.1  分组  取42只Wistar大鼠，分为3个组，即假手术对照组10只，胰腺炎组15只，甲状腺素组17只.

    1.2.2  模型制作  术前禁食12h，自由饮水.利用100mL/L的水合氯醛（3mL/kg）行腹腔注射麻醉,无菌条件下给胰腺炎组及甲状腺素组大鼠行腹正中线入腹术，充分游离脾脏，提起脾和胰腺尾部，于胰腺被膜下均匀注射30g/L牛磺胆酸钠1mL;假手术对照组大鼠仅做开腹手术，并行翻动胰腺.术后腹腔注射给予假手术对照组及胰腺炎组大鼠生理盐水2mL／kg,给予甲状腺素组大鼠甲状腺素15μg/kg.所有大鼠术后均给予标准饲料，自由饮水，分笼饲养.给药12h后在无菌条件下采集标本，观测相关指标.

    1.2.3  观察指标及方法  剖取大鼠小肠组织，用100mL/L甲醛固定，石蜡包埋，5μm厚度切片，行HE染色，在光学显微镜下观察肠黏膜组织,并按Chiu's标准进行损伤评分.取大鼠下腔静脉血1mL,加抗凝剂离心取血浆，应用SP?4430型全自动生物化学分析仪测定血淀粉酶值.取外周血2mL,离心取血清，应用DFM?96型多管放射免疫计数器测定血清FT3,FT4,促甲状腺激素值.取门静脉血2mL,加抗凝剂，离心取血浆，应用UV?2100型分光光度计鲎试剂显色定量法测定血浆内毒素值.

    1.2.4  统计学处理  实验数据用均数±标准偏差（±SD）表示，组间比较采用t检验，采用SPSS10.0统计软件进行.

    2  结果

    2.1  肠黏膜组织形态学观察  光学显微镜下可见假手术对照组大鼠回肠形态正常，绒毛结构完整，上皮细胞呈高柱状，纹状缘整齐，间质无水肿，无炎性细胞浸润；胰腺炎组大鼠小肠黏膜绒毛上皮明显变短,部分坏死脱落，大量炎性细胞浸润（图1），肠黏膜损伤评分与假手术对照组比较有显著性差异（P＜0.01)；甲状腺素组大鼠小肠黏膜绒毛变短增粗,固有层水肿,炎性细胞浸润较胰腺炎组减少(图2)，肠黏膜损伤评分与假手术对照组比较无显著性差异（P＞0.05)；见表1.

    2.2  淀粉酶测定  由表1可见,胰腺炎组血淀粉酶值明显升高，与假手术对照组比较有显著性差异（P＜0.01);甲状腺素组血淀粉酶值与胰腺炎组比较无显著性差异（P＞0.05）. 表1  肠粘膜损伤评分及血淀粉酶测定结果

    2.3  甲状腺素测定  由表2可见,胰腺炎组血清FT3,FT4值与假手术对照组比较明显下降（P＜0.01）；甲状腺素组大鼠血清FT3,FT4值与胰腺炎组比较明显升高，相比较均有显著性差异（P＜0.01）;各组血清促甲状腺激素值间无显著性差异（P＞0.05）.

    2.4  内毒素水平测定  由表2可见，胰腺炎组大鼠门静脉血内毒素值与假手术对照组比较明显升高，甲状腺素组与胰腺炎组比较明显下降，相比较均有显著性差异（P＜0.01）.表2  各组甲状腺素及内毒素水平测定结果

　　3  讨论

    正常肠道黏膜具有阻止肠道内细菌及其分解产物经肠壁逸出的屏障功能，而完整的屏障功能依赖于肠黏膜的机械屏障、肠黏液屏障、肠腔内的生物层及免疫屏障.发生重症急性胰腺炎时机体处于应激或休克状态，肠黏膜血液供应减少而耗氧量增加，极易造成肠黏膜缺氧，并通过机体释放的细胞因子、炎性介质、氧自由基及蛋白酶类等途径使微循环进一步恶性循环，导致肠黏膜通透性增高，造成内毒素血症和细菌移位，最终导致多脏器功能衰竭［2］.外科应激时，患者多存在着外周甲状腺素代谢障碍，表现为FT3值降低，FT4值正常或下降，rT3水平升高，但甲状腺本身正常，且T3水平越低，病情严越重，预后越差，即所谓的正常甲状腺病态综合征［3］.因此，提示补充外源性甲状腺素纠正低T3状态，可以改善代谢和具有保护脏器的功能.本研究通过制作大鼠重症急性胰腺炎模型，给予外源性甲状腺素，观察了甲状腺素对肠黏膜屏障的保护作用，结果表明术后12h 胰腺炎组大鼠血清FT3及FT4水平较假手术对照组明显下降,而甲状腺素组则显著升高，形态学观察可见，甲状腺素组大鼠肠黏膜损伤评分与假手术对照组比较无显著性差异，提示补充外源性甲状腺素对肠黏膜具有保护作用.

【】
  ［1］ Johnsen D, Mayers I.Multiple organ dysfunction syndrome:a narrative review［J］.Can J Anaesth,2001,48:502.

［2］ 方金苗，夏时海.重症急性胰腺炎发病机制的研究进展［J］.解放军医学杂志，2005，16（5）：375.

［3］ 杨连粤, 黄耿文.外科危重病人正常甲状腺病态综合征的研究进展［J］.实用外科杂志,2000,20（2）:114.?